PRODUITS FIXES DE LA PUTRÉFACTION

Les liquides putrides, débarrassés de leurs acides et de leurs alcalis volatils par l’une quelconque des méthodes indiquées au chapitre précédent, peuvent généralement être amenés, par une simple évaporation à consistance sirupeuse, à déposer sous forme cristalline toutes les substances peu solubles qu’ils renferment, et parmi lesquelles, la tyrosine d’abord, laleucine ensuite, se déposent d’ordinaire les premières. Quand on veut étudier de plus près ce qui reste en solution dans le magma sirupeux qui a laissé déposer ces cristaux, on peut employer les méthodes mises en œuvre par M. Schutzemberger pour étudier les produits d’autophagie de la levure. Nous les avons indiquées au chapitre XXXV. Mais elles ne s’étendent pas à la totalité des substances si variées qu’on peut rencontrer dans les liquides putrides, et dont beaucoup ne peuvent être retrouvées qu’en les cherchant individuellement dans une portion du liquide qui les contient.

Aussi, dans les quelques renseignements que nous allons donner sur chacune d’elles, ferons-nous entrer, quand cela sera nécessaire, les moyens de la déceler et les réactions les plus caractéristiques qu’elle fournit.

L’incertitude où l’on est sur la composition de beaucoup d’entre elles, fait qu’on ne peut guère mettre d’ordre logique dans leur étude. Nous adopterons une classification artiOcielle, mais qui ne sera pas sans valeur pratique, en les rangeant par ordre d’importance, c'est-à-dire en commençant par celles qui sont les plus répandues, ce qui revient à dire les mieux connues.

lieiicinc. — A ce point de vue, la leiicine mérite d’être placée au premier rang. H suffit d’évaporer à consistance sirupeuse un liquide putride pour la voir se déposer à la surface, par refroidissement, sous forme de croûte quelquefois assez épaisse, et sur les parois du vase à l’état de rognons plus ou moins mamelonnés. Au microscope, elle apparaît sous forme de plaques rondes, formées de cristaux très fins, irradiant autour d’un centre. Fréquemment des différences d’éclat ou de cohérence partagent la plaque ronde en une série de cercles concentriques. D’autres fois, l’aspect est très homogène, et on croirait avoir sous les yeux des globules de matière grasse. Souvent aussi, ces plaques

rondes se soudent les unes aux autres en forme de choux-fleurs, etdonnentdes masses à contours plus ou moins irréguliers. Enfin, on rencontre aussi la leucine sous la forme de deux masses en éventail à branches courbes réunies par un pédicelle commun.

Ces cristaux sont facilement solubles dans l’eau, les acides et les alcalis. L’alcool et l’éther les dissolvent, au contraire, difficilement. Pour les étudier, on les sépare du liquide qui les imprègne en les comprimant dans du papier Joseph, on les dissout dans une goutte d’acide azotique sur un verre démontré, en les remuant avec un fil de platine, et on évapore lentement. Le résidu incolore qu'on obtient fournit, lorsqu’on le chauffe avec quelques gouttes de lessive de soude, une coloration qui varie du jaune au brun, et fond, quand on continue à chauffer, sous forme d’une goutte huileuse. C’est la réaction de Schérer. On peut aussi chauffer les cristaux au fond d’un tube à essai un peu étroit; on les voit fondre, abandonner au fond du tube une matière huileuse, et laisser échapper en flocons blancs la leucine, qui vase condenser sur les parois froides du tube sous forme d’une masse cristallisée. En même temps il se dégage une odeur d’amylamine.

La leucine se colore aussi en rouge intense en présence du perchlorure de fer. Mélangée d’une goutte de phénol, elle fournit une solution qui prend une teinte bleue intense après l’addition d’un peu d’hypochlorite de soude. Mais cette réaction est moins caractéristique. Elle lui est commune avec le glycocolle.

Bouillie avec un excès d’hydrate de cuivre, elle dissout une partie de l’oxyde, et il se dépose par refroidissement de petites écailles brillantes, d’un bleu violet clair. Ce composé renferme 3(C‘*H'’AzO‘),4CuO.

Avec de l’acétate de cuivre, la leucine donne un composé cristallin, signalé pour la première fois par Kohler, et qui a la composition 7(C'*H*’AzO‘),8CuO. Nous verrons bientôt que là aussi il y des ressemblances avec le glycocolle.

La leucine et le glycocolle sont en effet des corps de la même famille. La leucine, avec sa formule C‘*II‘*AzO* ou C‘®H“(AzH‘)OS est l’acide amidocaproïque, le glycocolle C'H'AzO* ou C*H’(AzH*;0* est l’acide amidoacétique.

Celte constitution de la leucine permet l’existence de diverses leucines isomériques. Nencki paraît avoir rencontré, dans le liquide de putréfaction d’un pancréas, traité comme nous l’avons dit plus haut, une leucine douée d’une faible saveur douce et exigeant pour se dissoudre 43 parties d’eau, tandis que la leucine type, celle que Zollikofer a obtenue par l’action de l’acide sulfurique sur le tissu élastique, est sans saveur et se dissout dans 27 parties d’eau. Celle que M. Cahours, et plus lard Ilufner ont préparée synthétiquement par l’ammoniaque et l’acide bromocaproïque semble être la même que celle de Zollikofer. Celle qu’on obtient en traitant l’aldéhyde valérianique par l’acide cyanhydrique et par l’acide chlorhydrique n’est qu’isomère avec celle de Zollikofer.

Il est d’ailleurs possible que ce qu’on recueille comme leucine, en abandonnant à la cristallisation des liqueurs suffisamment concentrées, ne soit pas toujours de la leucine pure, mais contienne un mélange de leucine ou d’acide amidocaproïque avec un acide amidé plus pauvre en carbone, peut-être l’acide amidovalérianique.

