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les leucocytes une influence attirante dont les effets deviennent d'autant plus marqués, que cette influence s'exerce d’une manière constante et prolongée.
Il reste cependant à contrôler expérimentalement si les phagocytes d’un animal, d’un cobaye par exemple, sont capables d’englober et de digérer les microbes qui se cultivent dans la sécrétion salivaire. On peut, à ce point de vue, étudier très facilement les leucocytes de cobaye, en retirant à cet animal un peu d’exsudat péritonéal, dont on a eu soin d'augmenter préalablement le nombre de phagocytes, au moyen d’une injection, pratiquée vingt-quatre heures auparavant, de bouillon peptonisé.
Si Pon mélange un peu de cet exsudat avec de la salive et qu'on transporte la gouttelette ainsi obtenue à l’étuve (température de 35°) en empêchant l'évaporation par l'emploi d’une chambre humide, les phagocytes peuvent exercer leurs fonctions d’englobement et s’emparer des microbes mis en contact avec eux.
Expériences. — Œ) SALIVE HUMAINE. — Les leucocytes de cobaye sont mêlés à de la salive humaine qu'on a ` laissée déposer quelques heures pour en séparer les débris élémentaires ou autres éléments cellulaires. La préparation reste à l’étuve pendant une heure ;. on étend ensuite le liquide sur des lames, on fixe, puis on colore par le procédé d’Ehrlich, c'est-à-dire par l'emploi successif de l'éosine et du bleu de methylene.
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On emploie Peosine en solution hydro-alcoolique :
Mosine B. a eau S eSB 0,50 AEO OX ODA AU IA の か ze à oo. 400 gr.
et le bleu de méthylène en solution aqueuse :
Bleurderméthylènà に in eau 054 3 gr.
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La préparation est mise en présence de chacun des’ colorants pendant quatre à cinq minutes.
On constate à l’examen des préparations que les leucocytes se sont emparés des microbes avec beaucoup d’avidité. On reconnaît que, parmi les espèces microbiennes variées que contient la salive, il n’en est pas une dont on ne trouve quelques représentants dans le protoplasma des leucocytes.
b) Sarve pg copaye. — On recueille une petite quantité de la salive de cet animal et on la mélange à des leucocytes provenant de la cavité péritonéale du même cobaye. On transporte les préparations à l’étuve où elles restent deux heures, et l’on constate, après coloration, qu'au bout de ce temps lenglobement des divers microbes est aussi complet que possible.
Deux faits sont désormais acquis : la salive attire les leucocytes et favorise, par conséquent, lorsqu'une plaie se produit dans la bouche, l’afflux rapide de ces éléments protecteurs. Les leucocytes sont capables de s’emparer avec beaucoup d’énergie des différents microbes présents dans la cavité buccale et de les réduire 4 néant.
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Il reste à constater, de visu, l'activité de l'englobement au niveau d'une plaie produite artificiellement dans la bouche.
Expérience. — On recueille, chez un cobaye, une trace de salive et on en fait des préparations que l'on colore, les unes par le bleu de méthylène, les autres par le Gram. On pratique ensuite, vers la partie médiane de la gencive du maxillaire inférieur, la résection de la muqueuse sur une faible étendue et on gratte ensuite, au moyen d'une curette, la plaie dénudée. Vingt heures plus tard, on trouve que la plaie est recouverte d'un enduit blanchâtre, constitué par des leucocytes =Â presque tous polynucléaires, quelques-uns mononucléaires; on étale ces leucocytes sur lame et on colore.
Dans le protoplasma de ces cellules, on décèle facilement la présence de microbes variés, semblables par leur forme, leurs caractères de coloration, à ceux que l'on rencontre dans les préparations de la salive. Un nombre assez considérable de microbes englobés se colorent moins énergiquement que ceux qui sont restés libres dans le liquide ambiant, c'est là une preuve de la destruction phagocytaire. Certains d'entre eux, contenus dans le protoplasma phagocytaire, absorbent l'éosine au lieu de se teindre par leur colorant naturel, le bleu de méthylène.
Ces réactions colorantes sont du plus haut intérêt et `
doivent nous arrêter un instant.
La perte du pouvoir colorant des bactéries est, comme l'a bien montré M. Metchnikoff, un bon indice de leur
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dégénérescence, c'est là un fait bien connu aujourd'hui, il n'en est pas de même de la propriété qu'ont les bactéries dégénérées, de fixer non plus les couleurs basiques d'aniline comme à l'état normal, mais encore les couleurs acides, l'éosine en particulier, de telle sorte que les cellules qui renferment les granulations acidophiles simulent de véritables leucocytes éosinophiles, et qu'on peut se demander si un grand nombre de cellules éosinophiles ne sont pas autre chose que des leucocytes. phagocytaires contenant dans leur protoplasma des bactéries dégénérées.
