CHAPITRE II

L'Antisepsie et les Huiles essentielles.

Les premières recherches scientifiques sur le pouvoir antiseptique des huiles essentielles — d'après nos recherches forcément très incomplètes, par suite des difficultés de l'heure présente — ont été entreprises par M. Chamberland (1887).

Ce savant à fait l'essai de l’action de quelques essences, soil en vapeur, soit en émulsion sur les spores et le filament de la bactérie charbonneuse.

Il a indiqué six essences comme remarquablement antiseptiques. Ce sont : l’origan, la cannelle de Chine, la cannelle de Ceylan, l’angélique, le vespétro et le géranium d'Algérie.

Deux ans plus. lard, MM. Cadéac et Albin Meunier firent une série de travaux fort intéressants sur l’action antiseptique des essences (Annales de l'Inshitut Pasteur).

M. le professeur Bouchard, dans son ouvrage sur ja thérapeutique des maladies infectieuses, signale et insiste sur le pouvoir antiseptique des essences, dont quelquesunes sont « aussi antiseptiques que les sels mercuriels ». Poursuivant les expériences de Chamberland, il étudie à nouveau les six essences énumérées, en solu-

tion hydro-alcoolique, et montre que la végétation micro-

SR RES (TES bienne n'est possible qu'avec une dose du mélange d’essence inférieur à 0 gr. 114 par litre. Au-dessus de cette dose, aucun développement ne se fait. La valeur thérapeutique de ce mélange d’essences serait donc bien supérieur à celle du naphtol.

En 1893, le docteur Forné éiudie le pouvoir bactéricide du goménol (Annales de l’Inshtut Pasteur), dont M. G. Bertrand venait de définir la composition sur des échantillons remis par M. Prevel.

Cette essence renferme un térébenthène CIH16 dextrogyre dans la preportion de 10 p. 100; un citrène isomérique avec le térébenthène, mais lévogyre; de l'eucalyptol dans la proportion des deux tiers du poids; du terpinéol C2H1802 dans la proportion de 5 p. 100.

Les ‘expériences de M. Forné classent le goménol parmi les meilleurs ‘antiseptiques d’origine végétale. Les vapeurs seules suffisent à empêcher l’envahissement du terrain par les germes qui y sont semés.

En 1912, M. le professeur agrégé Guegen, de l'Ecole. de pharmacie de Paris, reprend les travaux antérieurs sur le goménol. Les expériences portent sur le bacille d'Eberth, du charbon, du pus bleu, du staphylocoque doré. Voici le résultat obtenu que nous empruntons à la théorie de Rigaux (Lyon, 1907).

Bacille d'Eberth, ralentissement des cultures manilestes à partir de 1/2230 d'essence. Il augmente à peu près proportionnellement aux doses employées jusqu’à 1/1115 qui est la dose critique. Une proportion un peu supérieure empêche sûrement toute culture.

En résumé, le bacille d'Eberth placé daris les condi-

< — 21 — tions les plus favorables ne peut cultiver en présence d'une solution au millième (1 gr. par litre de bouillon).

Bactérie charbonneuse. -— Entre 1/2975 et 1/2210, brusque arrêt de 24 heures. Le développement reprend ensuite plus lent.

Dose critique : 1/637.

Dose sûrement imhibitrice : 1/500 ( gr. par litre de bouillon).

Bacille pyocyanique. — Ralentissement d’une façon à peu près régulière depuis 1/8920 jusqu'à 1/8925. À partir de cette dilution, l’action retardatrice est plus intense.

Le point critique est à 1/5281. :

Bacille très résistant, la dose toxique pour cette espèce est d'environ 2 gr. 25 par litre.

Staphylocoque doré. — La très faible dose de 1/8920 ralentit déjà son développement d'une façon manifeste des doses un peu supérieures (1/4000 et 1/3000 environ), c'est-à-dire 0 gr. 25 à 0 gr. 35 par litre, paralysant les cultures de 48 heures à 3 jours.

La dose sûrement inhibitrice, en milieu nutritif et à l'optimum de température est d'environ 1/2250 (0 gr. 48 par litre).

Rigaux à son tour étudie les propriétés du goménol sur le streptocoque et a montré que le développement de ce micro-organisme ne pouvait se faire dans un milieu contenant 1/500 d'essence, c'est-à-dire 2 cc. par litre.

Dans une note à l'Académie des Sciences (1), présentée par M. le professeur Haller, M. Lucien Cavel a signalé la valeur antiseptique de quelques huiles essentielles.

