JOI
I ) Dans la première sério d' éssais, bien que la surcharge ait tou = jours été de 2 mgrs , nous trouvons, entre les élutions des chromatopra= phies df urine et de celle surchargée d' acide indol=acétique, des diffé renccs qui variont très grandement au licu d' être fixes . Les valeurs des différences des densités varient de 0,390 à 1,045 qui sont Les va ,Jeurs extrêmes , La majorité des cas oscillent entre 550 et 950 qui sont
encore des variations très grandes ,
2 ) Au contrairc,dans la deuxième série d' essais faits avec 75 et 50 cc dfurine et une surcharge de 2 mers,nous nous trouvons avec des différences de densités que nous pouvons qualifier de rigoureusement constantes « En effet, les deux valeurs extrêmes sont de I.044 et I,094 avec une Var leur moyenne de I,050 ,; Si on se rappelle que 1? élution est répartie en & ou 5 fractions de TO ce et que la mesure des densités optiques est exac=. te avec une approximation de 0,005 en plus ou en moins pour chaque frac= | tion, nous pouvons dire que les chiffres sont identiques dans tous les CES + À :
De plus au cours dun essai fait avec 75 cc dt urine où la surch«:: ge nf était que de en mous avons obtenu une différence de densité optique de 0,680 «
Si 1,050 correspond à 2 mgr, corme on 1! a vu dans les cas précédents
0, 630 correspond à LS 2 I,20 mer ,
au lieu de I,225 ce qui cest un très bon résultat .
On pourra donc faire varier les quantités d? urine et trouver Les
mêmes résultats, à condition d' opérer avec des quantités de 50 ce à 75 cc df urine, la surchæ ge nf est pas assez importante pour la quantité d? acide indol=acé tique dèjà présent, ou que La proportion des inhibiteurs déjà pressentis devient ‘trop important ,
Il convient donc de st en tenir à une quantiÿé d' urine de 50 à 75 cc au naxinum,avoc une surcharge de 2 mgrs . On pourrait dire une fois pour toutes,quiune densité optique de I,050 représente une quantité de 2 mgrs dt acide indol=-acétique, mais il y a avantage à recommencer chaque fois 1? expérience en ajoutant L' acide pour étre dans les mêmes conditions de | pH de 1! urine, de vitesse d' écoulement et surtout d' alcalinité de la résine qui peut varier avec Les différents Lots et avec Le temps ,
La ‘technique que nous emploierons désormais dans tous les essais sera la suivante + sur 2 colonnes de I gramme de Déacidite, faire passer à dt une part 50 ce df urine pure ,
d'autre part, 50 co d' urine additionnée de 2 mgrs d? acide indol-acé tique.
Procéder à 1* élution par HC1 M/I0 ,
Recwillir 1télution ce fraction de IO cc
Faire sur chaque fraction la réaction colorée avec C1LH + GE .
Mesurer au spectropitonètre de Beckman de 450 my à 550 rip et notamment à 5I0 my les densités optiques de toutes 1es fractions donnant une coloration rose en mettant dans la cuve-témoin la phase butanolique df une réaction au perchlorure faite avec 2 ce df eau distilléc 4 Fe
Additionner les densités optiques entre elles et faire La diffô
rence des deux totaux fournis par L! urinc pure ct 1! urine surchargée d'
Ft
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