CORPS DIVERS

$ 1. —Protéides

Outre les corps définis que nous avons étudiés chacun à leur place, la cellule végétale forme un grand nombre de corps albuminoïdes dont les caractères ne sont pas encore connus et qui ne peuvent être ni définis, ni classés. Toutes ces matières présentent des réactions

générales ; nous allons résumer les plus importantes (1).

I. —On fait chauffer les corps dans un peu d’eau; on ajoute un peu de lessive de potasse, et la liqueur qui contient la coupe étant maintenue bouillante, on porte un peu de liqueur de Fehling; une coloration violette indique la présence de matières albuminoïdes.

IT. — On place les coupes dans une solution concentrée de sulfate de cuivre ou dans une solution d’acétate de cuivre. On laisse en présence pendant quelques minutes; on porte alors les coupes dans une solution chaude de potasse; coloration violette. à IT. — On place les coupes dans une solution aqueuse d'iode. La coloration des matières protéiques varie du jaune au brun. On peut se servir pour cette réaction d’une solution d'iodure de potassium iodé. L'aflinité des matières protéiques pour l’iode est plus faible que celle de l’amidon pour ce corps; donc s’il existe de l’amidon, c'est lui qui se colorera tout d'abord. :

IV. — On traite les coupes par l'acide nitrique concentré : les matières albuminoïdes sont colorées en jaune et forment de l’acide xanthoprotéique; cette réaction est activée par la chaleur. On augmente la coloration jaune en ajoutant un peu de lessive de potasse ou une petite quantité d'ammoniaque, parce que les xanthoprotéates de potassium et d'ammoniaque sont plus vivement colorés que l'acide xanthoprotéique.

V. — On peut traiter la coupe par le réactif de Millon, qui donne une coloration rouge brique avec les protéides. On active la réaction en chauffant.

Les membranes sont souvent désorganisées par l'effet du réactif, mais les matières protéiques ne sont pas détruites, même si l'on chauffe jusqu'à 100°.

VI. — Porter la coupe dans une solution aqueuse concentrée de saccharose, ajou-

(1) Nous rappelons ici que les protéides réagissent souvent comme les alcaloïdes et qu'ils réduisent aussi l'acide osmique ; nous ne revenons pas sur ces réactions.

ler sur le bord du couvre-objet une goutte d’acide sulfurique concentré (réaction de Raspail) ; coloration rouge, rose ou violette.

Ces différentes réactions ne sont pas spéciales aux matières protéiques ; la réaction de Raspail se produit avec plusieurs alcaloïdes et plusieurs glucosides ; il en est de même des réaetions Il, [IV et V. É

Dans ces derniers temps on a préconisé d’autres réactions ayant pour but de démontrer la présenee de corps différents dans l'ensemble des matières protéiques. Cette démonstration peut se faire par différents procédés microchimiques ; nous allons en indiquer un ou deux.

VII. — Traiter les coupes par de l'allosane (mesoxalylurée) en solution aqueuse ou alcoolique; colorations différentes où domine le rouge pourpre, qui ne change pas par l’action de la lessive de soude (Krasser).

Cette réaction n'a pas lieu en présence des acides libres.

La réaction a lieu aussi avec la tyrosine, l’asparagine et l'acide aspartique.

Malheureusement cette coloration rouge se produit aussi par l’action de l’allosane sur les phosphates alcalins et sur les bicarbonates; de plus, l'allosane exposé à l'air se colore en rouge et cette coloration rouge tourne au violet par l’action de la soude (Klebs).

VII. — Traiter les coupes par un aldéhyde. Plusieurs aldéhydes (l’aldéhyde ciniramique, la vanilline etc.) colorent différemment les matières protéiques différentes. On laisse les coupes pendant 24 heures dans une solution alcoolique de 1/2 à 1 o/o de l’aldéhyde, et on porte sur la lamelle dans un mélange à volumes égaux d’eau et d'acide sulfurique, additionné de quelques gouttes de sulfate ferrique.

