II. — CONCENTRATION DE LA SOLUTION PROTÉIQUE

La quantité de sérum à utiliser varie de 6 à 8 mn selon les auteurs (pour une coloration au noir amide). Pour notre part, nous préférons une quantité iégère-

-ment supérieure : 8 à 10 mm’ (8 mm° est particulièrement

indiqué). Le choix de la prise d'essai est important ; de Jui dépend l'obtention de bons diagrammes, ni trop ui pas assez colorés.

Nous avons voulu préciser les ‘limites dans lesquelles l'électrophorèse sur papier permet de retrouver une protéine donnée. Pour cela, nous avons réalisé plusieurs séries d'expériences avec des solutions de plus en plus diluées d' TRUE lvophilisée isolée par la méthode de Conx (fraction V). La teneur en albumine de chacune de ces dilutions a été délerminée par un dosage d'azote.

EXÉRIENCES N° 14 9 ET 175 (I à VI).

A) Vérification du taux d'azote de l’albumine de Cohn (qui contient une certaine quantité de CINa).

Nous réalisons une solution-mèêre d’a'bumine à 50 g./litre par dissolution lente de 5 g. d’albumine lyophilisée dans une solution de CINa à 9%0 en ballon de 100 ml. que l’on remplit jusqu’au trait de jauge. À partir de cette solution-mère, on prépare difFérentes dilutions. Sur chacune d'elles, on effectue un dosage d’azote par la technique de MARKHAM :

Mode opératoire.

1) La prise d'essai doit renfermer de 0,020 à 0,150 mg. d'azote. Elle doit donc être comprise entre 0,135 mg. et 1,012 mg. d’albumine si l’on utilise 6,55 comme coefficient de transformation de l'azote en albumine (1).

La prise d'essai choisie correspond à environ 0,500 mg. de protéines.

2) Catalyseur de minéralisation de SISLEY (3,80 g. de SO,Cu et 50 g. de SO,K.) utilisé à raison de 0,54 g. en présence de 1 ml. de SOJE, N:

3) Distillation dans l'appareil de MarkHaM. Le volume du liquide à distiller ne doit pas dépasser 8 mi. Opérer en présence de 2 ml. de NaOH à 40 %. Recueillir 8 à 10 ml. de distillat dans SO,H, N/100.

4) Titrage en retour par NaOH N/100 en présence d’indicateur au rouge de méthyle et bleu de méthylène de formule : Solution alcoolique de rouge de méthyle à 0,1 % : 4 parties

Solution alcoolique de bleu de méthylène à 0,1 % : 1 partie

Concentr. iniliale Albumine %0 en Albumine Azote trouvée %0 060 —NAZOTELX 6,55

Solution-mère 50 7,34 48,10 »randiluée audi 222625 3,07 24,07