ÉLÉMENTS FIGURÉS

Chez l'homme on les étudie surtout soit sur des préparations de sang frais, soit sur des préparations de sang sec.

L'evamen du sang frais permet de faire la numération des globules, d'étudier le réseau fibrineut, d'apprécier la richesse en plaquettes sanguines, de rechercher la présence de microbes mobiles, tels que le vibrion seplique, les flagella de l'hématozoaire de Laveran, les Maires, etc. Pour pratiquer cet examen on se sert de la cellule à rigole de Hayem. Cette cellule est constituée par un petit disque isolé au rentre d'une épaisse lame de verre par une rigole circulaire. Après lavage et séchage, on étend autour de la rigole une mince couche de vaseline. La goutte de sang est déposée sur le disque central et la cellule est fermée par une lamelle sur les bords de laquelle on appuie légèrement. Le sang, à l'abri de la dessiccation, se trouve réparti en une mince nappe d'épaisseur uniforme, qu'on examine avec un objectif à sec assez fort.

Numération des éléments figurés. — Cotte numération

consiste à compter au microscope les éléments contenus dans un volume connu de sang. Elle comprend deux opérations successives : la dilution du sang, qui est un temps préparatoire indispensable, et la numération proprement dite.

Hématies. — On fait la dilution avec un liquide sensiblement isotonique au sang et n'altérant pas les hématies; tels sont le liquide amniotique, le liquide À, de Hayem (f), le liquide de Marcano(*). Avec une pipette capillaire graduée (pipette de Hayem portant les graduations 2 mme; 2,5 ninir; 4 mme et 5 mme) on recueille une quantité connue de sang. Avec une seconde pipette contenant f>()0 mme, on recueille le liquide destiné à la dilution. On fait écouler ces deux liquides dans une petite éprouvette en aspirant plusieurs fois le mélange dans la pipette pour entraîner le sang qui en humecte les parois, puis on assure l'homogénéité du mélange en agitant avec une baguette. On peut également se servir du mélangeur de Potain constitué par un tube capillaire gradué et surmonté d'une ampoule. Le volume de l'ampoule représente 100 fois, 200 fois, 400 fois celui du tube capillaire jusqu'aux marques de la graduation. On aspire le sang jusqu'à l'un de ces traits marqués, puis le liquide, de façon à remplir l'ampoule qui renfermera pour 1 volume de sang, 100, 200, ou 400 volumes de liquide. Une petite perle de verre contenue dans l'ampoule permet de réaliser l'homogénéité du liquide par agitation de l'appareil.

Pour faire la numération on se sert d'un hé multimètre. Cet appareil se compose d'une lame de verre plane creusée d'une cavité cylindrique d'I/â- de millimètre de profondeur et à fond également plan. On dépose une goutte du mélange sur le fond de la cavité et on recouvre d'une lamelle qui repose sur la lame. La goutte forme une couche de liquide à faces parallèles de !/;>• de millimètre d'épaisseur. Sur le fond de la cavité sont gravés des carrés de 1/.V de millimètre de côté, qui peuvent être regardé» comme la base de cubes liquides ayant I/ode millimètre de côté. On compte au microscope les hématies comprises dans l'un ou plusieurs de ces carrés et on en déduit par une multiplication le nombre des hématies contenues dans un millimètre cube.

(') La formule du liquide A. de Hayem est la suivante :

Eau distillée 200 ce.

Na Cl pur 1 gr.

Sulfate de soude pur 5 gr.

Bichlorure de mercure 0 gr. 50

(*) Liquide de Marcano :

Solution de sulfate de soude pesant 1020 100 ce.

Formol à 40 pour 100 * 1 ce.

Leucocytes. — La numération des leucocytes se fait connue celle des hématies ; mais les leucocytes étant beaucoup moins nombreux, on ne dilue le sang qu'au 10e ou au 20* et on fait la numération sur un plus grand nombre de carrés. Parfois même le liquide de dilution est légèrement additionné d'acide acétique à 1 pour 100 qui détruit les hématies et rend les leucocytes plus apparents.

La numération des hématoblasles repose sur le même principe, mais il est utile «le les fixer pour en empêcher la destruction.

Examen du sang sec. — On utilise l'examen du sang sec pour étudier la forme et les dimensions des hématies, le nombre des hématoblasles, les pigments contenus dans le sang. Après coloration, il permet de reconnaître les altérations des globules rouges et surtout d'établir les formules leucocytaires normales et pathologiques.

Pour faire cet examen du sang sec, on étale sur une lame rodée une goutte de nang recueillie par piqûre, à l'aide du bord d'une autre lame rodée ou d'une large lamelle, puis on dessèche rapidement le sang ainsi étalé, par agitation à l'air. — Avant de faire agir sur le sang des substances colorantes il est indispensable de le fixer. — La fixation est obtenue soit à l'aide de la chaleur sèche à 110 degrés sur platine chauffante ou dans une étuve (Procédé d'Ehrlich), soit par un contact de la préparation pendant quelques instants avec un mélange à parties égales d'alcool •absolu et d'éther (Nikiforoff), ou avec de l'alcool absolu (Bensaude), ou avec une solution à 1 pour 100 d'acide c h ro inique (Malassez), ou avec du chloroforme pur (Josué), ou avec les vapeurs d'un mélange de sublimé et d'iode (Dominici et Lenoble), etc. (').

Pour colorer la préparation on met successivement à son contact une solution «l'éosine ou d eosine orange, puis la solution d'hématéine alunéc de Maycr ou une solution de bleu de méthylène ou encore une solution de thionine phéniquée ou de Meu de toluidine (Dominici). On peut employer des colorants plus complexes, tels que le triacide d'Ehrlich, le bleu polychrome de Unna, l'éosinate de bleu de méthylène de May et Grundwald. — Les couleurs d'aniline étant convcnlionnellemenl assimilées à des sels (Ehrlich), on donne le nom d'acides à celles dans lesquelles la substance colorante tient la place d'un acide dans la combinaison chimique; les autres sont regardées comme basiques. Certains éléments du sang sont dits faisophiles, parce qu'ils prennent avec élection les couleurs dites basiques (bleu de méthylène, vert de méthyie, thionine, bleu de L'nna, l'azur (Giemsa), bleu de toluidine, etc.). Tels sont surtout les noyaux cellulaires.

D'autres éléments se colorant par l'éosine, l'orange, la fuchsine acide, elc. sont dits aridophiles. Tels sont le protoplasma des hématies et certaines granulations protoplasmiques des leucocytes.

Certains éléments enfin prennent indifféremment les colorants basiques ou acides et revêtent une couleur intermédiaire quand on emploie un mélange de couleurs basiques et acides; ils sont dits amphophiles ou neutrophilcs. — Tels sont les protoplasma de nombreux corps cellulaires et les granulations de certains leucocytes.

Dans certains cas on colore les éléments du sang à l'état frais, à l'aide d'un mélange d'éosine et de bleu de méthylène ou de rouge magenta et de vert de méthyie, ou encore du triacide de Pappenheim. Ce mode d'examen permet de voir les mouvements amiboïdes des leucocytes, et les granulations basophiles qui apparaissent au cours de certaines affections dans le protoplasma des hématies [Colorations vitales.)

(') Voir pour les détails Je cette technique F. Dezançon et M. Labbé, Traité (fHémaloUHjir, et L. Bard, Précis des Examens de laboratoire.