(4) 21 Mai 1918, Tome 166, n° 20, page 827.

= 900 Cet auteur a chercher à déterminer pour chacune d'elles la dose limite qu'il faut employer pour rendre impossible toute végétation microbienne dans le bouillon de viande ordinaire, neutralisé, puis copieusement ensemencé. Il a mélangé 18 ce. de ce bouillon avec de l’eau d'une fosse septique desservant un réseau d'égouts.

Le mode opératoire fut le suivant : les essences étaient diluées, dans des dissolvants appropriés, de façon à pouvoir en introduire aisément dans des tubes de bouillon. Chacun des tubes disposés en série, recevait l'ensemencement ; un examen régulier effectué sur une période de plusieurs mois permettait d'éliminer les plaques ayant cultivé, c’est-à-dire, celles où la dose d'essence était insuffisante pour arrêter toute végétation. Le résultat fut le suivant :

Essences. — Doses infectibilisantes pour 1000. FOyYM +52 TR RON op A 0A7E Origan. tre He NAT RE 1,0 Poringak 1... ete Re 1,2 Verveinez 0... CRIER 1,6 Cannellesde Chine. -..:.:..402% 17 ROSE SENS ER Le ae 1,6 (HPOPEREN e chen PANRREN 7 CUR 2,0 ELA l RITES RS AE RER EEE 2,80 Menthe res Rent Tan Xe) Géranium de France. ..:....,.. 2:55 VÉLIVEr SIREN RAP 25 AMANTÉS AMÉTES RÉ AU NIEA ER 2,8 Gatltherta ss MEURT, 3,0

Géranium

THE Wintérereen. A ne PTE 5.0 Reine des prés ..... ARE EE ne = C9 FASO RNREee s NT TEE SRE 3,0 DATA EC RU un a Le CRE RE RP ERP EE ue 3,8 Cannelle: ordinaire :.......,.,.:. 4,0 RE mn an du tue 4,0 FORME EE OM Pense er RT Se 4,8 RTS NS PRÉ RR REPEES 4,2 Monastir en con er 4,2 1 LOT TN SNS ET RE LS ÉD rer nt, Porno 4,5.

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LASER La quantité infertilisante de phénol prise à litre de comparaison a été dans les mêmes conditions de 5,6/00. M. Martindale a classé les essences (Pharmaceutical Journal, 1910), en se servant de l'acide phénique comme point de comparaison. à Ce tableau que nous reproduisons doit-se lire ainsi, l'essence d'origine est 25,76 fois plus antiseptique que le même poids de phénol dans les conditions de lexpé-

rienice.

Essence d’origine ..... .. 20,76 LRO ES 19,41 25,29 Essence de thym....... 13,36 14,85 Essence de cannelle... 7,105 7:92 Essence de Romarin..... 5,94 Essence de rose........ 5,94 Esence de wintergreen.. *.. 4,64 Essence de lavande... 4,94 Essence de citron...... 3,94 Esence d'amandes amères 3, 16 Essence d’eucalyptus... 3,55 AVE) Esence de santal.....*. 1,67

En 1913, M. Holmès a (Pharmaceulical Journal consacré une élude fort intéressante aux huiles d’eucalyptus. Il rapporte dans ce travail les expériences soigneuses faites par MM. Baker et Smith, montrant que le phellandrène est un des composants les plus importants de l'essence d'eucalyplus et que la pipéritone et l'aromadendrol sont aussi des corps très actifs au point de vue bac- téricide et physiologique.

J signale les travaux faits à Sydney sous la direction de M, Walsh par M. Hall, indiquant 22 constituants dans

Ro les huiles diverses d’eucalyptus. Les constituants, qui outre l’'eucalyptus sont intéressants au point de vue antiseptique et thérapeutique, sont l’endesmol, l’aromadendrol, la pipéritone, l'aromadendrène, le dextropinène, le lévopinène et le phellandrène. Nous reproduisons ici un passage de son article en raison de son importance.

« Pour les expériences bactéricides on choisit deux espèces : le staphylococcus pyogenes aureus comme type très résistant et le bacillus coli communis comme type très peu résistant. Comme contrôle et pour avoir un point de comparaison avec les autres observateurs, il se servit d'une solution d'acide phénique à 2,5 p. 100.

« Dans cette solution, le staphylococcus meurt en une demi-heure et le bacillus en cinq minutes.

« L'énumération suivante donne les propriétés bactéricides des principaux constituants.

