Première Partie

L'ELECTROPHORÈSE SUR PAPIER

L'ÉLECTROPHORÈSE - BREF HISTORIQUE

Méthode physico-chimique, initialement conçue pour l'étude des protémes, l’électrophorèse permet de résoudre la plupart des problèmes généraux qui préoccupent le chimiste, à savoir : la détection, l'isolement et le dosage des constituants protéiques d’un mélange.

Nous rappellerons très brièvement les principales étapes qui ont marqué les applications de l’électrophorèse.

Les protéines en solution sont susceptibles de se mouvoir sous l'influence d’une force électromotrice appropriée en captant des charges électriques. Quncxe en 1859 et Osrwazp ont dénommé respectivement ce phénomène de migration : cataphorèse et anaphorèse. Tisezius en 1937 (58) l’applique à l'étude des solutions de protémes et décrit son appareil classique à cuve en U que modifieront SvENssox (56) (67) et Prirpor. Cependant, les travaux sur la chromatooraphie suggèrent la mise au point de l'électrophorèse sur papier-filtre. Tisezits, lui-même, l’adopte (59) et l'étudie avec KunkEL (36) et CREMER (14). On peut citer également les travaux importants de Durrum (21), de ScaNeibER (51), de GRASSMAN, Haxnic et KNEDEL (28), (29), de MACHEBœŒUr ReBEyrortTE et Mlle BruNERIE (40), de ArprY (5) et de Vax Os (60).

De nombreux auteurs, dont Arpry (7), (4), ont établi la comparaison entre les résultats de l’électrophorèse et ceux obtenus avec les autres techniques de séparation des pratéines : relargage, précipitation par le sulfite de sodium.

Dans la première partie de ce travail, nous avons voulu étudier avec quelque détail la technique d’électrophorèse

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sur papier que nous désirions appliquer. Cette technique” peut apparaître de prime abord comme bien établie : en fail, les modes opératoires conseillés varient sur de nombreux points de détail et nous avons pu nous persuader qu'il n'était pas indifférent à l'exactitude des résultats d'adopter les unes ou les autres. Chaque point doit donc faire l’objet d'une étude critique, et la « normalisation » finale du mode opératoire est la seule garantie de la reproductibilité des mesures. On ne sera donc pas surpris de la place donnée à cette enquête nécessaire sur la pratique et la portée de l’électrophorèse sur papier.

HITS]

Recherches expérimentales sur la valeur de la méthode

La conduite d'une électrophorèse, jusqu'au résultat final exprimé par le pourcentage de chacune des fractions séparées, et, si possible, par leur « mobilité », peul ètre divisée en (rois parties distinctes :

1. L'application de la technique proprement dite, succession de manipulations aboulissant au tracé de la courbe d'électrophorèse.