La leucine peut fermenter et donner du valérianate d’ammoniaque, de

l’hydrogène et de l'eau; mais cette transformation a été mal étudiée et on ne sait sous quelles influences elle s’accomplit.

ClycoeoUe — A côté de laleucine, nous placerons, à cause de la fréquence avec laquelle on le rencontre, le glycocolle ou sucre de gélatine, découvert par Braconnol. On peut le rechercher dans les eaux mères qui ont laissé déposer la leucine, en les traitant par l’alcool, qui quelquefois précipite le glycocolle en gros cristaux incolores, transparents, appartenant au système nionoclinique. Quand il ne se sépare rien, on fait bouillir le liquide avec du carbonate de cuivre, on le filtre et on l’additionne de son volume d’alcool. Par le refroidissement, on obtient des touffes d’aiguilles bleues, en triangles isocèles opposés par le sommet, et contenant, lorsqu’elles sont sèches, 27,66 p. tOO de cuivre.

On peut en séparer le glycocolle au moyen de l’hydrogène sulfuré.

Le glycocolle est soluble dans l’eau et dans l’alcool étendu. 11 est insoluble dans l’alcool absolu et dans l’éther. 11 réduit, d’après M. Engel, déjà à froid, mais surtout à chaud, l’azotate mercureux. 11 donne, soit avec le perchlorure de fer, soit avec une goutte de phénol et de l’hypochlorite de soude, les mêmes réactions que la leucine.

On rencontre fréquemment le glycocolle dans les liquides putrides. M. Jeanneret en a trouvé dans toutes les putréfactions de gélatine qu’il a étudiées, en compagnie de l'acide butyrique et du carbonate d'ammoniaque. 11 n’est pas inutile d’indiquer ce qu’il y a de ces divers éléments dans les liquides analysés. Voici les nombres qui résument trois expériences faites à peu près dans les mêmes conditions sur la gélatine, et accomplies tout à fait à l’abri de l’air.

Durée de la putréfaction . . .

. Il jours

16 jours

ta

19 jours

Poids de gélatine employée . .

Ammoniaque .

Acide carbonique .

Acide butyrique .

Glycocolle .

On voit que dans toutes ces putréfactions il s’est formé des quantités sensibles de glycocolle. La première a en outre donné un peu de leucine. Il y avait partout des acides autres que l'acide butyrique, en particulier de l’acide acétique et de l’acide valérianiquc, mais en proportions très faibles. Des putréfactions de gélatine, faites par M. Nencki au contact de l’air, ont donné à peu près les mêmes résultats.

Dans des putréfactions de fibrine, faites aussi en présence du tissu du pancréas, nous allons trouver d’autres acides amidés. Telle la tyrosine.

Tyrosine. — La tyrosine se dépose par cristallisation, souvent en mêmô temps que la leucine, quelquefois même avant, si elle est abondante, et on la voit à l’œil nu, si elle est en quantité a^scz grande, sous la forme de masses

blanches plus ou moins volumineuses, réparties dans la matière ou le tissu qui se putréfie, et y formant des sortes de géodes.

Quand elle est peu abondante, elle se précipite surtout quand on concentre les eaus mères qui ont fourni la première cristallisation de leucine. On la voit au microscope sous forme d’aiguilles noires et fines fortement serrées les unes contre les autres, irradiant autour d’un point dans deux sens différents, et affectant des formes de sablier. Ces cristaux sont très peu solubles dans l’eau froide assez solubles dans l’eau bouillante, insolubles dans l’alcool et dans l’éther. On les purifie en les dissolvant avec l’aide de l’ammoniaque dans une petite quantité d’eau bouillante, et les précipitant ensuite par l’acide acétique.

. M. lluber a montré que la tyrosine pouvait aussi se présenter sous forme de cristaux rhomboédriques, qu’il a pu dès lors assimiler à des produits morphologiques spéciaux décrits par MM. Vulpian et Charcot sous le nom de cristaux albuminoïdes. Ces cristaux sont une forme dimorphique de la tyrosine, et peuvent repasser à l’état d’aiguilles sous certaines influences.

Dans les deux cas, cette tyrosine présente une réaction spéciale, indiquée par Hoffmann. Quand on la fait bouillir avec du nitrate mercurique renfermant une trace d’acide nitreux, elle donne une belle coloration rouge et bientôt après un précipité brun rouge.

Piria a indiqué une autre réaction. Quand on chauffe doucement la tyrosine avec quelques gouttes d'acide sulfurique concentré, elle se dissout, et le liquide prend une coloration rouge intense passagère. On ajoute alors de l’eau et du carbonate de baryte jusqu’à neutralisation, on soumet ensuite la liqueur à l’ébullition pour précipiter le bicarbonate de baryte qui a pu se former, on filtre, et si on ajoute goutte à goutte une solution de perchlorure de fer, on obtient une belle coloration violette.

Chauffée avec de la chaux sodée, la tyrosine développe l’odeur de l’acide phénique. Chauffée dans un tube de verre, elle fond et se décompose avec une odeur désagréable.

La tyrosine accompagne presque toujours la leucine. Elle n’appartient pourtant pas à la même série de composés. Elle renferme un résidu benzinique, et est probablement un des trois acides oxybenzoïques prévus par la théorie. Sa formule est

C‘»fl“AzO».

Elle se rencontre surtout dans les putréfactions de caséine et dans le fromage, où elle a été découverte et d’où elle tire son nom. On la rencontre pourtant aussi ailleurs. Nous allons la trouver dans les putréfactions de fibrine unie à la butalanine.

Butalantncé — La butalanine se dépose d’ordinaire après la tyrosine sous forme d’une poudre blanche faite de petites écailles, qui apparaissent au microscope comme des tablettes très minces et très délicates, à six pans inégalement développés, et agglomérées les unes contre les autres. Quelquefois elle a la forme d’aiguilles étoilées. Cette substance ressemble à la leucine; elle est assez facilement soluble dans l’eau, plus facilement dans l’eau acidulée. Elle est

DUCLAÜX.

presque insoluble dans l’alcool froid et dans l’éther. Elle se dissout beaucoup moins facilement que la leucine dans l’alcool bouillant; chauffée doucement, elle SC sublime sans décomposition.

