AGE

la lamelle sur la glycérine et on porte le tout sur une flamme jusqu’à apparition de bulles gazeuses.

La coloration peut être obtenue avec les solutions très étendues de fuchsine de Ziehl, de thionine phéniquée de Nicolle, de bleu de méthylène, de violet de gentiane, de safranine ou d’éosine. Le colorant de choix est le bleu lactique, de conservation indéfinie et d'emploi très facile ; il a l'avantage de fournir des préparations transparentes. Pour le préparer, on dissout à froid 0 gr. 15 de bleu coton (Bleu C#B Poirrier [38]) dans 100 grammes d’acide lactique pur, et on filtre. Une gouttelette placée sur une lame et chauffée jusqu'à production de légères vapeurs colore le contenu cellulaire en bleu foncé et parfois la membrane en teinte plus claire. Le colorant triple de GUÉGUEN [40] nous a aussi rendu de grands services; ce réactif employé comme le bleu lactique, permet de voir les matières grasses colorées en orange vif, lamidon en violet, et le glycogène en brun acajou, le tout tranchant vivement sur le fond bleu du protoplasme.

Cultures cellulaires. — Par la dissociation où par la coloration en masse nous avons observé les formes variées du mycélium et la structure de l’appareil reproducteur ; rien jusqu'à présent ne nous a révélé le véritable aspect du champignon à l’état vivant, les manipulations précédentes ayant disloqué les parties fragiles (chainettes de conidies, etc.) de l’organe fructifère. Pour connaître le champignon avec plus de précision, nous avons pratiqué des cultures en cellule de Vax Tigcnem [89]. Un anneau de verre est fixé sur une lame à l’aide de parafline ou de baume de Canada ; puis on dépose sur cet anneau, à la manière dun couverele débordant, une lamelle mince flambée, où l’on à placé à la face inférieure une très fine gouttelette de Raulin stérilisé. Pour éviter la dessication on met quelques gouttes d’eau dans cette petite chambre