Les colorations varient du rouge au violet et au bleu, avec les aldéhydes salicylique, anisique et la vanilline ; les colorations sont jaunes ou jaune-orangé avec l’aldéhyde ciniramique. (Reichl et Mikosch.) à

IX. — Porter les coupes dans le mélange suivant: Ferrocyanure de potassium à 10 0/0. . . 1 partie EAU 4 MO Ne AN A NS ARE 1 partie Acide arétique P 1,063. LACS SR ARlNID ALES

Les laisser pendant une heure, puis 0 à l'alcool à 600 jusqu'à ce que l'alcool ne soit plus acide. Ajouter alors une goutte de solution de chlorure ferrique; on obtient une belle coloration bleu de Prusse. (Zacharias.)

Enfin nous devons ajouter que, quelquefois, ces protéides se présentent avec une forme Caractéristique (leucites).

Parmi ces corps, nous signalerons particulièrement l’aleurone, presque toujours localisé dans des cellules spéciales (grains de blé) ou associé aux cellules oléagineuses des albumens. riches en corps gras. Ces corps répondent aux réactions générales que nous venons de résumer.

Les matières protéiques peuvent être contenues dans toutes les cellules. Elles se localisent souvent dans certaines assises ; accumulées ainsi, elles troublent encore plus la plupart des réactions qui

servent à révéler la présence des autres matières azotées (ferments, alcaloïdes, etc.). 6

- BIBLIOGRAPHIE

Klebs. — Einige Bemerkungen zu der Arbeit von Krasser « Untersuchungen über das Vorkommen von Eiweiss in der pflanzlichen Zellhaut, etc. (Bot. Zeitung, 1887). À Krasser (Fr.). — Untersuchungen über das Vorkommen von Eiweiss in der pflanzlichen Zellhant, nebst Bemerkungen über den mikrochemischen Nachweis der Eiweisskôrper. (Siézungs. d. K. Akad. à. Wiss. zu Wien, 1886. t. 94, p. 148).

Reichl {(C\et Mikosch (C.). — Ueber Eiweissreaktionen und deren mikrochemische Anwendung.{(Jahrb. d. K. K., Oberr. ir d.II Bewirke von Wien, 1890).

Zacharias (E). — Ueber Eiweiss, Nuklein und Plastin (Bof. Zeil., 1883).

$ 2. — Ferments

Généralités. — Tout porte à croire que les ferments sont de la

nature des protéides ; aussi les traitons-nous directement après eux. On connaît plusieurs ferments végétaux : la diastase, la tréhalase, l’amygdaline, l’émulsine, la papaïne, ete. Tous jouent le même rôle: émis par le végétal, ils réagissent sur certains autres produits contenus dans la cellule vivante et les transforment : la diastase attaque - l’amidon et le rend assimilable sous forme de glucose ; la tréhalase réagit sur le tréhalose, sucre contenu dans les champignons et le transforme aussi en glucose.

Nous avons déjà dit que les glucosides sont transformés par les ferments et fournissent alors du glucose,

La localisation de certains ferments peut être faite par des manipulations très simples ; nous allons les énumérer.

Emulsine

L'émulsine est un ferment capable de dédoubler un certain nombre de glucosides et principalement l’amygdaline, en donnant du glucose, de l’acide cyanhydrique et de l'essence d'amandes amères.

C20H27Az01 EL 92H20 — 2C6H/206 + CAzH + C'H6O

Sa localisation a été étudiée par M. Guignard dans les amandes et dans la feuille de laurier-cerise.

Les réactions préconisées par l’auteur sont les suivantes :

I. — Le réactif de Millon donne d’abord une teinte noirâtre à toute la coupe. Cette teinte est due surtout à l’action du contenu protoplasmique sur le sel mercuriel ; on remarque que Ja teinte est déjà beaucoup plus foncée dans les cellules à émulsine. Chauffée doucement, la teinte noirâtre disparaît partout pour faire place dans les cellules à émulsine à une. coloration orangé-rouge. Les autres cellules prennent une coloration faiblement rose,

II. — Le sulfate de cuivre et la potasse (réaction de Piotrowski): coloration rose-

violet, -

IT. — 2cc. d'acide chlorhydrique et une goutte d’une solution aqueuse d'orcine au dixième ; chauffée à plusieurs reprises jusqu à l'ébullition, avec des traces d'émulsine, donne une belle coloration violette (1). s

L'émulsine est contenue : dans les cellules endodermiques des faisceaux foliaires du Cerasus Lauro-Cerasus et dans les cellules à membranes non épaissies du péricycle de ces faisceaux. Dans les amandes, les cellules contenant l’'émulsine sont les cellules péricycliques des faisceaux cotylédonaires, de la tigelle et de la gemmule. On en trouve aussi dans l’endoderme des cotylédons. Dans la tigelle et la radicule, l’endoderme n’a pas d’'émulsine, mais les cellules du tissu procambial du faisceau paraissent en renfermer.

