CHAPITRE IV
Application de la méthode de Soxhlet à la destruction du bacille de Koch dans le lait.
La constatation des résultats obtenus dans les expériences précédemment exposées nous a amené à étudier la valeur de la méthode de Soxhlet comme procédé de destruction du bacille de Koch dans le lait ; nous nous sommes demandé si cette méthode, qui s’est acquis ces dernières années les suffrages presque unanimes, présentait les garanties nécessaires au point de vue de la prophylaxie de la tuberculose.
M. le professeur Weill a bien voulu mettre à notre disposition les appareils du système Soxhlet employés dans son service hospitalier pour la stérilisation du lait des nourrissons ; nous avons pu nous rapprocher ainsi autant que possible des conditions pratiques. Cependant, cette fois encore, le lait artificiellement tuberculisé a été notre seule ressource et nous avons employé des bacilles empruntés soit à des cultures sur pomme de terre, soit à des cultures en bouillon.
Trois échantillons de tuberculose sur milieu solide ont été mélangés chacun, à la dose de I gr. environ, à 50 ce. du même lait qui doit être distribué après stérilisation aux nourrissons de la crèche. Les bacilles, comme précédemment, ontété triturés soigneusement, réduits en une pâte qui a été délayée ensuite dans le
MP lait. Une partie de ce lait est distraite pour être injectée à la dose de 2 cc. par animal dans le péritoine de deux cobayes qui serviront d'animaux témoins. Le reste, placé dans les flacons qui servent d’ordinaire à la traite du lait est soumis aux manœuvres habituelles du soxhletage dans le service même de M. Weill où la stérilisation est faite par le personnel ordinaire. L'eau du bain-marie est portée à l’ébullition, maintenue à cette température pendant 45 minutes, puis on laisse refroidir. Après refroidissement, le lait est réduit au quart de son volume environ par centrifugation et décantation et les 10 cc. du fond sont inoculés à la dose de 3 cc. par animal dans le péritoine de 3 cobayes par expérience.
Pour les essais de stérilisation de tuberculose en milieu liquide, on fait un mélange par parties égales de lait et de bouillon de culture. On traite de la même façon, avec cette seule différence que l’inoculation est faite non pas dans le péritoine du cobaye, mais dans la veine marginale de l'oreille du lapin, à la dose de 3 cc. également. Deux animaux témoins reçoivent 2 ce. du mélange non chauffé.
Nous avons voulu nous renseigner sur la marche de la température dans les flacons de lait traités par la méthode de Soxhlet. M. le professeur Weill, qui a fait des recherehes à ce sujet, a pu nous donner des détails précis. Pendant toute la durée de l’ébullition
(45 minutes) la température du lait se maintient aux |
environs de 98°, ce qui est très près du point d’ébullition du lait.
À la suite des inoculations, 5 cobayes sur 15 meurent dans les 8 jours, d'infection ; 1 seul lapin sur 10. Les autres survivent et sont sacrifiés, les cobayes 28 jours, les lapins 26 jours après l’inoculation.
Nous allons donner maintenant des résultats des autopsies. |
1° Cobayes inoculés avec des bacilles provenant de cultures sur pomme de terre,
EXPÉRIENCE 35. — Tub. humaine 8, de 5 mois.
Cobaye 1. Amaigrissement léger. Lésions généralisées ; tubercules de l’épiploon, du mesentère, du péritoine diaphragmatique. Petits tubercules de la rate. Ganglions mésentériques et trachéobronchiques. Rien au poumon ni au foie.
Cob. 2. L'animal à pris 50 grammes. Pourtant il présente des lésions nettes, identiques aux précédentes ; de plus, petit tubercule pulmonaire.
Cob. 3. Léger amaigrissement. Mêmes lésions de l’épiploon, du mésertère et du péritoine diaphragmatique. Grosse rate avec deux petits tubercules. Lésions ganglionnaires (mésentériques et trachéobronchiques). Rien au poumon. Foie un peu pâle.
Un des cobayes témoins est mort d'infection au 6e jour. L'autre présente une tuberculose énorme (péritoine, rate, ganglions) beaucoup plus marquée que chez les animaux précédents. Rien au poumon. Peu d'amaigrissement.
Exp. 86. — Tub. bovine 1, 3 mois.
Cobaye 1. Mort d'infection au 7 jour.
Cob. 2. Léger amaigrissement. Tubercules de lépiploon, du mésentère, du péritoine diaphragmatique, de la rate. Ganglions mésentériques et trachéobronchiques- Rien au poumon, rien au foie.