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des autres, cent leucocytes. Voici comment on la pratique.
On réunit sur une lame bien propre, une goutte de sang, ni trop petite, ni trop volumineuse, puis on l’étale rapidement avec une lame rodée ou une baguette de verre. On dessèche la mince couche de sang, en agitantvivement à l’air la préparation ; on possède alors une préparation de sang sec. L'examen microscopique direct, ne permettant pas d’apercevoir grands détails, il est nécessaire de faire des préparations colorées. L'emploi des solutions colorantes nécessite la fixation préalable du sang, qui peut se faire de diverses façons.
Lorsqu'on veut faire une étude minutieuse, il est presque indispensable de recourir à l’emploi de la chaleur et de laisser agir pendant quinze minutes sur la platine chauffante d'Ebrlich, la température de 110°, On peut alors mettre en évidence les divers types de granulations que renferment les leucocytes polynucléés. Mais si l’on désire simplement étudier, comme nous, les cellules éosinophiles, il suffit de faire agir des réactifs qui se trouvent dans toutes les mains et ne demandent point d'appareils spéciaux. En quelques instants, l’alcool absolu, le chloroforme, ou le mélange à parties égales d'alcool absolu et d’éther permettent d'obtenir de fort belles préparations.
Toutes les couleurs d’aniline colorent les globules blancs, mais toutes ne sont pas également utilisées en
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£ hémaiologié. Pratiquement, on ne se sert que d’un certain nombre. Ce sont : la thionine qui colore les noyaux cellulaires et met en évidence les granulations basophiles ; le tréacide d’Ebrlich (solution d'orange saturée aqueuse, fuchsine acide et vert méthyle) qui, outre les noyaux colore les petites granulalions neutrophiles des polynucléaires du sang et les grosses granulations acidophiles des éosinophiles ; enfin l’hématéine-éosine que nous avons surtout utihsé parce que l’hématéine est un réactif strictement nucléaire, et que léosine ne teint que les grosses granulations des cellules, à qui leur affinité pour ce colorant a fait donner le nom d’éosinophiles.
Ainsi donc, quand on veut seulement étudier les cellules éosinophiles, il suffit de fixer pendant quelques minutes la lame de sang par le réactif alcool absolu éther, de la colorer cinq minutes avec l’hématéine de Meyer, puis après avoir lavé, de faire agir quelques secondes une solution aqueuse très faible d’éosine. Après lavoir séchée, on n’a plus qu’à pratiquer examen microscopique. On voit que cette technique fort simple est à la portée de n'importe quel praticien.
Lorsqu'on examine un sang normal, voici ce qu'on peut observer. Il y a normalement dans un mullimètre cube de sang, environ 6,000 globules blanes ; ce chiffre peut varier jusqu'à 7,000 physiologiquement. L'examen microscopique enseigne que ces cellules appartiennent à diverses variétés. Celles-ci sont au nombre de six que, pratiquement, l’on réduit à quatre : à savoir les lympho-
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cytes, les grands mononucléaires, les polynucléaires neutrophiles, les polynucléaires éosinophiles, enfin les formes de transition neutroplules et les mastzellen. Ces deux derniers types ne sont représentés que par de rares échantillons, et le plus souvent on n’en tient pas compte dans les numérations.
Les lymphocytes sont des globules de la taille des hématies formés presque uniquement par un gros noyau rond très colorable, qu’entoure une mince couche de protoplasma se colorant peu, à réaction basique.
Les grands mononucléares sont de grandes cellules de 15 à vo de diamètre, à noyau excentrique, ovalairé, peu colorable ; le protoplasma abondant se teint difficilement. On voit encore des mononucléaires
moyens, mais ces cellules sont de sunples formes de
transition entre les deux variétés précédentes. Aussi certains aüteurs classent-1ils ces diverses cellules dans un groupe unique : les mononucléaires non granuleux ; pour d’autres, au contraire, ces deux types leucocytaires seraient physiologiquement et originairement distincts.
Les polynucléaires du sang possèdent un noyau, non pas multiple mais polylobé; celui des polynucléaires neutrophiles est irrégulier, formé de plusieurs masses nucléaires bien colorables, réunies par des filaments grêles. Le protoplasma de ces cellules se teint en rose par l’éosine et le triacide y révèle de petites granulations rouge-violet.
Les polynucléaires éosinophiles sont des cellules un
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peu plus volumineuses que les précédentes. Leur noyau est formé de deux à trois masses nucléaires peu colorables réunies par un filament ; leur protoplasma ne se teint pas par léosine qui ne colore que les grosses granulations régulières qu'ils renferment. Il se colore au contraire légèrement par la thionine qui laisse en blanc la place des granulations et qui donne en quelque sorte une épreuve négative. On peut donc reconnaître aussi bien une cellule éosinophile, dans une préparation colorée à la thionine, que dans celles où Pon à fait agir lhématéine-éosine. | |
Les mastsellen où polynucléaires basophiles sont de grandes cellules à noyau polylobé très irrégulier, et qui renferment de grosses granulations que la thionine colore en rouge violet.
Les formes de transition, neutrophiles, participent aux caractères des polynucléaires et des mononucléaires. Leur noyau plus ou moins échancré est assez colorable, leur protoplasma contient de très rares granulations neutrophiles,
Les divers types leucocytaires se trouvent à l'état normal dans des rapports assez fixes. 1 y a un état d'équilibre (équilibre leucocytaire), suivant l'expression dé MM. Leredde et Loeper : c’est la détermination des proportions relatives de ces formes, qu'on doit reconnaître, en pratiquant la numération qualitative. Dans ce but, on utilise les préparations colorées: On passé en revue un très grand nombre de globules blancs dans un