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He NDS sion de 757, des températures qui de l’un à l’autre ont varié entre 99° et 99°2.

Ce point connu, nous avons étudié la marche de la température dans les différentes parties du liquide, pendant le chauffage. Le bec Bunsen se trouvant placé sous la marmite qui servait aux expériences, nous mavons pas observé de variation de température suivant qu'on s’est plus ou moins éloigné des bords, à condition toutefois que le thermomètre ne touche pas la paroi du vase. Mais, suivant les différentes hauteurs, nous avons remarqué, fait très connu, que la température au début montait plus vite à la partie supérieure du liquide et moins vite à la partie inférieure qu'à la partie moyenne. Cependant l'écart, qui vers 30° à 40° est de près de 10° se comble vite et à partir de 55° à 60° les trois thermomètres marquent sensiblement la même température.

Nous avons étudié ensuite la courbe comparative de la température du liquide chauffé dans le vase et d’un liquide contenu dans un tube et plongé dans le premier, et, employant dans le bain-marie ou dans le tube immergé soit de l’eau distillée, soit du lait, soit du bouillon de culture dont les températures d’ébul- Htion sont à peu près identiques, nous avons observé les faits suivants :

1° Dans le tube mis au bain marie la température au début monte moins vite que dans le liquide qui l’environne au même niveau; mais la différence de température, très sensible au début du chauffage, diminue de plus en plus et aux environs de l’ébullition elle n’est plus que de 1° au maximum.

2° Cette courbe de la température dans le tube est soumise quant au niveau auquel le tube est plongé aux mêmes variations que dans le liquide du bainmarie ; la température d'abord plus élevée dans le tube placé à la partie supérieure se laisse rejoindre par l’autre dès 60°.

3° 51 on cesse de chauffer au moment de l’ébullition, la température du liquide du bain-marie baisse immédiatement; dans le tube immergé, la température continue à monter pendant 1 minute environ jusqu’à atteindre à 0°2 près la température maxima obtenue dans le bain-marie; elle baisse ensuite.

4 Si on prolonge l'ébullition, la température du liquide du bain-marie restant constante, le thermomètre placé dans le tube continue à monter, et en moins d'une minute il atteint le même niveau que celui qu'indique le thermomètre placé dans le bainmarie, puis reste à son tour constant.

o° Pendant le refroidissement, la température commence à baisser d’abord dans le bain-marie, puis dans le liquide immergé dans la partie supérieure et enfin dans le liquide plongé dans la partie profonde; mais ces trois phénomènes se suivent à une minute d’intervalle à peine. La différence qui est au début de un demi degré au maximum est vite comblée et les. courbes de refroidissement sont ensuite exactement superposables.

Ces expériences préalables ont été faites avec beaucoup de soin surtout celles qui concernent l'emploi simultané du lait dans le bain-marie et dans le tube immergé. Elles nous autorisaient donc à employer le

22 AUS MARAIS Ex Ne PAG Ne à procédé indiqué plus haut, sans crainte de s exposer à des causes d'erreur appréciables. Le lait placé au bainmarie subissait, à peu de chose près, les mêmes influences caloriques que s'il avait été directement chauffé.

S2. Technique des expériences.

Le lait employé dans nos expériences est du lait du commerce que nous achetions au fur et à mesure des besoins, au premier laitier venu. Nous n’avons pas cherché à être fixé sur sa réaction, mais nous n’avons jamais vu ni qu'il fit des grumeaux pendantle chauffage, ni qu’il se coagulât. Au cours du chauffage nous n'avons cherché ni à agiter dans le bain-marie, ni à éviter la formation d’écume ou d'une pellicule à la surface. Ce sont des précautions qu’on ne prend pas dans la pratique journalière et c’est à ce point de vue que nous nous plaçons.

