À) DEFINITIONS

Dans ces conditions les définitions données uu chapitre 2 » . 4 A . 2 précédent doivent être modifiées,

1°) Paramètre

Il n'est plus possible de choisir le diamètre. dont le calcul à partir de la loi de STOKES

suppose que d, est constant et connu. Nous avons donc choisi la constante de Sédimentation, s, dans le milieu de dispersion uti- Lisénle). |

te ot tn he te om om + 2 2

# Dans le cas de particules $phériques d1-do 2 GS =

Pour chaque fraction dont nous connuîtrons la densité d,, cette relation nous permettra de traduire les constantes de sédimentation en diamètres sphériques équivalents qui concrétisent mieux l'ordre de grandeur des particules,

At) + 2°) Inconnue

Le changement de paramètre entraîne les nouvelles définitions suivantes :

- la fonction de répartition est désignée par F(s}j, - F(s)ds représente le pourcentage rondéral des particules de NA ER ï sédimentation comprises entre s et s + ds,

ml ds sera la fonction cumulés de répartition. T1 est à noter que les quantités F(s) €e (5) peuvent aussi bien représenter les poids d'un sue associé aux

-particules de constante s,

B) CONDITIONS OPÆRATOIRES

1°) Choix du milieu de dispersion

Le milieu utilisé doit miintenir l'intégrité morpholosique et chimique des structures et conduire à une suspension de particules bien isolées les unes des autres, condition absolument stricte dans l'analyse granulométrique,

Le problème de la recherche de milieux physiologiques intracellulairesa été étudié notamment pr CHA!BERS (14), LOYRY (57) et KOPAC (50), et dans son application à l'isolement des structures cellulaires par HOGEBOOM (41), ‘'ILBUR et ANDE RSON (101), DALTON (26), HOSTER (44), SCHNLIDER et rTEnrauN (86), ZAJDELA et MORIN (102) ; Les résultats obtenus 5e résument ainsi:

Les solutions salines provoquent toujours une a”grégation massive des structures et souvent leur gonflement,

Les solutions de substinces organidues évitent l'aggrégation mais provoquent un gonflement pouvant aller. jusqu'à la lyse des structures,

Actuellement, le sacchirose seul, à des concentrations supérieures à.0,75 M, préconisé par HOGEBOOM, s'avère cäpable de miintenir l'intégrité des structures et d'éviter leur aggrégation, Mais sa densité et sa viscosité élevées gênent considérablement li sédimentation des microsomes,

Pour mettre au point un milieu de dispersion physiologique évitant les inconvénients des solutions de saccharose nous

avions pensé à utiliser les effets «ntazonistes des ions ; ces

effets se manifestent en effet aussi bien sur les phénomènes de ER rn. ne. ae les phénomènes de précipitation des colloïdes (LOEB RUBINSTEIN (83), LUCKE et Mc CUTCHEON (58), GELTHORN et ANT (35) }. Ces recherches ne nous ont pas donné de résultats satisfaisants, | ;

2°) Appareil

Les centrifugations doivent être effectuées à température constante et voisine de + 1° pour obtenir une sédinmentation sans convection ; cette busse température évite par ailleurs l'autolyse des structures, Les vitesses de rotation doivent être élevées pour permettre l'étude des microsomes dans le saccharose 0,88 M,

Nous avons utilisé le centrifugeur Internationel PR 1, à tenpérature constante et réglable, dont la vitesse maxima ’est de 22,000 t/m ; les tubes, dans lu tête n° 291 utilisée, sont inclinés à 45°,