« L’endésmol étant insoluble dans l’eau et dans une solution alcaline fut dissous dans le pipéritone et dans l'eucalyptol. On remarque que l’endesmol augmente leurs propriétés actives, mais pas d’une manière considérable. Au grand étonnement de l’auteur, il a trouvé que l’eucalyptol ne contenant qu'une trace de pinène et d'ozone (extrait de l'eucalyptus Smithi) possédait de très faibles qualités antiseptiques, plus faibles même que celles des autres constituants. En poussant plus loin, on s’aperçut que les pouvoirs bactéricides variaient beaucoup, suivant les différents spécimens d’eucalyptol et que cette variation dépendait de la quantité d’ozone contenu dans l’eucalyptol. Des expériences faites avec des huiles essentielles montrentégalementune grande variation dans leur pouvoir bactéricide et l’on reconnut que cela prove-

0, a nait de l'acide acétique, auquel s’ajoutait le fer et le cuivre de l’alambic dissous par l'acide. |

«M. Hall constata une acidité contenue dans les huiles essentielles des espèces suivantes : Eucalyptus globulus, E. enevrifolia, E. Smithü, E. cinerca, E. camphora, E. apiculata, E. marcathuri, E. punctata, E. eugenioides, E. odorata et E. amygdalina. D'un autre côté, les suivantes étaient, soit neutres, soit légèrement acides : E. citriodora, E. dives,-E. Dawsoni, E. hemiphoia, E. macrohyncha, E. piperita et E. Dumosa.

IH y a une grande différence, quand l'acide a été neutralisé par une solution de soude sans autre reclification. Ainsi, l'huile essentielle de l'E. Smith détruit le staphylococcus en trente minutes, mais après neutralisation, il faut trois heures et demi. Mais pour l'usage médical on neutralise toujours les huiles, de sorte qu'il est inutile de tenir compte des propriétés bactéricides des huiles rectifiées du commerce.

« résulte de l'énumération ci-dessus que, sauf la présence d'acide où d'ozone, les huiles telles que celles de l'E. hemiploia, contenant de l’aromadendral, sont les plus bactéricides, mais il n’est pas certain qu'on puisse Jes employer pour des usages médicaux.

« Viennent ensuite celles contenant des pinènes, de l'endesmol el du phellandrène. Ces composés dégagent fort peu d'ozone et encore parce qu'il est impossible de les débarrasser de leurs terpènes.

« Les expériences de M. Hall ont montré que la présence de l'ozone est due aux terpènes.

« Quand on expose à l'air le phellandrène et l’aromadandrène sur un papier d’iodure de potassium amidonné,

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le bleuissement n'apparaît pas de suite, mais au bou de 20 à 30 minutes, la réaction a lieu et alors lés terpènes se résinifient. Le phallandrène et l’aromadendrène s'ozonisent plus rapidement que le dextropinène et ce dernier plus rapidement que le lévopinène. II explique les quanütés variables de pinène dans les huiles brutes. Il indique que l'ozone ne se transforme en oxygène qu'à 250° et à 300°, la plus grande quantité de l'ozone passe avec l’eucalyptol qui passe à la distillation de 170° à 175°. L'eucalyptol abandonne facilement son ozone à l'eau, ainsi, si on agite dans un tube à essai de l’eucalyptol contenant de l'ozone et de l'eau et qu'on les laisse se séparer, au papier d'iodure de potassium amidonné, l’eau et l’eucalyptol donneront la même réaction, le papier devenant aussi bleu avec les deux.

« Les résultats obtenus par M. Hall sont évidemment considérables au point de vue de l'importance pratique el peuvent être résumés ainsi :

« 1° L'eucalyptol, sauf quand il est chargé d'ozone, est le moins bactéricide des constituants des huiles.

« 2° L’ozone contenu dans les essences est l'agent le . plus important.

« 3° Les pinènes sont la source de l'ozone et les constiluants s’ozonisant le plus facilement sont la pellandrène et l’'aromadendrène.

« 4° Le meilleur eucalyptol est celui qu'on extrait des huiles contenant des pinènes.

« 5° Les huiles rectifiées vendues dans le commerce devraient donc être essayées pour la présence de l'ozone.

« 6° Il serait donc utile d'introduire dans la pharmaco-

pée un essai pour la recherche de l'ozone dans l'eucalyp- CO | : we é

«7° Il serait à discuter s’il ne serait pas préférable de substituer une huile contenant soit du pellandrène, comme l'Eucalyptus odorata, soit de l'aromadendral, comme l’Eucalyptus encifolia, ou une huile ozonisée d’une manière bien définie, d’une huile contenant un pourcentage déterminé d’eucalyptol et pas de pellandrène.