Ces analogies de propriétés avec la leucine ont des causes profondes ; c’est que la butalanine est l’acide amidovalcrianiqne. Elle a par conséquent pour formule chimique

C'«lI“Azo* ou CTIO (AzII»)0‘.

Ces trois substances: leucine, tyrosine et butalanine, sont presque toujours associées ensemble dans les fermentations de caséine ou de fibrine. Bien que leur séparation et leur dosage soient difficiles, M. Nencki et M. Jeannerct en ont mesuré approximativement les proportions dans des putréfactions accomplies sur de l’albumine au contact et à l’abri de l’air. Voici les résumés de leurs travaux.

L’expérience n” I a été faite par M. Nencki au contact de l’air, les expériences II et III par M. Jeanneret à l’abri de l’air, dans des liquides bouillis d’avance. Il y avait donc eu dans un cas intervention concomitante des aérobies et des anaérobies; dans le second, intervention des anaérobies seuls. On a ramené tous les résultats à tOO parties d’albumine employée, supposée à l’état sec et privée de cendres.

On voit que dans tous les cas on trouve, à l’état de produits gazeux ou crislallisables, une forte proportion de la matière organique initiale. Mais il en reste toujours dans le liquide une proportion assez notable non décomposée. Nous reviendrons bientôt sur ce fait.

Remarquons aussi que pour une plus courte durée de la putréfaction, l’expérience n» 1, faite au contact de l’air, a donné plus d’ammoniaque et moins de leucine et de tyrosine que les putréfactions à l’abri de l’air. Il peut y avoir eu là une influence de la nature des germes entrés en action, mais le résultat est d’accord avec ce que nous ont appris d’une façon sûre nos expériences sur la caséine, à savoir qu’au contact de l’air, la transformation est plus profonde et donne, toutes choses égales d’ailleurs, des produits plus alcalins.

Tous les corps que nous avons étudiés jusqu’ici sont des acides amidés. Les acides a cet état sont, dans la série grasse, les acides acétique donnant le glycocollc, valérianique donnant la butalanine, et caproi’que donnant la leucine.

Les acides propionique et butyrique manquent à la série; mais les termes correspondants amidés apparaîtront peut-être, quand on étudiera des putréfactions produites par des espèces pures. Nul doute en effet qu’ils ne puissent être détruits dans le conflit des mélanges d’espèces sur lesquels on a opéré jus-

KNCYCLOPÉDIE CHIMIQUE.

qu’ici. C'est ainsi que l’urée, quelquefois très abondante, n’a pu être découverte qu’en isolant les espèces actives, à raison de la facilité avec laquelle elle se transforme en carbonate d’ammoniaque.

Produits nlcalins de la putréfaction. — Nous allons maintenant rencontrer des produits plus ou moins alcalins et qui rappelleront la structure, soit des ammoniaques composées, soi|t des alcaloïdes organiques. Leur existence dans les produits de la putréfaction est connue depuis longtemps, mais ils ont frappé beaucoup l’attention dans ces dernières années à cause du nom nouveau qu’on leur a donné, et des chances d’erreur que leur existence et leur formation en apparence spontanée dans le cadavre, peuvent apporter dans la recherche des alcaloïdes toxiques dans les expertises de médecine légale.

Les premières recherches de matières toxiques dans les produits de la putréfaction cadavérique ou artificielle ont été entravées par une cause d’erreur contre laquelle nous devons tout de suite nous mettre en garde. Après avoir isolé ces matières par des traitements divers, on les essayait en les inoculant, en volume plus ou moins grand, à des lapins ou à des chiens. Or, fréquemment te traitement adopté pour les isoler avait conduit à y laisser, tout à fait à l’insu de l’observateur, des germes des êtres divers présents dans le cadavre au moment de la mort, ou ayant pris part au phénomène de putréfaction artificielle. Nous savons que parmi ces germes, il y a toujours ou presque toujours des germes de vibrions septiques, qui sont peut-être en nombre aussi grand que les diverses manifestations morbides qu’on rassemble sous ce nom unique de septicémie.

Quoi qu’il en soit, ces germes qui résistent à l’ébuilition et a l’action de l’alcool, qui se déposent avec les précipités solides que les réactifs forment dans les liqueurs, qui se remettent en suspension dans l’eau quand on redissout ces précipités, qui passent à travers tous les filtres de papier, qui sont souvent en si petite quantité, que la transparence de l’eau n’en est pas troublée, pénétraient dans le corps de l’animal inoculé en même temps que le liquide dont on voulait essayer l’action, et y produisaient la maladie virulente qui est leur œuvre. On voulait étudier un effet d’empoisonnement, on avait un effet d’inoculation, et on a souvent confondu, à l’origine, ces deux effets l’un avec l’autre, et souvent attribué à un liquide inoffensif des propriétés toxiques, parce qu’on voyait l’animal périr après l’injection, avec des accidents variés, parmi lesquels les symptômes de septicémie étaient pourtant d’ordinaire prédominants.

11 est théoriquement très facile de distinguer les deux ordres d’effets. L’inoculation d’un microbe dans l’organisme ne produit un résultat sensible qu’après un certain temps, une période d’incubation qui correspond à la lutte sourde entre les cellules de l’être inoculé et celles du parasite. L’effet d’un liquide toxique est au contraire immédiat, ou, du moins, n’exige pour se manifester que le temps nécessaire au transport du poison par la circulation et à fintoxication des éléments anatomiques auxquels il peut s’adresser. Ce temps est variable avec le mode et le siège de l’injection, la quantité de poison introduite, la facilité avec laquelle il est éliminé de l’organisme; mais l’effet maximum est géné-

DUCLAUX. — CHIMIE BIOLOGIQUE. 769

râlement atteint au bout de quelques heures, après lesquelles les symptômes, lorsqu’il n’y a pas eu mort, s’évanouissent peu à peu.