Myrosine

La localisation de ce ferment a été étudiée par M. Guignard. Elle est susceptible d'agir surun grand nombre de glucosides ; c’est dans la famille des Grucifères qu'elle a été trouvée pour la première fois, et sans sortir de cette famille on peut se rendre compte de la variété des glucosides sur lesquels elle exerce son action.

Elle agit sur le myronate de potassium, dans la moutarde noire et certaines autres Crucifères :

Ci0H18AZKS?010 = CSH205 E CSHs — CAzS —H SO‘HK myronate de potassium glucose isosulfocyanate sulf. ac. d'allyle de potassium

(1) Cette réaction n’a pas donné de bons résultats à M. Guignard au point de vue microchimique. Quand le tanin est abondant dans les cellules à émulsine, il masque la coloration. ae

Sur la sinalbine, dans la moutarde blanche :

C'OH#A7S201 = C'HP0$ HE CTHTO — CAZS Æ CISH2AZO? — SOH (4)

sinalbine glucose isosulfocyanate sulfate acide de sinapine d'orthoxybenzile

Dans le Cochlearia officinalis L., l'essence provenant du glucoside inconnu est l'isosulfocyanate de l'alcool butylique secondaire ; de même le Vasturtium officinale L. (cresson de fontaine) contient un glucoside inconnu qui, sous l’action de la myrosine, produit une essence appelée nitrile phénylpropionique (C°H1°Az) et dans le Lepidium sativum L. (cresson alénois), le même ferment produit le nitrile de de l'acide alphatolnique (C*H7Az) par dédoublement d'un glucoside inconnu.

La composition des essences des Crucifères varie donc avec la nature des glucosides. M. Guignard a montré que la myrosine pouvait non seulement dédoubler tous ceux des Crucifères, mais encore agir sur les glucosides inconnus des Capparidacées, Limnanthacées, Tropéolacées, Résédacées et Papayacées.

M. Guignard conseille surtout les réactions suivantes (2):

I.— Porter la coupe dans une goutte du réactif de Millon, chauffer très légèrement; les cellules à myrosine prennent une coloration rouge intense, tandis que le reste du parenchyme ne prend, même sous l'influence d’une température assez élevée, qu'une teinte rose-päle, due aux matières albuminoïdes contenues normalement dans le protoplasme de toute cellule.

II. — Chauffer légèrement les coupes en présence d'acide chlorhydrique. Les cellules à myrosine se colorent d’abord en rose, puis en violet. La coloration est la même si l'on ajoute de l’orcine à l’acide chlorhydrique.

III. — Porter les coupes dans de la liqueur de Fehling ; les cellules à myrosine prennent une teinte violette. Cette réaction est due au sel de cuivre et à l'excès d'alcali de la liqueur. Chez les Crucifères, la liqueur de Fehling est réduite par le contenu ordinaire des- cellules parecchymateuses autres que les cellules à myrosine.

IV.— On peut enfin colorer les cellules à myrosine par plusieurs couleurs d'aniline (vert de méthyle, bleu de quinoléine, brun Bismarck, etc.).

Au moyen de toutes ces réactions, de la première surtout, M. Gui-

(4) M. Guignard fait remarquer que ces deux équations ne sont probablement pas définitives, car l’eau n’y entre pas, comme cela arrive pour tous les autres dédoublements des glucosides, amygdaline, coniférine, salicine, arbutine, etc.

(2) Si l'on se sert de matériaux d'études conservés dans l'alcool, il faut avoir soin de laver les coupes pendant quelques instants dans l’eau additionnée &’acide azotique en proportion suffisante pour que le réactif ne précipite pas.