INTRODUCTION

On connaît les services importants que la thérapeutique retire des matières mucilagineuses renfermées dans les végétaux. On sait aussi que c’est aux plantes de la famille des Malvacées qu’elle emprunte une grande partie de ces substances et principalement aux genres A/hæa et Malva. Le mucilage dans ces plantes est non seulement très abondant, mais encore il s’y présente avec des caractères histologiques tout particuliers. De plus, il se trouve contenu dans des appareils sur la nature morphologique desquels tous les botanistes ne paraissent pas d'accord.

Pour la plupart des auteurs, en effet, les mucilages seraient renfermés dans des réservoirs ou des poches lysigènes. Ces poches seraient formées par gélification et résorption de la membrane de séparation de deux ou plusieurs cellules mucilagineuses voisines. Des observations très nombreuses sur les divers organes de /’A/ha officinalis et du Malva sylvestris, comme aussi sur des espèces

voisines, ne m'ont pas permis de constater des formations de ce genre.

Aussi me suis-je proposé, dans ce mémoire, d'indiquer d’abord . les tissus pouvant devenir le siège d’une production mucilagineuse, et ensuite, la nature des réservoirs renfermant ces principes. Je me suis borné à étudier les deux genres A/fhæa et Malva uniquement parce que ce sont les deux genres indigènes fournissant du mucilage et figurant au Codex. C’est donc du développement et de la localisation des mucilages chez les Malvacées officinales qu'il sera question dans ce travail.

Pour entreprendre ces recherches, il était indispensable de posséder un bon réactif des mucilages ; car je crois attribuer les divergences d'opinion qui existent sur la nature morphologique des réservoirs, au manque absolu d’un réactif vrai des mucilages des Malvacées. Jusqu'ici, en effet, les divers réactifs microchimiques qui étaient donnés pour caractériser les mucilages proprement dits et dont j'ai usé au début, avaient le grave inconvénient de colorer également la paroi de la cellule et son contenu. Aussi, dans certains cas, il devenait presque impossible de différencier le contenu du contenant et l’on comprend alors combien il était aisé de prendre l’un pour l’autre.

Il fallait donc, pour trancher la question, trouver un réactif colorant le mucilage, à l'exclusion de toute autre substance. M. Pée-Laby, docteur ès-sciences, chef des travaux pratiques au laboratoire de botanique à la Faculté des sciences de Toulouse, a eu la bonne fortune, au cours de ses recherches, de préparer une teinture d’hématoxyline qui ne colore guère que le mucilage. Grâce à ce nouveau réactif, dont M. Pée-Laby a bien voulu me donner la formule (1), J'ai pu continuer mes recherches, dont j'in-

(1) Un nouveau réactif des mucilages.— Les personnes qui s'occupent d'’histologie ou d'histogénie végétale savent combien un bon réactif est précieux. J'ai eu moi-même l’occasion d'apprécier l'importance des services que peut rendre un colorant bien sensible, quand j'ai voulu étudier les divers mucilages qu’on rencontre dans les plantes. J'avais bien à ma disposition les réactifs indiqués par les traités de technique microscopique (1), mais,

(1) STRASBURGER. — Man. d'Anat. végét. Paris, Savy, 1886, page 109. HENNEGUY. — Traité d'anat. microscop. Paris, Doin, 1889, pag. 104-117

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dique plus loin les principaux résultats. Qu'il me soit permis de lui exprimer ici toute ma reconnaissance.

Je dois aussi des remerciements tout spéciaux à M. Leclerc du Sablon, professeur de botanique à la Faculté des sciences de Tou-

louse, qui a bien voulu me guider dans mes recherches et m’en-

courager de ses précieux conseils.

outre leur inefficacité bien marquée dans certains cas, ils avaient tous le grave inconvénient de colorer à la fois et de la même façon les parois des éléments qui les renfermaient.