«8° La pipéritone semble devoir devenir un constituant important qui vaut la peine d'être étudié. »

Ces recherches et celles que nous exposons plus loin, n’envisagent que l'étude in vitro du pouvoir bactéricide des essences. Nous aurions voulu y ajouter quelques données précises, émpruntées à la clinique, mais le temps nous à malheureusement manqué pour cela.

L'usage qui à été fait pendant la guerre par le docteur Gallois de la lavande complète, en solution huileuse et par le docteur Forgues de la lavande déterpénée. Les résultats qu'ils ont obtenus dans le traitement des plaies, nous font penser que certaines huiles essentielles acquerront bientôt une place importante parmi les antisepliques usuels. |

Nous sommes persuadé que les essences, par leurs propriétés bactéricides, se rapprochent de la définition donnée par M. Dakin : « L’antiseptique chirurgical idéal serait celui qui effectuerait une stérilisation complète, sans causer aucun dommage aux cellules des tissus. »

IPLÈ TE, LAVANDE DÉTERPÈNÉE, ROMARIN re ET CONSTITUANTS D'ESSENGES re É- | GÉRANIOL. EUCALYPTOL, TERPINÉOL ET SALVOL

ce —— s =

FACE Les essences qui ont servi aux expériences ïe M. Ro- AT Te x chaix nous ont été remises par M. Gattelossé et par Let CPE

| M. Mouranchon. L'essence de IBFAUE complète Stan-dard contient :

cer Acétate de lynalyle:-57. 20 40 p. 100. RE Tina Re PA D per t00e « £ He rare. : L0 D: 100 ; Re" Résineg ........ nn due p.100 L essence de lavande délcipence cuis | Acétate de” IMAIVIE ris 45 p. 100, rs Pro 00 prel 00 L'essence de romarin DAepEnée contient :

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SE ere Les constituants d’essences comme le géraniol, l'eucalyptol et le terpinol ont une constitution moins complexe que celle de l'essence de lavande, même déterpénée. Au contraire, le salvol est un mélange de constituants d’essences fort complexe et dont voici la teneur :

Aromadendrène .......-.... 2: 0p:100 DIT Re eme ete RS DD EUU BOOM RENTE ENTREE *5s=p; 100 Isobornéol (acélate). ........ 10 p. 100 TerpAOMeEE EE TETE N -7400pei00 LerDINOlR NET LP AERERRrEE 20 p. 100 Butyrate de géranyle......…. 10 p. 100 Sabine RE es 5 p.100 SAVOIR RE A tee 5 p. 100 ThymMolsE Re rene 10 p. 100 ÉTOILES RE PE 10 p. 100 Enfin, les terpènes de lavande contiennent à leur tour : Limonène "EME eRer 10#p100 Pinène ri. TERRE 20 p. 100 Cinéols:. 5, SRE 10 p. 100

L'essence de lavande Châteauneuf nous a été remise par M. Mouranchon, sa leneur n'a pas été établie d’une façon précise, mais les renseignements que nous possédons nous permettent de dire que cette essence est une des plus riches en éther. Elle provient de la Montagne de Sure (Basses-Alpes), renommée pour la finesse de ses produits.

Recherches.

On sait que pour l'essai des antiseptiques, la méthode au « fil » de Koch et celle de Krônig et Paul aux « grenats » sont généralement abandonnées. La méthode ordinairement employée actuellement est la suivante : on fait agir un volume connu de concentrations variées de l'antiseptique, sur une suspension microbienne de concentration constante, et à des intervalles connus de temps, on détermine au moyen de testcultures en bouillon ou sur gélose quels sont les essais dans lequels la stérilité est complète ?

Dans l'étude de l’action antiseplique in vitro des essences, cette méthode est imapplicable, qu'il s'agisse de la recherche de l’action bactéricide de contact ou de l’action des vapeurs dégagées par les essences. Nous avons employé la méthode au « fil » de Koch, en réduisant au minimum les causes d’erreur,comme on le verra plus loin.

Les essais ont porté sur le staphylocogue doré, en cultures, en bouiïllons ou en émulsions en eau physiologique. L'action du contact direct des essences et l’action

des vapeurs émises par elles-à +37°, ont été étudiées. $ 2.