MAG

Si nous possédons des milieux dont lle pH a été déterminé exactement par le procédé électrométrique, si l'on y ajoute une quantité déterminée d’un indicateur coloré, nous obtiendrons une coloration spéciale’ comprise dans la zone utile de cet indicateur. Si à un même volume d’un milieu à pH inconnu, nous ajoutons la même dose du même indicateur, et que nous obtenions une coloration identique à celle du témoin, nous pouvons dire que ces deux milieux ont le même pH.

Il faut mesurer exactement à Ja pipette 5 ec. (ou moins si la quantité dont on dispose ne le permet pas) dans plusieurs tubes (8). à essai de même grosseur, et, si possible, de même verre que les tubes de l'échelle qui servira de comparaison.

À chacun de tubes contenant 5 cc. on ajoute 5 gouttes de l’indicateur choisi, c'est-à-dire une goutte par AE

Dans cette recherche, deux cas sont à envisager

1° Le milieu est incolore. — Il n’y a qu'à essayer divers inducateurs. Certains seront en dehors, mais il en restera toujours un qui amènera une teinte pouvant se comparer et s'identifier avec celle de l'échelle colorimétrique.

2° Le milieu est coloré. — Ce qui est le cas de presque tous les milieux biologiques : la marche est identique, mais on utilise un petit appareil (bloc de bois percé de 4 trous et d'une rangée de fenêtres) permettant de tenir comple par superposition des teintes, de la couleur du milieu étudié.

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On dispose les tubes ainsi

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En essayant divers tubes de l'échelle colorimétrique convenable, on arrive très facilement à obtenir une nuance identique dans les deux séries de tubes. Le pH étalon est alors le même que le pH recherché.

Un procédé de mesure de pH par colorimétrie à été indiqué par MM. A. Baird Hastings et Julius Sendroy.

Ce procédé n’exige ni solution tampon, ni verrerie spéciale en verre neutre. L'eau distillée ordinaire suffit. Ce sont là ses principaux avantages. Il donne le pH à 0,02 près.

Je n'ai pas employé ce procédé qui, ne présente sur le procédé ordinaire que les avantages que j'ai mentionnés. Au point de vuëé de sa précision il ne diffère

LENY EN

pas de tous les autres procédés colorimétriques, c’està-dire, qu'il peut rendre de grands services pour des approximations plus où moins approchées. Le seul moyen exact de détermination du pH est le procédé électrométrique.

Voici à titre documentaire les grandes lignes du travail de MM. A. Baird Hastings et Julius Sendroy.

Il a pour objet :

1° Choisir la méthode de détermination du pH sans standards tampons et son application à la détermination du pH du sang.

2° Une comparaison de la détermination du pH du sang par la méthode colorimétrique et la méthode électrométrique à la température du, corps.

3° Facteurs de correction de Cullen pour convertir la valeur du pH à 20° colorimétrique, en pH électrométrique à 38°.

Bjerrum introduit le premier le principe bicolore pour déterminer le pH en.employant deux tubes qui contiennent l’un un indicateur en solution acide, l’autre, le même indicateur en solution alcaline. Par examen à travers, 1l observe des mélanges de couteurs, égaux à ceux des solutions usuelles.

Myers à employé ce principe. | Gillespie montre que la série des indicateurs de Clark et .Lubs peuvent être combinés avec les deux tubes acide et alcalin, et que le pH est donné par la

formule :

alcalin

acide

pH = pK + log.

es

Michaelis a utilisé ce principe avec la série d'’indicateurs monocolorés nitrophénols et phénolsulfophtaléine.

Le rouge de phénol peut être utilisé pour cette méthode et permet d'évaluer le pH à 0,02 près.

MÉTHODE Préparation des standards

Phénolsulfphtaléine (rouge de phénol) de concentration connue.

Dilution alcaline ,0,01 N Na OH

— acide 0,0001 N HCL

Micro burette. |

Nombre suffisant de tubes de verre clairs de même diamètre intérieur, et un bloc de bois de trois trous de diamètre convenables.

Solution de rouge de phénol 0,1 %

: Quand on veut préparer les solutions, 15 cc. de la solution à 0,1 % est dilué dans 200 cc., ce qui donne une solution. à 0,075 %

Dans chaque paire de tubes le total de cette solution .est 2,5 €. c. Le volume total de la solution dans chaque tube est 25 c. c.

La table I montre les apports de la solution à 0,0075 qui doivent être ajoutés aux tubes alcalins et acides respectivement, pour donner la coloration correspondant à-un certain pH.