Voici la façon dont nous opérions : Le lait qui devait recevoir les bacilles était stérilisé d'avance comme si on l'avait préparé pour cultiver l'Æberth ou le coli (110°-115°). Les bacilles tuberculeux prélevés sur des cultures solides (pomme de terre glycérinée) sont triturés soigneusement dans un mortier bien flambé et réduits en une pâte bien homogène, puis mélangés au lait à la dose de un pour cinquante environ (des pesées préalables nous avaient permis de nous renseigner à ce sujet). Pour les bacilles pris dans des lésions tuberculeuses de vaches, la tritu-

Mer ration du caséum employé était aussi soigneusement faite, le mélange établi à forte dose, puis le tout passé à travers un linge fin stérilisé, pour éviter les grumeaux. Les cultures liquides (cultures homogènes) étaient chauftées telles quelles dans le tube immergé sans être mélangées au lait. Le mélange fait, on l’introduit dans un tube stérilisé à l’aide d’une pipette, en évitant que le liquide ne vint souiller les parois du tube au-dessus de la partie qui devait être occupée par lui. Puis on bouche au coton et on plonge le tout au milieu du liquide suffisamment pour que le tube, sans toucher le fond du vase, ait la partie supérieure de son contenu, inférieur de un centimètre environ au niveau du liquide du bain-marie (à cause de l’évaporation pendant le chauffage). La quantité du lait du bain-marie est de un litre à un litre et demi environ.

Puis on chauffe le tout jusqu’à l’ébullition (nous considérons comme ébullition non pas le simple soulèvement de la croûte du lait, mais ce fait que le lait donne sous la croûte rompue de gros bouillons). Cette ébullition demande un temps qui, suivant les expériences, varie de neuf à douze minutes. C’est du reste le temps pris ordinairement dans les ménages. La source de chaleur est alors retirée et on laisse refroidir jusqu'à 45° environ, température à laquelle on retire les tubes. Ce refroidissement demande une heure en moyenne.

Même procédé quand on veut atteindre 70°, 80° ou 90° seulement. Si on veut 6btenir l’ébullition prolongée, arrivé à 95°, on baisse un peu la flamme pour

LRQ AE ne pas avoir une ébullition trop tumultueuse que le couvercle du bouille-lait lui-même ne saurait maintenir; on continue l’ébullition un temps plus ou moins long, puis on laisse refroidir.

Le refroidissement opéré, reste la vérification de la stérilisation. Dans toutes nos expériences d’ébullition simple ou de chauffage à 70°, 80° ou 90°, sauf pour les cas où nous employons des bacilles provenant de lésions naturelles, nous avons fait l’ensemencement du fond du tube sur milieu identique à celui d’où provenait la culture elle-même. L'ensemencement n’a pas. été fait pour les cas où l’ébullition a été prolongée.

Quant à l’inoculation, Voici comment nous avons procédé :

Dans la plupart des expériences d’ébullition simple et dans tous les cas de chauffage à des températures inférieures à 100°, inoculation sous-cutanée de 2 cc. du mélange à 1/50 de lait et de bacilles sous la peau de deux lapins, de 1 ce. au cobaye. Pour les autres, même voie d'introduction, mais le cobaye seul est employé, car le lapin ne donne pas de résultats positifs. Enfin, dans les cas d’ébullition prolongée, on emploie exclusivement le cobaye, mais troisanimaux reçoivent 2 cc. du mélange à 1/50 dans le péritoine et deux la même quantité, sous la peau.

Dans les cas où nous avons utilisé les bacilles provenant de lésions naturelles, l’inoculation des bacilles non chauffés à des animaux témoins nous a montré, dans tous les cas, leur virulence très nette.

Enfin, dans le choix des cultures, nous avons employé tantôt les cultures de tuberculose bovine, tantôt

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les cultures de tuberculose humaine, mais les pre-

mières de préférence.

Les animaux qui survivaient après un mois et demi d'inoculation, étaient sacrifiés. Nous allons voir maintenant les résultats des expériences.