Dans la pratique cette différence que nous signalons est quelquefois peu marquée, et il en résulte une cause d’erreur, qui a été souvent présente et qu’on ne peut sûrement éliminer qu’en filtrant le liquide à inoculer sur de la terre de pipe, qui ne laisse passer aucun élément figuré. Nous ne compterons dans l’énumération que nous allons faire, comme dues à des matières produites par la putréfaction, que les expériences dont le résultat sera manifestement dû, d’après les caractères signalés plus haut, aux effets d’un poison en solution dans le liquide injecté.

§ei>siHe. — Le premier corps jouissant de propriétés toxiques a été découvert par Bergmann en 1866, et étudié depuis par Bergmann et iSchmiedeberg. On le rencontre surtout dans la levure putréfiée. On le prépare parle procédé suivant : On soumet à la diffusion sur du papier parchemin la bière putride, on acidulé par l’acide chlorhydrique le produit diffusé, et on y ajoute une solution de sublimé corrosif qui produit d’abord un trouble faible, et après quelque temps, un précipité floconneux. On filtre, on traite le résidu par du carbonate de soude, de façon a le rendre fortement alcalin, et on précipite à nouveau par le sublimé, on filtre à nouveau, on lave le dépôt sur filtre, on le met en suspension dans l’eau, et on le décompose par l’hydrogène sulfuré. On filtre à nouveau, on ajoute du carbonate d’argent pour éliminer l’acide chlorhydrique resté dans la liqueur, on rajoute quelques gouttes de dissolution d’acide sulfhydrique pour éliminer, si^’est nécessaire, l’argent qui a pu se dissoudre, et on évapore à sec la dissolution maintenant alcaline. On traite le résidu par l’alcool qui ne redissout pas tout, et, en ajoutant à l’alcool de l’acide sulfurique, on obtient un précipité cristallin incolore ou faiblement coloré en jaune. On purifie ces cristaux en les redissolvant dans l’eau, et en les reprécipitant par l’alcool.

Ils ont des propriétés toxiques énergiques. Inoculés à deux chiens sous le poids de 1 centigramme, ils ont déterminé des vomissements immédiats, et après quelque temps une diarrhée qui chez un des chiens est devenue sanguinolente. A l’autopsie on a trouvé des ecchymoses dans le tube digestif. Des grenouilles ont été aussi empoisonnées parle même corps.

Ce poison a été très discuté sous le nom de sepsine. On a dès l’origine rapproché ses effets de ceux que Gaspard, Barthélémy, et Stich avaient observés en inoculant à des animaux des matières putrides. Mais comme ces effets étaient très mêlés, dus qu’ils étaient tantôt à des actions toxiques, tantôt à des inoculations virulentes, l’incertitude où on était à leur sujet s’est étendue aux résultats de Bergmann et Schmiedeberg; et comme, d’un autre côté, ces deux savants ne réussissaient pas toujours aretirer de la sepsine des matières putrides, mêmj en opérant toujours sur de la bière putréfiée, on a fini par douter de leurs premiers résultats. Il ne semble pourtant pas douteux qu’ils n’aient rencontré, au moins une fois, un alcaloïde toxique, soluble dans l’alcool, précipitable par le sublimé corrosif, c’est-à-dire possédant quelques-uns des caractères de ceux qu’on a retrouvés depuis dans les mêmes conditions.

Alcaloïde septique «le Zulzer et Souueu«cheiu> — MM. Zulzer et

ENCYCLOF.

Sonnenschein ont rencontré à leur tour en 1869, dans des infusions de viande vieilles de cinq à huit semaines , un alcaloïde dont les réactions d’ordre chimique leur ont rappelé l’atropine et l’hyosciamine, et dont les propriélés physiologiques ressemblaient aussi à celles de ces alcaloïdes végétaux. L’injection de cette substance a produit, enire autres symptômes, la dilatation de la pupille, la paralysie des muscles de l’intestin, et l’augmentation de l’activité du cœur, à peu près comme l’atropine. Le fait fondamental de la formation, pendant la putréfaction des matières albuminoïdes, d’un alcaloïde toxique que ses propriétés chimiques et physiologiques pourraient faire confondre avec les alcaloïdes végétaux toxiques a donc été annoncé pour la première fois d’une façon nette par Zulzer et Sonnenschein. Malheureusement, pas plus que MM. Bergmann et Schmiedeberg, ces deux savants ne réussissaient à retrouver dans tous les cas leur alcaloïde, et ils ont dû considérer sa présence ou au moins ses propriétés toxiques comme essentiellement inconstantes.

C’est peut-être pour cette raison que les résultats ci-dessus paraissent avoir été oubliés, lorsqu'on 1872, Selmi, à Bologne, insista sur la présence fréquente, dans les extraits de cadavres de personnes mortes naturellement, de substances possédant les caractères généraux des alcaloïdes, et qui ont été désignées du nom très impropre de Ptomaïnes {Ptoma: cadavre). Ce nom n’indique en effet aucune parenté générique entre les corps qui le portent, et de plus, la seule mention qu’il contienne, celle de leur origine cadavérique, est inexacte en ceci, qu’on rencontre ces mêmes corps dans tous les liquides putréfiés, et même, comme l’a montré M. Gautier, dans les tissus vivants les plus sains.

