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Ambard rejette formellement ce procédé qui lui a donné
des déboires.
Le dosage direct du Chlore dans les hématies s’im-
pose donc.
On devra alors mesurer très soigneusement la quantité déterminée de globules rouges avec une pipette de précision à écoulement total en aspirant les globules à peine audessus du trait supérieur; la pipette sera rincée ensuite avec de l'eau distillée de facon à la débarrasser de toute trace de globules et l'on recueillera l'eau de lavage. Dans ces conditions on obtient des résultats constants.
Un second point présente une égale importance : il faut réaliser une séparation aussi complète que possible entre le plasma et les globules. La centrifugation doit être rapide et prolongée jusqu'à ce que les globules rouges soient établis à un niveau constant; on centrifugera toujours le même temps. Il faut alors enlever complètement le plasma qui surnage en l'aspirant avec une pipette effilée, puis en débarrasser la surface des globules en l’essuyant plusieurs fois avec un papier-buvard jusqu'à ce que celui-ci ne pré sente plus trace de plasma. On va enfin aspirer les globules en ayant soin que la pointe de la pipette reste au fond du tube à centrifuger; de cette manière, on prélève la portion du culot qui est la mieux séparée du plasma. Pratiqués toujours dans Iles mêmes conditions, {les dosages donnent des résultats précis.
Chez les nourrissons, on est obligé de se contenter de toutes petites quantités de sang. Pour ces « microdosages », Max Lévy (1) a mis au point la technique suivante que nous avons employée avec lui:
(1) Soc, Chimie Biologie, 1929, p. 633,
LA
AO
Solutions nécessaires.
1) Solution de nitrate d'argent contenant 2,906 grammes par litre; 1 ce. de cette solution correspond exactement à À milligramme de NaCl: |
2) Solution de permanganate de potasse saturée.
3) Acide nitrique pur.
4) Solution de sulfocyanate de potassium adaptée à la solution de nitrate d'argent.
») Solution saturée à froid d'alun de fer gt d'ammoniac.
Technique.
A. — Plasma.
Verser dans un bécher en pyrex de 150 cc., 1 cc. de plasma exactement mesuré, 10 ce. de la solution de nitrate d'argent, puis, dans l'ordre indiqué et en mélangeant après chaque addition, 1,4 ce. de la solution permanganique et 4 ce. d'acide nitrique. Porter à l’ébullition avec précaution pour éviter toute projection, laisser bouillir jusqu'à ce que le fin précipité formé soit parfaitement blanc. Refroidir, laver les parois du bécher. Ajouter 1/2 cc. de la solution d'alun, puis goutte à goutte jusqu'à virage la solution de sulfocyanate en utilisant une burette graduée au 1/100 de cc. et munie d’une pointe très effilée.
Le calcul est supprimé grâce aux proportions respectives de réactifs. Cl, expriméen NaCl est de (10 — n) gramme par litre, n étant le nombre de ce. de sulfocyanate utilisé. Pour connaître le résultat en Cl, il suffit de multiplier par 0,607 le chittre de NaCI.
B. — Hématies.
Le dosage se fait dans un bécher de 400 cc ; on prélève { ce. de globules débarrassés de toute trace de plasma, on les verse dans le bécher où de l'eau distillée a été mise au préalable ; on mélange soigneusement pour que l'hémolyse soit complète, on rince la pipette avec de l'eau distillée pour
SF SÛR
la débarrasser complètement de toute trace de globules en versant dans le bécher l’eau de lavage. On ajoute comme précédemment 5 cc. de la solution de nitrate d'argent exactemênt mesurés, puis 5 ce. de permanganate et 2 à 3 ce. d'acide nitrique. Porter à l’ébullition. Dès que le liquide est décoloré, ajouter, goutte à goutte et sans précaution particulière, du permanganate jusqu'à ce que la goutte ajoutée : donne une coloration brune lente à disparaître. Laver de temps en temps les parois. L'ébullition est maintenue jusqu’à ce que le liquide soit incolore et le précipité absolument blanc. Refroidir. Ajouter 1/2 cc. d'alun et titrer avec le sulfocyanate (5—n) sera la teneur de NaCl par litre de globules rouges.
