TECHNIQUE PROPOSÉE

Prélèvement.

Les urines émises en vingt-quatre heures sont recueillies sur acide chlorhydrique (une cuillerée à calé de HCI. par litre d’urine environ).

Hydrolyse.

100 cc. d’urines sont hydrolvsées pendant 15 minutes sous réfrigérant à reflux, en présence de 10 cc. de HCÏI concentré. Puis on refroidit rapidement.

Extraction.

a) Soit à l'ampoule à décantation. On fait trois extractions successives par 50 cc., puis 25cc., puis encore 25cc. d’éther. On mélange ensuite les trois extraits éthérés ainsi obtenus.

b) Soit à la colonne. On fait tomber goutte à goutte lextrait chlorhydrique dans l’'éther ; on fait trois passages successifs ; on rejette la couche aqueuse, on conserve la phase éthérée.

ATAU.

Lavages de l'extrait éthéré.

D'abord par 25cc. de solution saturée de bicarbonate de soudé, puis par 25 ce. d’eau distillée.

Elimination des œstrogènes ou phénolstéroïdes.

On fait ensuite trois lavages par la soude deux fois normale (20 cc., 20 cc., puis 20cc.), ; puis trois lavageS à l’eau (trois fois 20 cc).

L’extrait éthéré, bien que limpide, contient un peu d’eau; on le fait passer sur sullate de soude desséché à l’étuve à 100° ; puis on lave le sulfate de soude à l’éther.

Recueil et évaporation de l'extrait.

On recueille dans un erlenmevyer tout l'éther ainsi obtenu. On fait évaporer léther sur lampe électrique et sous trompe à vide (un flacon placé entre le réfrigérant et la trompe permet de récupérer une partie de l’éther).

Une fois Févaporation terminée, laisser la trompe à vide en place pendant quelques minutes pour Ôter toute trace de péroxvde capable de donner une coloration surajoutée de ZIMMERMANN.

Dosage colorimétrique.

On reprend le résidu sec par 2cc. d'alcool à 98° purifié (ne contenant ni péroxvde, ni cétone). Cet alcool s'obtient par redistillation, sur chaux vive du marbre, de l'alcool 95°/96° du commerce.

La réaction de ZIMMERMANN proprement