II. PROCÉDÉ A L’IODURE DE POTASSIUM
A) Procédé d'ELSNER (1).
D'après cet auteur, ce procédé permet de déceler le Bacille typhique dans les milieux (eaux, excréments, etc.) où il est associé au colibacille. Il est basé sur le fait que le Bacille typhique et le colibacille se développeraient, à l'exclusion de la plupart des autres microorganismes, sur une gelée de pomme de terre, additionnée d’iodure de potassium.
Ce procédé donne lieu à de fréquents mécomptes et convient mieux au colibacille.
B) Procédé GRIMBERT (:).
Grimserr attribue les insuccès de la méthode d’ELsner à l’inconstance du milieu employé (variation de la composition chimique de la pomme de terre) et à l’indéterminaüon de son degré d’acidité; aussi utilise-t-il un milieu minéral qu’il gélatinise à 15 °{,.
Au moment de l’emploi, la gelée est additionnée de r °}, d’iodure ou même de bromure de potassium.
C) Procédé RÉMY (3).
L'auteur utilise aussi un milieu synthétique moins acide que celui de GrimBerr. Sa gélatine différentielle lui a
(1) Ecsner, Untersuchungen über elective Wachstum der Bacterium Coli Arten und des Typhusbacillus (Zeitsch. f. hyg. XXI, p. 25, 1895).
(2) Grimsenr, Sur la recherche du bacille d'Eberth dans les eaux (Société de Biologie, 12 mai 1894). Action du colibacille et bacille d'Eberth sur les Nitrates (Annales Institut Pasteur, t. XII, p. 67, 1899).
(3) Rémy, Contribution à l'étude de la Jièvre typhoïde et de son cle (Annales Institut Pasteur, t. XIV, p. 405 et 555,. 1900).
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permis d'isoler le bacille typhique dans toutes les selles typhoïdiques qu'il a étudiées. La gélatine différentielle n’est pas plus élective que le milieu d’Ezsxer, les divers microbes y poussent; toutefois les espèces liquéfiantes s’y développent mal, et elle permet au bacille d'Éserra de cultiver à côté du colibacille.
D) Procédé BESSON.
Bouillon acide additionné de solution de Gram au moment de lemploi. Porter les tubes à + 37 — 38, arrêter la culture vers la vingtième heure. Ce procédé a l'avantage d'éliminer rapidement les saprophytes et de permettre lensemencement de quantités notables d’eau (10 centimètres cubes par tube), ce que l’on ne peut faire avec les milieux à base de gélatine.
c) PROGÉDÉS BASÉS SUR LA PRÉCIPITATION
Ces méthodes sont basées sur le fait suivant. Si l’on détermine un précipité chimique au sein de l’eau, les microbes sont entraînés mécaniquement avec le précipité. Il y a donc concentration de microbes. On redissout le précipité et on peut favoriser la culture bactérienne par repiquage préalable dans la bile de bœuf. Nous nous contenterons de les énumérer en indiquant rapidement leur principe.
A) Procédé VALLET.
Précipité obtenu par l’hyposulfite de soude et le nitrate de plomb. Quatre gouttes de chaque solution pour 20 centimètres cubes d’eau suspecte dans un tube stérile. Le précipité est redissous dans l’hyposulfite de soude après centrifugation.
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B) Procédé FICKER (:).
Précipitation par le sulfate de fer et le sulfate de soude. Le précipité se dissout par le tartrate de potasse ; la centrifugation est recommandée.
C) Procédé MULLER.
Tout d’abord l’auteur suit le procédé de Ficxer (énoncé plus haut), avec cette différence qu'il ne centrifuge pas, mais se centente de filtrer sur papier. Il ensemence du dépôt sur les boîtes de Dricarsky. Bien que l’auteur ne dissolve pas ce dépôt au moyen du tartrate neutre de potasse, il obtient des résultats aussi exacts que ceux de Frcker.
L’oxychlorure ferreux précipite plus rapidement que le sulfate; 5 centimètres cubes de la solution suffisent pour 3 litres d’eau.
Dans ce cas, 1l est mutile d'alcaliniser Peau, car les sels de chaux contenus dans cette dernière suffisent pour déterminer la précipitation de Poxyde de fer.
