D. — CARACTÉRISATION CHIMIQUE DES MUCOPROTÉIDES
Dans tous les cas où le tissu typiquement muqueux, d’après l'examen histologique, pouvait être obtenu en quantité suffisante, on a extrait le mucoïde; ensuite on a cherché à le caractériser en séparant et en isolant le radical hydrocarboné, c’est-à-dire l’acide chondroïtine ou mucoïtine sulfurique. De toute manière la substance mucoïde existe en très petite quantité malgré les apparences histologiques et on n’a jamais eu les quantités suffisantes pour pousser l’analyse jusqu’à la complète caractérisation de chacun des quatre éléments du groupe prosthétique hydrocarboné, en particulier l’amino-hexose, dont la connaissance est nécessaire pour distinguer l’acide chondroïtine — de l'acide mucoïtine — sulfurique.
Dans chaque cas nous décrirons les détails particuliers des techniques en même temps que les résultats de l'étude chimique; on indiquera seulement ici les grandes lignes des méthodes employées.
1e Hématéine de ol A en a 0002:
Glycérine. . . D 01: 0. AUIPTATOMIES.
Eau distillée. . . . . . . 60 centimètres cubes. Chlorure aluminium sec ane 0 0 D PE
2. Solution aqueuse de bleu céleste. Colorer 24 heures. Laver à l’eau ou à l’alcool dilué jusqu’à ce qu’il n’y ait plus que le tissu muqueux ou cartilagineux qui soit coloré en
bleu violet.
La solution de bleu céleste ne se conserve pas plus de quelques jours.
20 H. GARRAULT. — ÉTUDE HISTOCHIMIQUE
Pour l'étude des différents mucoïdes, on s’est inspiré des méthodes utilisées par différents auteurs!; elles ont été, d’une manière générale, adaptées et combinées selon le cas.
1° Séparalion du mucoide.
Plutôt que de chercher, comme Levene et Laforge (1913), à isoler le radical hydrocarboné directement à partir du tissu en utilisant l’une des techniques appliquées par Levene à l'étude du cartilage, il y avait intérêt à isoler, dans tous les cas, la substance mucoïde elle-même afin de se rendre compte de ses propriétés.
On a utilisé la méthode très générale d'extraction par l’eau de chaux à demi-saturation. Cette extraction est faite à la température ordinaire, ou mieux, à la glacière, en faisant macérer le tissu préalablement broyé, dans l’eau de chaux, pendant un jour ou deux, en agitant fréquemment. La masse de tissu se gonfle assez fortement, on jette le tout sur une large passoire fine; cette filtration grossière permet de reprendre le résidu par une nouvelle quantité d’eau de chaux. Quand ce résidu semble complètement épuisé, les différents liquides d'extraction, généralement filants et visqueux, sont réunis et centrifugés dans un appareil à écoulement continu?. Le liquide clair est recueilli dans un grand vase et acidifié par l’acide acétique, jusqu’à ce que toute la substance muqueuse se précipite. Le précipité présente suivant les cas des aspects différents, floconneux ou filamenteux, plus ou moins visqueux et adhérent aux parois du vase ou à l’agitateur.
Le mucoïde ainsi obtenu était toujours purifié par redissolution dans l’eau de chaux demi-saturée et soumis à une nouvelle précipitation acétique. Le précipité final était ensuite lavé, puis déshydraté à l'alcool, enfin filtré sur papier dans un entonnoir de Büchner, lavé à l’éther et séché. On obtenait de cette manière, après pulvérisation, une poudre plus ou moins blanche.
29 Séparation du radical hydrocar boné.
On a vu précédemment que la soude, ou mieux, la potasse en
solution diluée et à la température ordinaire, détermine une pre-