M. Metchnikoff, le premier, a vu des vibrions cholériques englobés qui fixaient l'éosine; M. Cantacuzène a observé le même fait pour le vibrio -Metchnikovii; M. Mesnil pour la bactéridie charbonneuse; récemment enfin M. Jules Bordet (1) a fait la même constatation pour un grand nombre de microbes (vibrion cholérique, bacterium coli ,bacille d’ Eberth,de Friedlander,de Loéffler pour le proteus, le streptocoque, etc.), et a montré que
dans les cas où les microbes englobes sont des cocci,
on est frappé de la grande ressemblance que présentent, au bout de quelque temps, les microbes devenus éosinophiles avec les granulations de méme nom.
La salive de l'animal contient des cocci, mais on n'y trouve pas de chainettes streptococciques. Il est facile
d'introduire quelques gouttes d'une culture virulente de
(1) JULES BORDET. Recherches sur la phagocytose. Ann. Institut Pasteur, 1896. :
streptocoques dans la bouche et de voir si l'englobement a lieu. On verse dans la bouche d'un cobaye, porteur
d’une plaie que l'on a eu soin de bien nettoyer, quelques
gouttes d'une culture très active de streptocoque.
Quatre heures plus tard, on râcle légèrement la surface de cette plaie, on y recueille ainsi un exsudat riche en leucocytes, et dans quelques-unes de ces cellules on trouve des chainettes streptococciques analogues à celles qui peuplent la culture.
Le lendemain, la plaie est en pleine voie de cicatrisation et se guérit bientôt sans aucun accident. Les
.mêmes faits de phagocytose et de destruction par les
leucocytes de microbes existant dans la bouche peuvent encore se rencontrer, si l'on introduit dans la gencive d'un animal un corps étranger, une fine écharde de bois par exemple. Il se produit bientôt autour du corps
„étranger une petite quantité de pus formé de leucocytes
dont plusieurs contiennent des bactéries, des cocci, provenant de la salive. |
Dans les leucocytes, les microbes deviennent beaucoup moins colorables, car ils sont partiellement
dégénérés; hors des leucocytes, ils gardent leur aspect
normal.
On peut donc conclure que la résistance des tissus constituant les parois buccales, vis-à-vis des agents microbiens si abondants dans la bouche, est due à l'énergie de la phagocytose, fonction générale. |
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Rôle chimiotactique de la salive filtrée.
Dans les expériences précédentes, nous avons employé la salive telle que nous la trouvons dans la cavité buccale, chargée de microbes et non filtrée; c'est elle, en effet, qui nous intéresse au point de vue clinique, mais on pouvait nous objecter, que cette propriété chimiotactique positive de la salive pourrait bien ne pas être due au liquide salivaire lui-même, mais bien à la présence des bactéries dans ce liquide; c'est en effet ce qui parait résulter de l'expérience suivante :
Nous avons recueilli à jeun, de la salive humaine dans des tubes stérilisés. Une heure après, cette salive fut filtrée au filtre Chamberland. Nous avons pris alors une série de six tubes capillaires dans lesquels nous avons faig pénétrer de la salive filtrée, ces tubes furent fermés à une extrémité ; puis une autre série de six tubes dans lesquels nous avons mis de l'eau physiologique, et enfin six tubes contenant une culture de choléra. Ces trois faisceaux attachés séparément ont été placés dans la cavité péritonéale d'un cobaye et laissés en place dix heures.
En lés retirant, nous avons constaté que les tubes contenant la culture cholérique, présentaient une bourre
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. épaisse de phagocytes; andi que, dans ceux ERE
aucune trace de pénétration des ;phagocytes." ANSE ` APT Oy le RASE G Ra ER ki £ ol on í wt, padre ; z > „a = 347 2 \ od CAS | OZ =. < a es E pf に = L D a TLS T - À + テ : È èh ada SS A ~ K3 #, x. yar dR LE + ESS EASES à G j à + fe va 4 EA Tie ` ` TUE Ms à T: = ay =a ra ^ regres a IE “y PEI te TR > À < \ > oa r
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la salive, les leucocytes avaient RS) mais en si petit nombre, que la propriété chimiotactique l iene de la salive filtrée peut être considérée comme CS aa . = Les tubes contenant l'eau physiologique ne présentaient. T ie