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Le liquide de L. TRIBONDEAU, M. FicaerelJ. DUBREUIL est un mélange d’éosinate de bleu à l’oxyde d'argent ou bleu Borrel et d’éosinate de bleu de méthylène ordinaire,

Ces éosinates sont dissous dans un liquide composé de 10 volumes d'alcool éthylique absolu pour un volume de glycérine neutre.

La coloration des frottis s'obtient de la façon suivante : après desséchement à Pair ou après fixation humide comme 1l a été indiqué plus haut, on verse sur la lame X à XII gouttes du colorant ; on laisse agir trois minutes ; on ajoute alors au colorant rassemblé le long d’un des grands bords de la lame la même quantité, X à XII gouttes d’eau distillée.

On mélange et on laisse la lame au repos dans une boîte de Laveran jusqu’à coloration complète, 15 à 20 minutes à l’étuve à 370 de préférence. On lave ensuite brusquement et on sèche au papier mousseline.

La coloration gagne en netteté et elle devient d’une meilleure conservation si l’on prend le soin de passer 2 à 3 minutes dans une solution de tanin à 5 p.100.

COLORATION PAR L'HÉMATOXYLINE FERRIQUE

C’est une méthode de coloration indirecte et régressive qui colore en noir intense sur un fond incolore ou à peine coloré les structures nucléaires. C’est, avec le Romanowsky, les deux pierres angulaires de la Cytologie et de la Parasitologie.

Le mordant en même temps que le différenciateur est l’alun de fer (sulfate double d’ammonium et de sesquioxyde de fer), qui se présente sous l’aspect de cristaux violet clair qu’il ne faut pas confondre avec les cris-

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taux verts du sel double de protoxyde de fer ou sel de Mohr. Le colorant, lui, est, une solution d'hématoxyline à 1 p. 100.

Le procédé de coloration par la laque ferrique dû à HEIDENHAIN est d’une pratique délicate et ne donne de bons résultats qu'entre les mains d’un histologiste exercé. Pour la coloration des Amibes, DoBELr, dans ses importants travaux sur leur morphologie, donne une modrfication à la technique primitive qui nous a fourni d’excellents résultats.

Les lames, après fixation, sont portées de l'alcool à 70° dans une solution d’alun de fer dans le même alcool ; il suffit de 10 minutes de mordançage ; rincer dans de l'alcool à 700 et colorer 10 minutes dans une solution -d’hématéine dans l'alcool à 70°. Différencier ensuite dans la solution d’alun de fer originelle qui a servi à mordancer, en contrôlant au microscope. Passer par plusieurs alcools à 70° pour enlever toute trace d’alun.

L'opération demande environ une demi-heure ; on peut encore aller plus vite en opérant à l'étuve à 370.