Rechei'cbes de Selnii. — C’est en appliquant, dans une expertise, les procédés de Stas et Otto à la recherche des alcaloïdes dans un cadavre que Selmi rencontra, en solution dans l’éther, l’alcool amylique ou le chloroforme mis en contact avec les extraits alcooliques de la matière cadavérique, des alcaloïdes précipitant par le tannin, l’acide iodhydrique ioduré, le chlorure d’or. Tous ces corps donnaient un rouge plus ou moins violacé quand on les chauffait avec l’acide sulfurique, et une coloration violette, belle quoique légère, quand au résidu d’évaporation de deux ou trois gouttes de leur solution aqueuse, on ajoutait trois gouttes d’acide chlorhydrique et une goutte d’acide sulfurique en chauffant légèrement.

Quelques-uns réduisaient l'acide iodique. Avec d’autres on obtenait une coloration rose lorsqu’on ajoutait à quelques gouttes de leur solution aqueuse, évaporée à sec, une goutte d’acide iodique, puis deux gouttes-d’acide sulfurique, et enfin, après avoir agité, un peu de bicarbonate de soude en poudre pour saturer les acides, avec adjonction d’une gouttelette d’eau dans le cas où la réaction tarde à se produire.

Avec l’acide nitrique, ces ptomaïnes donnaient, en chauffant un peu, et après addition d’un peu de potasse, une coloration jaune d’or.

On reconnaît là quelques-unes des réactions colorées fournies par les alcaloïdes végétaux. Tous ces phénomènes n’avaient pas une grande constance* lel procédé d’extraction qui pouvait avoir fourni un produit ayant telles ou telles propriétés, pouvait à un moment donné rester sans résuliat, ou bien conduire

DÜCLAUX. — CHIMIK BIOLOGIQUE.

à un corps ayant des propriétés différentes. Mais ce qui restait constant, c’était la possibilité de retirer d’un cadavre quelconque des alcaloïdes quelquefois fixes ou même volatils, nombreux en apparence, ayant des propriétés toxiques, et que leurs réactions permettaient de confondre avec les alcaloïdes de la toxicologie. 4vec la plupart d’entre eux, les symptômes généraux de l’empoisonnement étaient la dilatation passagère de la pupille, le ralentissement et l’irrégularité des pulsations cardiaques, des mouvements convulsifs, laissant le cœur épuisé de sang et contracté après la mort.

Il serait évidemment très intéressant de pouvoir distinguer sûrement ces alcaloïdes de la putréfaction des alcaloïdes employés comme remèdes ou comme ' toxiques. En 1881 MM. Brouardel et Boutmy avaient cru trouver pour cela un réactif sûr dans le ferricyanure de potassium, que les ptomaïnes réduisent ; presque instantanément, tandis que tous les alcaloïdes végétaux, sauf la morphine et l’atropine, ne le réduisent qu’avec une lenteur plus ou moins grande. Mais comme l’ont montré M. Gautier et M. Spica, cette réaction est insuffisante et ne saurait devenir caractéristique.

Il y a plus. M. Gautier et d’autres savants ont fait voir que ces alcaloïdes se retrouvaient dans les produits de la vie physiologique des tissus. S’il en est ainsi, il est illusoire de chercher une réaction qui distingue les alcaloïdes cadavériques des alcaloïdes normaux, puisque théoriquement rien ne distingue les deux origines. Ce qu'il faut, c’est, au lieu d’opérer sur les mélanges complexes de ptomaïnes et de substances diverses qu’on a soumis jusqu’ici à l’action des réactifs, d’isoler autant que possible ces divers alcaloïdes, de les purifier et d’étudier leurs propriétés physiques, chimiques et physiologiques.

C’est la lâche que s’est donnée M. Gautier qui, après avoir mentionné, dès 1873, la formation, pendant la putréfaction, d’alcalis organiques complexes, sans signaler pourtant leur toxicité, est revenu depuis sur cette étude.

Les produits liquides de la fermentation du scombre, après qu’il en a eu retiré tout ce qui est volatil, sont alcalinisés par la baryte, filtrés et agités avec le chloroforme qui dissout les bases. Pour les extraire, on fractionne les produits delà distillation du chloroforme, et on les traite par une solution d’acide tartrique qui laisse une résine brune. Les dissolutions tartriques des alcaloïdes, sursaturées de potasse, dégagent une vive odeur de carbylamines, et mettent en liberté des bases huileuses qui surnagent; on les enlève par l’éther et on les sèche dans le vide.

Ce sont des liquides huileux incolores, bleuissant le tournesol, saturant les acides forts, donnant avec l’acide nitrique, chlorhydrique, le ferricyanure de potassium et les sels ferriques, les réactions que nous avons signalées plus haut, précipitant par le brome, l’iode, les phosphomolybdates. Elles se résinifient assez rapidement. Leurs chlorhydrates bien cristallisés en feuilles de fougère et en cristaux de neige sont neutres. Leurs chloroplatinates sont peu solubles et cristallins. L’odeur de ces alcaloïdes est faible mais tenace, et rappelle l’aubépine et l’hydrocollidine.

L’une de ces bases, provenant des premiers extraits chloroformiques, répou . assez bien a la formule d’une parvoline C‘*H**Az. Elle donne un chloroplalinalr qui devient rose à l’air.

L’alcaloïde provenant des derniers extraits chloroformiques est une baseinco. lore, huileuse, d’un goût amer et phénolique, très caustique, d’une odeur vireuse, rappelant à la fois le phénol et la fleur d’aubépine. 11 bout vers 210» sa densité est 1,0296.11 donne un chlorhydrate en fines aiguilles et amer. Sonchloroplatinate, jaune pâle, est cristallisé et peu soluble. 11 se redissout à chaud et se prend en aiguilles recourbées. Le chloroaurate est très instable. La base répond à la formule C‘®H'®Az. Cette formule la rend isomérique avec l’hydrocolline que MM. Cahours et Etard ont retirée de la nicotine, et le point d’ébullition, l’odeur, la viscosité et les propriétés générales rapprochent du reste tout a fait les deux bases.