C'est alors que j'ai eu l'idée de chercher une solution histologique qui colorât presque exclusivement les principes mucilagineux. Laissant de côté les diverses catégories de mucilage établies par les auteurs (1), je ne me suis occupé que de ceux qui proviennent de la gélification de la cellulose, comme on en rencontre dans les Malvacées, les Tiliacées, etc. Pour cela, j'ai eu recours à l'hématoxyline, qui est un des réactifs de la cellulose ; après un grand nombre de tâtonnements, je suis arrivé à composer une teinture qui n’a d'action que sur lès mucilages ou qui colore si peu la membrane qu'il est toujours très facile de distinguer les portions gélifiées de celles qui ne le sont pas.

On sait que la teinture d'hématoxyline de Grenacher (2) jouit de la réputation d'avoir une action élective bien marquée sur certains éléments végétaux ; ainsi : elle colore en violet intense le noyau de la cellule, tandis qu’elle laisse à peu près intacte la membrane. Mais on sait aussi qu'elle n’est applicable qu'à certains tissus, et encore d'une façon tout à fait inconstante. De plus, cette teinture se décompose très rapidement, qu'elle soit mise ou non à l'abri de la lumière ; ou bien elle dépose et alors n'a plus d'effet ; ou bien elle se couvre de moisissures tout en se troublant complétement.

J'avais essayé cette teinture pour colorer les mucilages ; elle ne me donnait que de médiocres résultats, alors seulement qu'elle était fraichement préparée, tandis que la teinture de Bæœhmer (3) colorait en tout temps le mucilage et la membrane. En mélangeant ces deux teintures dans diverses proportions, j'obtenais encore une coloration assez marquée ; d'autre part, j'avais remarqué qu'en laissant, pendant quelques heures, des coupes ainsi colorées dans une solution saturée d’alun ammoniacal, la membrane perdait un peu sa coloration. Cette dernière observation m'engagea à chercher la formule du réactif dont la préparation et le mode d'emploi font l’objet de cette note.

Avant d'indiquer la préparation de cette tcinture, il est bon de mettre en garde les botanistes contre une opération qui ne leur attirerait que des déceptions. On trouve dans le commerce, en effet, sous le nom d’hématoxyline, deux substances : l’une, sous forme de poudre noirâtre, et l'autre, en gruméaux cristalloïdes, à peu près incolores. La première ne vaut rien pour la recherche des mucilages. On utilisera donc seulement la seconde.

On fait une dissolution saturée d'hématoxyline dans de l'alcool absolu; on prépare ensuite une solution également saturée d'alun ammoniacal que l’on a soin de faire bouillir longtemps pour la débarrasser des gaz qu’elle peut contenir, et en particulier, de l'acide carbonique. Cette dernière condition est indispensable si l’on veut conserver la teinture d’hématoxyline. On laisse refroidir, puis on verse immédiatement 1 cent. cube de solution d'hématoxyline dans 100 cent. cubes de solution ammoniacale. Il faut avoir soin de boucher soigneusement le flacon dans lequel on a fait le mélange.

* Tout d’abord, il ne se produit rien; après quelque temps, on voit apparaître une coloration

(1) GrRauD. — Ætude comp. des gommes et des mucilages; thèse de pharm. Dijon 1875, pag. 52, 53 et 70.

(2) Cette teinture, attribuée à tort à Grenacher, est de Delafield ; sa formule est indiquée dans Strasburger, loco “ilo, pag. 392.

(3, STRASBURGER, loco cito, pag. 392.

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Les matériaux dont je me suis servi pour ce travail ont été pris, en partie, dans le jardin botanique de la ville de Toulouse, et en partie, dans une serre chaude qui m’a été très utile pour les germinations. ce

Avant d’être examinées, toutes les plantes ont été plongées immédiatement dans l'alcool à 90°, afin de coaguler la matière

rosée qui devient de plus en plus foncée tout en tournant insensiblement à la teinte violacée bien marquée ; pour hâter l'apparition de cette coloration, il faut agiter fortement,

On expose ensuite le mélange à la lumière pendant plusieurs Jours, tout en ayant la préseaution d’agiter assez longuement au moins deux fois par jour. Il se forme bientôt (cela dépend aussi de la température extérieure) un dépôt d’alun dont on débarrasse la liqueur par filtration, à la suite de laquelle on expose de nouveau à la lumière. On répète cette opération jusqu'à ce qu'il ne se forme plus de dépôt important; ordinairement, cela arrive vers le dixième jour. Il faut éviter de laisser le flacon trop longtemps débouché ou de filtrer dans une atmosphère acide.

