RECHERCHE DU BACILLE D'EBERTH

La recherche du bacille d'Eserra est une opération très délicate. Il est bien rare qu’on puisse le mettre en évidence même dans des eaux qui ont sûrement déterminé des épidémies de diothienentérie.

De nombreux procédés ont été préconisés pour déceler l’Eserrn dans les eaux. La plupart reposent sur l’emploi des milieux phéniqués préconisés dès 1887, par CHANTEMESSE et WipaL (‘), sous forme de gélatine peptone.

Nous nous contenterons de les énumérer en les classant par isolement :

Par les agents physiques ; Par l’action de substances chimiques ; Par la précipitation.

a) AGENTS PHYSIQUES

1° Procédé RODET (:).

Il consiste à maintenir le bouillon ensemencé avec l’eau suspecte à + 45°, température de sélection entre le bacille typhique (qui peut encore se développer à + 45°) et la

plupart des autres espèces qui ne résistent pas à cette température.

(1) Cmanreuesse et Wina, Recherches sur le bacille typhique et l'étiologie de la fièvre typhoïde (Caractères de physiologie, p. 887, p. 17). (2) Roner, Chaleur. — Traité de Biologie, 29 juin 1889, p. 465.

oo — 20 Procédé WILSON (1).

L'auteur distille l’eau à analyser dans le vide à + 37°-4o°. D’après lui, le bacille typhique cultiverait surtout si on ajoute 10 centimètres cubes de bouillon par litre d’eau à analyser. Le résidu de la distillation est ensemencé sur DriGazsky-CoNRADIr.

A cette occasion, Je vais indiquer ici ce qu'est ce milieu.

Le milieu Dricazsky-Conrabr est une simple modificaüon du milieu de CHanremesse; c’est de la gélose tournesolée, lactosée, à laquelle on ajoute une petite quantité de cristal violet qui joue le même rôle que lacide phénique dans la méthode précédente. En raison de son pouvoir antiseptique, ce colorant entrave la poussée de beaucoup de microbes banaux se trouvant associés au Bacille typhique et au colibacille. Il laisse, au contraire, facilement se développer ces derniers. On le prépare de la façon suivante

1.500 grammes de viande sont mis à macérer dans 2 litres d’eau pendant vingt-quatre heures. Le liquide est exprimé, puis porté à l’ébullition pendant une heure. On filtre et on ajoute :

Peptône sèche de Wirre , . . . . . ,-. 20 grammes. POS CN A TN | 2Ô —

SCA Col —

On fait bouillir pendant une heure; on ajoute 60 grammes de gélose et on laisse une heure à l’autoclave ; on alcalinise légèrement avec de la soude. On peut remplacer la macération de viande par une solution de 20 grammes d'extrait de viande dans deux litres d’eau.

D'un autre côté, on prépare une solution de 30 grammes

(1) James Waicsox, New method of isolating the bacillus typhosus from infected water (Brit. méd. Journ., 18 mai 1907, p. [Hl-76).

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de lactose chimiquement pur dans 300 centimètres cubes de teinture de tournesol et en faisant bouillir le mélange pendant quinze minutes.

Cette dernière solution est ajoutée très chaude à la gélose encore bien liquide; on agite pour bien mélanger le tout. Le produit doit avoir une réaction légèrement alcaline. S'il présentait une coloration rose, elle devrait être réduite avec la soude. À ce moment, on ajoute 4 centimètres cubes d’une solution de soude à 10 ‘|, stérilisée et chauffée, le milieu devant absolument être alcalin (acide il ne peut pas servir), puis 20 centimètres cubes d’une solution fraîchement préparée de o#r1 de cristal violet de Hocusr dans 100 centimètres cubes d’eau stérilisée chaude.

Le milieu encore chaud est ensuite réparti dans des boîtes de Pérri stérilisées qui sont mises à refroidir et peuvent être utilisées après solidification, ou bien on disposé dans des ballons, des tubes stérilisés, par quantité de 10 à 20 centimètres cubes, qui pourront être conservés quelque temps, puis mis à fondre et coulés en boîtes de Pérri stérilisées lorsqu'on voudra s’en servir (‘):

3° Procédé CHANTEMESSE.

On filtre l’eau sur une bougie; on ensemence le dépôt de filtration sur gélose lactosée phéniquée tournesolée. On place à l’étuve à 37°. Au bout de douze à quinze heures, apparaissent de nombreuses colonies; les unes roses (colibacille), les autres bleues (bacille d’Eserru); les colonies bleues sont prélevées, et on les soumet à l’épreuve de l’'agglutination.

(1) A. Sarrony, Guide des Manipulations de bactériologie, p. 22-23. Berger-Levrault, édit., 1916.

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b) PROCÉDÉ BASÉ SUR L'ACTION DES SUBSTANCES CHIMIQUES

I. PROCÉDÉS A L’ACIDE PHÉNIQUE A) Procédé CHANTEMESSE et WIDAL.

Ces auteurs montrent que le colibacille et le bacille d’Esertu se développent dans les milieux de culture, addiüonnés de 1 pour 4oo d’acide phénique, et appliquent ce principe à la recherche des deux microbes dans l’eau.

B) Procédé PÉRE.

Permettant l’ensemencement de grandes quantités de Peau à examiner. On fait différentes cultures et on termine par ensemencements sur bouillon phéniqué au millième et à + hr.

GC) Procédé POUCHET et BONJEAN (1889).

Ces auteurs ensemencent 100 centimètres cubes d’eau dans 100 centimètres cubes de bouillon; le mélange est phéniqué au millième et mis à l’étuve à + 42°; après quarante-huit heures on fait un repiquage et on isole les germes par la méthode des plaques.

D) Procédé VINCENT.

Vincent pratique les ensemencements dans du bouillon phéniqué à 1 °,, et fait la culture à + h1°5 ou + 42°. Ce procédé permet lisolement du bacille typhique quand il se trouve mélangé au colibacille.

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