Cette base est très toxique. Un pierrot qui en avait reçu moins de un milligramme et demi à l’état de chlorhydrate est mort en moins d’une heure avec stupeur, paralysie et contractions tétaniques. Le cœur a été trouvé en diastole, le sang liquide. L’action sur la pupille est nulle. Un friquet qui en avait reçu sept milligrammes, a été au bout de deux minutes pris de vomissements, de spasmes tétaniques, et est mort en quarante-cinq minutes. Ces effets sont comparables à ceux des venins.

Ce sont là tous les renseignements précis que nous ayons encore sur les alcaloïdes de la putréfaction. On voit qu’ils ne sont pas nombreux.

C’est que l’étude est difficile, et que la variété des conditions et des êtres qui président à l’accomplissement des putréfactions donne naissance à des mélanges d’alcaloïdes à la fois très complexes, et très variables de composition. Nous allons trouver une nouvelle preuve de ce fait, en étudiant un alcaloïde vénéneux qui semble avoir été rencontré surtout dans les cadavres de personnes ou d’animaux empoisonnés par l’acide arsénieux.

Alcaloïdes vénéneux formés en présence de l’arsenîc. —

En 1878, Selmi a fait connaître deux cas dans lesquels il a obtenu avec des cadavres exhumés, contenant de l’arsenic, des alcaloïdes cristallins et fortement vénéneux. Dans le premier cas, il a opéré sur un cadavre exhumé quatorze jours après l’inhumation ; le corps paraissait bien conservé, ainsi que c’est l’ordinaire en pareil cas, et on y a trouvé une assez grande quantité d’arsenic. Quand, pendant la recherche des alcaloïdes il a traité par l’éther le liquide rendu alcalin par la baryte, il a obtenu une petite quantité d’une substance, cristallisable en aiguilles, fournissant aussi des sels cristallisables, et précipitant par les réactifs principaux des alcaloïdes.

Dans un autre cas, avec un cadavre vieux d’un mois, le même procédé lui donna un alcaloïde cristallisé aussi, n’ayant pourtant pas toutes les mêmes réactions que le précédent, mais existant en plus grande quantité, et dont on put étudier les propriétés toxiques qui apparurent énergiques.

Selmi rechercha dans cet alcaloïde la présence de l’arsenic, puis celle du phosphore, mais sans résultats.

Plus tard, Selmi a rencontré dans l’estomac d’un porc, conservé dans une dissolution d’acide arsénieux, un alcaloïde volatil, d’une odeur particulière, rappelant celle de la triméthylamine, mais sans pouvoir être confondue avec elle, donnant un chlorhydrate cristallisé et non déliquescent, jouissant de pro‘

BUCLA.UX. — CHIMIE BIOLOGIQUE. 773

priétés toxiques asssez intenses analogues à celles de la strychnine, et renfermant de l’arsenic.

En outre de cette base volatile, il s’était formé aussi une base fixe donnant quelques-unes des réactions des alcaloïdes végétaux, renfermant de l’arsenic, et possédant aussi des propriétés toxiques qui la rapprochent des alcaloïdes de la putréfaction ordinaire. Elle produit la torpeur, la paralysie et l’inactivité systolique du cœur.

Ces recherches jettent de la lumière sur un des points les plus curieux et les plus obscurs de l’histoire de la toxicologie. On sait le degré d’habileté auquel étaient arrivés, en Italie surtout, les fabricants de poisons, Toffa, par exemple, qui a laissé Vaqua toffana. Ce liquide toxique, comme celui qui est encore employé sous le nom A'acquetta di Perugia, paraît avoir été toujours préparé en recueillant les liquides qui s’écoulent naturellement d’un pore éventré et saupoudré d’acide arsénieux, puis abandonné à lui-même pendant quelque temps. 11 se forme là certainement, soit des arsines particulières, soit des arsénites plus facilement absorbables, soit encore, d’après les recherches de Selmi, des alcaloïdes vénéneux arséniés, qui donnent au liquide des propriétés toxiques plus violentes que ne le serait une simple dissolution d’acide arsénieux.

IVai'cotiques giroduit» iieiiclant la piiti'érnetion. — A côté des alcaloïdes dont nous venons de résumer l’histoire, nous sommes conduits à placer des corps moins bien connus dans leurs caractères chimiques, mais qui sont produits par l’action des microbes, et que leurs propriétés rapprochent des alcaloïdes de l’opium.

Panum a obtenu, il y longtemps, un corps de cette nature, en évaporant l’extrait alcoolique d’une macération de viande. L’injection d’une petite quantité d’une dissolution aqueuse de cette substance dans la veine jugulaire d’un gros chien, a provoqué chez lui un sommeil ininterrompu de vingt-quatre heures, après quoi l’animal s’est réveillé et est redevenu aussi vif qu’auparavant.

IVarcotique du elioléra des iioulcs. — Dans ses études sur le choléra des poules, M. Pasteur a rencontré un fait à rapprocher du précédent. L’un des symptômes de cette maladie les plus frappants est la somnolence invincible dont l’animal est atteint. Si on l’oblige à ouvrir les yeux, il paraît sortir d’un profond sommeil, mais bientôt les paupières se referment, et l’animal meurt quelquefois comme endormi, sans changer de place, après une muette agonie.

Le microbe qui produit cette maladie est formé de petits articles immobiles, d’une ténuité extrême, légèrement étranglés en leur milieu, et qu’à première ''ue on prendrait, lorsqu’ils sont un peu nombreux, pour des points isolés, formant un pointillé très fin. Ils sont plus gros et plus turgescents quand ils Sont jeunes. Au bout de quelques jours, ils se changent en granulins de si petit petit volume que le liquide de culture, laiteux à l’origine, devient ensuite presque limpide. La fig. 108 donne une idée assez exacte des formes et des varia-, fions de grosseur. L’intérêt que présente cet être tient à ce qu’il appartient évidemment à un autre monde que celiii des vibrions ou des cellules de levure.

n se rapproche des granulations de faible diamètre, que toutes les observations microscopiques décèlent dans les humeurs virulentes de la vaccine, de la variole, de la clavelée du mouton, du rouget du porc, et nous fait pénétrer dans un monde nouveau où aucune découverte ne peut nous laisser indifférents.

