EMPLOI DES RÉACTIFS COLORANTS

a) MATIÈRES COLORANTES ARTIFICIELLES.

Les substances colorantes des composés pectiques teignant en même & temps les Lissus lignifiés, il est nécessaire d'employer les méthodes de 1 double coloration, de façon à avoir une élection différente des deux sortes ss d'éléments. On combinera donc les effets du bleu de Naphiylène R en cris-

1 taux et du vert acide JÉEE (Poirier).

re . Le colorant se prépare en dissolvant des poids égaux de ces deux subs- 1ÈE lances dans l'eau pure (1 gramme de chaque dans 100 grammes d'eau). Ce 4 © - liquide teint en vert les matières azotées, la lignine, la subérine ou la 2 cutine, tandis que les composés pectiques sont colorés en violet. Les colo- Du ralions de la lignine sont surtout très belles si on a soin de traiter au préa-

40 lable les tissus par une solution de potasse ou par l'eau de Javel, et de

‘00 laver ensuite soigneusement à l'eau.

E Il ne faut pas oublier, en effet, qu'on ne doit opérer qu'en bain neutre. Si le milieu est alealin, on risque de précipiter les matières colorantes employées sous forme de sels à base faible (la base étant la matière colorante) ;

œ 8 si le milieu est acide, comme l'affinité du colorant est faible, pour les com- 30 posés pectiques, il sera facilement déplacé de sa combinaison et les coupes “2 se décolorent, | 1 à = On plongera donc les objets à étudier dans un liquide neutre ou très faiblement acidifié par les acides faibles (acide acétique à 1/2 ou au plus 1 0/0) ;

ou ep encore, on lave les coupes dans l'acide acétique à 3 0/0, et on les passe à l'eau, avant d'ajouter la solution aqueuse du colorant. Ë De même, après coloration, les préparations ne peuvent pas être montées x dans les liquides d'inclusion ordinaires, comme le baume, ni traitées par l'alcool ou la glycérine, sous peine d'être décolorées. Seul, l'acide borique ne les allère pas, et employé à ? 0/0 il permettra de conserver les préparations durant des mois entiers.

Les coupes montées dans ce milieu seront alors lutées, pour empêcher - l'évaporation, avec un mélange de vaseline et de paraffine, qui s'étend facilement au pinceau.

Le rouge neutre de Cassella, préconisé aussi par MANGIN, peut même être préféré au bleu de naphtylène dans cette double coloration. Il a sur lui l'avantage d'être très soluble dans l'eau, et de ne pas précipiter ou cristalliser dans les préparations. Il colore les composés pectiques et les mucilages coagulés en jaune orangé et se mélange sans précipilation avec les verts acides. Il est soluble dans l'alcool, la glycérine, les acides qui décolorent les coupes, et il est précipité par les alcalis.

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b) RÉACTIFS MINÉRAUX. — Rouge de ruthénium [MANGIiN]. (Réactif de choix)

Le rouge de ruthénium a l'avantage de ne pas être soluble dans l'alcool. Il exige donc moins de précaution que l'emploi des couleurs d'aniline et donne des préparations d'une conservation à peu près indéfinie.

On l'emploie en solution aqueuse. Il suffit pour cela d'en placer, dans 10 à 15 cc d'eau, quelques cristaux formant le volume d'un grain de millet. La dissolution est très rapide et le liquide prend une belle teinte rose.

Comme la lumière le réduit à la longue, en précipitant probablement du sesquioxyde de ruthénium brun ou noir, il est nécessaire de le conserver dans un flacon en verre noir. Il est même bon de n'en préparer que de petites quantités et de le renouveler dès qu'on y voit apparaitre un précipité noir.

Pour colorer les tissus avec ce réactif, il suffit de les plonger dans une goutte ou deux de la solution: l'absorption de la matière colorante par la membrane est si énergique que le liquide perd une partie de sa coloration.

Les tissus sont lavés à l’eau et les préparations peuvent être conservées dans la glycérine aqueuse ou dans la gélatine glycérinée. On peut même, sans inconvénient, les monter dans le baume du Canada, après déshydratation par l'alcool.

Toutefois, comme les acides décolorent très rapidement les préparations, il ne faut jamais employer le chloroforme comme dissolvant du baume.