On attend environ encore huit jours avant d'utiliser cette liqueur qu'on filtre une fois par jour ; j'ai remarqué que, sans cette précaution, le liquide passait assez vite du rose violacé au violet noirâtre ; dès lors, il n’est plus bon à colorer même la cellulose. On peut alors cesser l'exposition à la lumière et achever la préparation. On ajoute 30 p. 100 de glycérine chimiquement pure. Cette dose de glycérine est indispensable pour l'étude qu’on se propose : d’abord la solution augmente en réfringence ; ensuite, elle affaiblit l'intensité de la coloration primitive trop forte pour être employée dans cet état. Et même, si dans certains cas on trouve que la coloration est trop foncée, rien n'empêche d'ajouter une proportion plus forte de glycérine.

La teinture d'hématoxyline ainsi préparée, filtrée une dernière fois, peut être utilisée immédiatement. Pour la conserver, il est essentiel de prendre certaines précautions : d’abord, il faut la mettre dans un flacon bien bouché et éviter de la laisser exposée à des vapeurs acides. On doit ensuite la filtrer tous les huit jours environ. Je conserve de cette façon, depuis plus de six mois, un flacon de cette teinture dont je me sers très souvent, tandis que j'en ai perdu un autre que j'avais négligé de filtrer.

Quant au mode d'emploi de cette teinture, il est tout simple. On ne doit la faire agir que sur des coupes provenant d'échantillons conservés dans l'alcool. Il ne faut pas ensuite que les coupes restent plongées plus d’une minute dans ce réactif; après quoi, on les lave immédiatement à l'alcool et on les monte à la glycérine pure ou au baume. De cette façon, on obtient des coupes dans lesquelles le mucilage, coloré en rose violacé clair, est resté en place et ne diffuse pas en dehors des parois des cellules. En outre, il n'y a guère que le mucilage qui est coloré ; c’est à peine si les éléments voisins ont subi l’action du réactif. C'est ce qui permet, dans les tissus jeunes, d'assister, pour ainsi dire, à la gélification des membranes des cellules.

Si on essaie de faire agir cette teinture sur d’autres tissus considérés comme renfermant des principes mucilagineux, comme, par exemple, le rhizome du Chiendent, la graine de Lin, les écailles du Lys, l’albumen de certaines Légumineuses, etc., ete., on n'obtient aucune espèce de coloration, ce qui est très utile dans certains cas pour différencier les substances mucilagineuses. En outre de ces avantages, ce réactif en possède un autre non moins impor-

tant : celui de se conserver longtemps. ; E. PÉE-LABY

DOCTEUR ES-SCIENCES NATURELLES, Chef des travaux de botanique à la Faculté des sciences de Toulouse.

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mucilagineuse dans les divers tissus où elle se trouvait au moment de la récolte. Les coupes pratiquées sur les organes de végétation ont été placées directement dans l’hématoxyline, lavées à l'alcool et montées ensuite dans la glycérine pure. Pour l'examen des fleurs, j'ai suivi une technique un peu différente que j'ai le soin d'indiquer en tête du chapitre relatif à cette étude.

Quant aux figures représentant les divers appareils mucilagineux, elles ont toutes été dessinées à la chambre claire du

: D'Malassez, à des grossissements variables, mais toujours indi-

qués dans la légende explicative.

Ce mémoire comprend trois parties: la première, purement historique, est destinée à faire connaître les diverses opinions qui ont eu cours sur ce sujet jusqu'à ce jour. Dans la deuxième, je consacre deux chapitres à l'examen histologique des divers organes de la Guimauve, de la Mauve et des principales espèces voisines. Et, enfin, dans la troisième, sous le titre de: Conclusions, je fais connaître les principaux résultats de mes recherches.