Fig. 108. — UiCTOte du choléra des poules. Moitié droite. — Articles jeunes et turgescents, Moitié gauche.— Articles viens et flétris,

L’inoculation de quelques gouttes d’un liquide où on a cultivé le microbe amène l’apparition de la maladie avec tous ses symptômes. C’est le cas général pour les maladies virulentes. Mais contrairement à ce qui se passe ailleurs, l’inoculation du même liquide filtré sur de la porcelaine dégourdie, et débarrassé de tous ses éléments virulents, n’est pas inoffensive, La poule, après une courte période d’excitation, prend la forme en boule, sans doute par suite d’une contraction tétanique des muscles superficiels, se refuse à manger, et éprouve une tendance au sommeil des plus marquées. On pourrait la croire malade du choléra, si le sommeil n’était pas ici beaucoup plus léger que dans la maladie réelle. La poule, en effet, se réveille au moindre bruit. De plus, cette somnolence est passagère, et se termine par un rétablissement complet.

Nous trouvons là, en action, la différence théorique que nous avons signalée, au commencement de cette étude, entre l’inoculation d’un élément virulent et celle d’une substance toxique, et l’expérience nous montre, en outre, que le microbe du choléra des poules sécrète un narcotique qui entre en solution dans le liquide et peut agir en dehors de lui. C’est le premier exemple d’une substance, douée des mêmes propriétés que certains alcaloïdes végétaux, et attribuable, sans ambages, à une espèce microscopique déterminée.

~ Bnfin, «t dans même ordre de faits et d'idées, neusds*

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vons placer ici une substance, certainement produite aussi par un microbe, et jouissant des propriétés des alcaloïdes végétaux, \s.'pyocyamne.

On a remarqué depuis longtemps que le pus et la sérosité qui s’écoulent des blessures, et imbibent les linges à pansement, les colorent dans quelques cas d'une couleur bleue dont la teinte rappelle celle d'une solution de sulfate de cuivre. Cette apparition de pyocyanine est même quelquefois épidémique dans une salle d’hôpital. A de certaines époques, il y en a des cas multiples, puis ils deviennent plus rares ou disparaissent.

11 est naturel de rechercher s’ils ne seraient pas le résultat de l’ensemencement plus ou moins spontané d’un microbe dans les liquides organiques, toujours maintenus à bonne température, qui se colorent en bleu. Cette idée qui paraît due à Krembs, a été poursuivie et justifiée par Chalvet, Lucke et divers autres observateurs. Malheureusement il y a dans toutes les sérosités un grand nombre de microbes, et ce qui est difficile, c’est de dire auquel est dû le phénomène étudié.

En reproduisant à volonté la coloration bleue par ensemencement d’un vase dans un autre, on ne démontre qu’une chose, c’est qu’elle est due à un être vivant. Mais pour savoir quel est cet être, il faut l’isoler, le caractériser par une description suffisante, et montrer que transporté seul dans un liquide nutritif, il y ramène la coloration bleue de l’origine.

C’est un point auquel la science n’est pas encore arrivée. M. C. Gessard qui s’en est le plus rapproché, caractérise bien le microbe actif comme formé de petites cellules arrondies, très agiles, et dont le diamètre varie de 11’’ à 11^,5; elles fourmillent au bord des bulles d’air sous le microscope, ce qui prouve qu’elles sont aérobies : mais rien dans son travail ne témoigne que ces êtres sont seuls présents, et qu’ils ne sont pas seulement les compagnons de l’espèce active, l’ayant accompagnée dans toute la série des cultures. Rien ne nous apprend non plus de quelles substances ils vivent de préférence, s’ils sont des ferments des matières albumino’ides ou seulement des substances hydrocarbonées, bien que la première hypothèse soit la plus probable.

Cependant, Schroeter a observé en 1870 la production, àla surface de tranches de pommes de terre, de microbes de forme circulaire ou elliptique, produisant des colorations variées. Parmi ces êtres, il y en a un, appelé par Cohn micrococcus cyaneus, qui fournit un liquide bleu analogue à celui de la pyocyanine, et là, sur les tranches de pomme de terre cuite, il y a bien des chances pour que l’amidon fût l’aliment consommé. Il y a donc, de ce côté, des recherches à faire, qui montreront sans doute que ces matières colorantes sont, comme l’alcool dans le cas de la levure, des sortes de produits résiduels de l’action des microbes, pouvant se retrouver avec des caractères identiques parmi les résultats de l’action d’un grand nombre d;espèces diverses, de même que l’alcool est un terme auquel s’arrêtent beaucoup d’infiniment petits.

Mais, s’il reste quelques doutes sur la véritable cause de production de la pyocyanine, il n’en reste pas sur le véritable caractère de cette substance depuis le travail de M. Gessard. Elle est assimilable aux alcalo'ides végétaux.

Fordos la sépare en traitant les linges bleuis par de l’eau ammoniacale qu’il «gîte ensuite avee du ehlôfofôrme* Qe liquide entr«lne la matière colorante et

les matières grasses. On le sépare, on le filtre et on l’agite avec de l’eau légèrement acidulée par de l’acide sulfurique ou l’acide chlorhydrique. La pyocyanine abandonne le chloroforme et passe dans le liquide à l’état de combinaison saline qu’on décompose par une base. On agite de nouveau avec le chloroforme qui reprend la pyocyanine bleue et l’abandonne après filtration, par évaporation spontanée.