On peut filtrer déjà le précipité après trente minutes.
D) Procédé HILGERMANN (1906) (2).
Après alcalinisation de 3 litres d’eau à analyser avec ro centimètres cubes de soude à 5 °/,, on précipite le tout au moyen de l’oxychlorure de fer, et le dépôt ainsi obtenu est enrichi par une exposition de 48 — 72 heures dans la bile de bœuf à + 37°. On ensemence ensuite sur DriGazsky- CoNraD1.
(1) M. Ficxer, Ueber den Nachweis von Typhusbacillen im Wasser durch Füllung mit Eisensulfat (Hygien. Rundschau, t. XIV, p. 7-9, 1904).
(2) HirGermanx, Der Nachweis der Typhusbacillen im Wasser mittels der Eisenfällungsmethoden (Arch. f. Hyg., t. LIX, 1906, p. 354).
E) Procédé WILSON.
Précipité par solution alunée à 1/10° à raison de 0,50 pour 1 litre d’eau polluée, centrifugation et ensemencement sur DriGazsky-CoNRADi.
d) PROCÉDÉ BASÉ SUR LA MOBILITÉ DU BACILLE D'EBERTH
A) Procédé GAMBIER.
L'auteur utilise la propriété que présentent les bacilles
typhiques et paratyphiques de traverser rapidement une membrane poreuse.
B) Procédé CARNOT-GARNIER.
Est basé sur la facilité que possède le bacille typhique de traverser rapidement une colonne de sable fin.
e) PROCÉDÉ BASÉ SUR L’'AGGLUTINATION
CHANTEMESSE, WiNDELBaNDT et d’autres auteurs ont utilisé les propriétés agglutinantes du sérum antityphique pour isoler le bacille d’Eserru. Nous ne citerons que la technique de CnanNTEMESsE, qui consiste à ajouter à 1 litre d’eau suspecte 30 grammes de peptone; on neutralise et on met à l’étuve pendant vingt heures. S'il s’est formé des grumeaux, on filtre sur papier stérile et au filtrat on ajoute du sérum antityphique.
Les bacilles typhiques s’agglutinent. On centrifuge. Le culot de centrifugation ainsi obtenu est additionné de bouillon, émulsionné, et filtré sur papier stérile. Les amas res-
tent sur le filtre et on les ensemence sur des plaques de gélose lactosée phéniquée.
f) PROCÉDÉ BASÉ SUR L'EMPLOI DE LA CGAFÉINE
Roru (!)}, 1904, a remarqué que laddition de la caféine empêche le développement du colibacille sans gêner le bacille typhique.
Il ajoute à du bouillon ordinaire une solution de caféme, puis il fait des plaques sur gélatine.
Horruann et Ficker (?), en 1904, combinent le procédé à la caféine et celui au cristal violet.
Le milieu recommandé par eux est le suivant :
1 °}, nutrose.
0, 5 °/, caféine.
1 °/, d’une solution à o, 1 °/, de cristal violet.
On laisse douze à treize heures à + 37°. Puis on ensemence sur DRIGALSKY.
Les faits dans leurs grandes lignes ont été confirmés par STRÜSZNER (°), en 1905.
g) PROGÉDÉ AU VERT MALACHITE
Logrrcer (‘), en 1906, préconise les milieux à base de? vert malachite.
(1) Rora (Émile), Versuche über die Einwirkung des Trimethylæanthins auf das Bacteriun Typhi und Coli (archivo. f. Hygien., t. XLIX, 1904, P- 199).
(2) Horrwanx et Ficker, Ueber neue Methoden des Nachweises von Typhusbacillen (Hygien. Rundschau, t. XIV, 1904, p. 1-7).
(3) Ed. Srrüzsxer, 7yphusbacillen in dem Wasser eines Hausbrunnens (Centralbl. f. Bakter, t. XXXVIII, 1905, p. 19-24).
(4) EF. Lorerrcer, Der Kullurelle Nachweis der Typhusbacillen, in Faeces, Erde und Wasser mit Hilfe des Malachitgrün. Nährbôden zum Nachweise und zur Difjerentialdiagnose der Typhusbacillen und verwandter Baketerienarten (Deutsche med. Woche, 22 févr. 1906, p. 289-295).