Le chloroforme traité par l’eau acidulée garde en solution une autre substance jaune, qu’on sépare en distillant avec un peu d’eau. Il reste un liquide aqueux que surnagent les matières grasses. On le filtre, et on l’agite avec du chloroforme qui dissout la matière jaune appelée pt/oæanttoe.

La pyocyanine, obtenue par évaporation lente de sa solution chloroformique ou aqueuse, est cristallisée en lamelles, tablettes ou aiguilles bleues. Ses solutions passent au rouge carmin par les acides, avec lesquels elle forme des composés cristallisés en aiguilles, dont la couleur varie du jaune au rouge brun et rappelle celle des cristaux d’hémine. Elle jouit donc de propriétés alcalines. M. Gessard a montré qu’elle ressemblait aux alcaloïdes végétaux. Elle précipite les chlorures d’or et de platine, les iodures doubles de potassium et de cadmium ou de mercure, l’acide phosphomolybdique, les acides tannique et picrique. Elle réduit très nettement le ferricyanure de potassium lorsqu’elle est à l’état de sulfate bien neutre. Toutefois, injectée en poids de 2 milligrammes à un moineau et à un bruant, elle n’a amené chez eux qu’un malaise passager.

De plus, elle est assez instable. Les agents réducteurs, l’hydrogène sulfuré, l’hydrogène naissant la décolorent. Dans les liquides où elle se produit sous l’action des microbes aérobies, elle forme un liseré bleu à la surface supérieure, là où il y a assez d’oxygène. Partout ailleurs à l’intérieur du liquide, elle est décolorée par le milieu réducteur que lui font les microbes, mais elle se recolore à l’air, et il suffit d’agiter le liquide au contact de ce gaz pour le voir se teinter dans toute sa masse.

Non seulement elle peut se réduire, mais encore elle peut s’oxyder. Agitée à l’air en solution fortement alcaline, elle se décolore encore rapidement, et devient alors de la pyoxanthose. Cet effet se produit avec plus de lenteur sur les cristaux abandonnés à l’air, qui prennent une teinte verte due au mélange de la pyocyanine bleue avec la pyoxanthose jaune. On peut les purifier de cette dernière substance au moyen de l’éther qui la dissout beaucoup plus abondamment qu’il ne le fait de la pyocyanine. Mais il vaut mieux préparer directement la pyoxanthose par le procédé de M. Gessard que nous venons d’indiquer; on neutralise l’excès d’alcali dans lequel on l’a produite, et on la reprend par le chloroforme qui l’abandonne par évaporation sous forme cristalline. C’est une substance qui forme avec les acides des combinaisons peu stables. Elle présente les réactions des alcaloïdes végétaux, comme les corps dont elle provient, mais elle est moins basique et peut môme se comporter comme acide.

Aeltles fixes de la putréfaction. — Nous avons terminé l’étude des substances alcalines fixes qu’on rencontre dans les liquides putrides. On sait beaucoup moins de choses sur les substances de nature acide qui peuvent se

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former, en dehors des acides volatils que nous connaissons déjà, et de l’acide oxalique, dont j’ai signalé la formation possible aux dépens de la caséine.

Les recherches de MM. Krause et Salomon, Weyl, E. et H. Salkowski, ont prouvé la formation, pendant la putréfaction, d’un grand nombre de produits nouveaux. D’abord de la xanthine, puis de l’hypoxanthine qui devient de la xanthine par oxydation. Comme acides fixes, on a signalé les acides phénylacétique et phénylpropionique. La laine a fourni en outre un acide particulier C“H®0®, appartenant à la série aromatique. Cet acide a été également retrouvé par MM. Salkowski dans les produits de la fermentation de la fibrine et de la chair musculaire.

Celle-ci leur a donné une quantité notable d’acide succinique, que Stockly a rencontré aussi dans la putréfaction des cerveaux. Mais pour ce corps, de même que pour l’acide lactique qu’on a souvent signalé, il y a à se demander s’il provient bien de la matière albumino'ide, et s’il n’est pas plus sûr d’en chercher l’origine dans les hydrates de carbone, matières glycogènes ou autres, que renfermaient les matières complexes soumises à la putréfaction.

MM. Salkowski ont constaté aussi la formation, pendant le procès putride, des acides gras les plus élevés dans la série, tels que l’acide palmitique et l’acide oléique. J’ai dit plus haut que je n’avais pu constater rien de pareil avec la caséine, et les observations de Kadina Sieber sont d’accord avec les miennes. Rappelons-nous que la fibre musculaire, commela levure, renferme des matières grasses que l’éther n’enlève que lorsque la fibre est détruite, et que l’acide palmitique et l’acide oléique peuvent bien provenir des matières grasses laissées dans la chair musculaire.

MM. Gautier et Étard annoncent avoir rencontré aussi, en dehors de l’indol, du scatol et du phénol, dont nous avons parlé au chapitre précédent, de la guanidine qu’on a le droit de considérer comme provenant de la matière azotée.

Enfin, pour être complet, nous devrions maintenant aborder l’étude des produits intermédiaires entre lâ matière albuminoïde initiale et ceux que nous venons d’apprendre à connaître. Mais cette série de produits est à peine étudiée, etnous ne trouverions rien de plus général à dire sur elle, que ce que nous en avons appris quand nous avons étudié les transformations que subit la caséine sous l’influence de ses ferments. Quand on n’a pas affaire à des produits volatils ou crislallisables,les réactions auxquelles on peut avoir recours pour distinguer les uns des autres les produits de la putréfaction sont tellement incertaines qu’on ne peut baser sur leur emploi aucune science positive. Il vaut mieux abandonner le sujet, en le bornant à ce que nous savons déjà, et arriver à l’étude de ses ressemblances et ses relations avec les phénomènes normaux de l’organisme. C’est ce que nous ferons aux prochains chapitres.

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DUCLAUX. — CHIMIE BIOLOGIQUE