CHAPITRE PREMIER

Recherches antérieures sur les troubles toxiques et les effets physiologiques de l’hémoglobine

administrée en solution par voie parentérale.

C’est Paul Bert le premier qui, en 1868, pensant que le sang devait son activité physiologique à l’hémoglobine essaya d'utiliser ce pigment comme succédané de ce tissu. Il préparait sa solution d’hémoglobine en lysant des globules rouges sous l'influence du froid. Il obtenait ainsi des cristaux « d’hémato-cristalline » qui, se redissolvant à la température ordinaire, donnaient un liquide d’une belle coloration rouge. Ce liquide, après plusieurs cristallisations effectuées dans les mêmes conditions, était finalement injecté à un animal rendu exsangue. Les résultats obtenus par cet auteur ne furent guère encourageants; de son avis même l’animal mourait encore plus rapidement que sil n'avait subi aucune injection. Il abandonna son expérimentation.

Sellards et Minot, en 1916, après avoir réalisé de nombreuses fois et sans incident des injections intraveineuses d’hémoglobine chez l’animal, essayèrent chez l’homme. Ils hémolysèrent des globules rouges de sang humain dans de l’eau distillée, obtenant ainsi une solution d’hémoglobine

qu'ils rendirent isotonique, par apport d’un fort excès de Ci Na. Les doses injectées étaient excessivement faibles de l'ordre de 1 à 33 cc. de globules rouges. Ils constatèrent une hémoglobinurie dans un certain nombre de cas.

Couvreur et Clément, en 1919, reprenant les expériences de Paul Bert chez le lapin montrèrent que dans tous les cas où une solution d’hémoglobine était injectée dans la circulation de ces animaux on obtenait des symptômes rapides et mortels d'intoxication aiguë. Ils concluèrent alors que l’hémoglobine, même à très faible dose, est éminemment toxique.

Taylor, Manwell, Robscheit-Robbins et Whipple, en 1930 et dans les années qui suivirent, injectèrent par voie intraveineuse des hémoglobines hétérogènes au chien en état d’anémie expérimentale à faibles doses et quotidiennement. Ils constatèrent que ces animaux conservent cette hémoglobine et même sont capables de l'utiliser pour reconstruire leur propre hémoglobine. La régénération est encore plus rapide après usage d’homohémoglobine.

Puis s’accumula un nonmibre considérable de travaux sur cette question. Certains auteurs, tels que Barkroft, Drabking, Hoessler. Lichty, Havill, Whypple, Minatoya, Manwell, Newman, Webster, Engel, Lang, Amberson, Yoshu Fukuda, Oliver cherchèrent à déterminer : le seuil d’élimination rénale de ce pigment, que ce fut pour des homohémoglobines ou des hétérohémoglobines, l'influence de la diurèse sur cette élimination, la nature sous laquelle l’hémoglobine est rejetée, les facteurs qui influencent son excrétion tels qu'injections répétées, pH, etc.

Kun Sribhisthag, Hawkins, Whipple, Mann, Sheard, Boliman, Bordes étuüdièrent les produits de la dégradation biologique de l’hémoglobine exogène dans l'organisme, sa transformation en pigments biliaires, en urobiline, en méthémoglobine.

j° . à Beaucoup d’auteurs mentionnèrent des accidents souvent

mortels observés après injection intraveineuse de solution

RTE Vas

d’hémoglobine, mais ils ne firent que les signaler sans y attacher grosse importance. Seul Matsumara en fit une étude détaillée, disant que l’hémoglobine est très toxique et entraîne surtout des altérations des organes du système digestif. Nous aurons d’ailleurs à revenir ultérieurement sur ce point.

D’autres auteurs, enfin, tels que Carthy, Forbes, Roche, Lévy, Mignon, Netter, Duce, Kenedy et Whipple se plaçant à un point de vue physiologique établirent les courbes de dissociation de l’oxygène et étudièrent le pH et le point. isoionique et les propriétés de l’hémoglobine musculaire et de l’hémoglobine globulaire.

Mais dans la plupart des travaux ci-dessus rapportés, les modes de préparation et de purification, les quantités d’hémoglobine injectées, la tonicité des solutions varièrent dans des limites considérables, si bien qu’il est assez difficile de comparer les résultats entre eux. Nombreuses sont d’ailleurs les divergences de vue entre les différents chercheurs. D'autre part, et c’est un fait sur lequel il faut attirer l’attention, la plupart des auteurs antérieurement cités n’injectèrent qu’une quantité souvent très faible d’hémoglobine, soit en une seule injection, soit en injections quotidiennement répétées.

Delaunay, dans son travail : À la recherche d'un liquide biologique pour le traitement des hémorragies graves, a posé le problème sous un autre jour. Il montra combien les bienfaits de la transfusion sanguine sont importants et hors de doute, maïs il se demanda aussi, s’il ne serait pas possible de remplacer ce sang par un autre liquide, plus ou moins synthétique. D’après cet auteur, les conditions que ce sérum devrait remplir sont les suivantes :

1° Ne présenter aucune toxicité.

2° Assurer la réplétion du système vasculaire, c’est-à-dire rétablir la masse liquidienne en circulation et relever la pression artérielle à son niveau habituel.

3° Assurer l'alimentation et l’épuration des éléments

anatomiques, et tout particulièrement le transit de l’oxygène et de l’acide carbonique.

4° Faciliter la réformation des constituants du sang, du plasma et des éléments figurés.

Oré, en 1868, avait déjà montré que le bienfait des transfusions ne pouvait être rapporté principalement au plasma injecté; et s’il est vrai que l’administration de sérum physiologique exerce un heureux effet dans les cas d’hémorragies graves mais non mortelles. Delaunay montra en réalité que l’action thérapeutique est encore plus manifeste lorsqu’on introduit par exemple dans le liquide de Ringer-Locke une proportion convenable de gomme arabique, ce qui assure «une réplétion du système vasculaire, rétablit la masse sanguine en circulation, relève la pression osmotique, empêche la fuite des solutions minérales dans les liquides intercellulaires ». Cependant, un tel liquide est incapable d'assurer un transport important d'oxygène. Aussi le même auteur essaya-t-il l'injection d’hématies hétérogènes mises en solution dans un sérum artificiel. Les résultats furent inconstants, du fait sans doute de l'apparition de ces corps étrangers dans la circulation. Delaunay se demanda alors «s’il ne serait pas possible d'améliorer les sérums minéraux par addition d’hémoglobine à dose convenable ».

Amberson et ses collaborateurs, en 1932, étudièrent ce problème dans toute son ampleur. ls constatèrent que des glandes perfusées avec du liquide de Ringer hémoglobiné fonctionnent dans de bien meilleures conditions qu'avec du liquide de Ringer seul, sans doute parce que cette solution d’hémoglobine est capable de maintenir à sa valeur la pression osmotique colloïdale et de transporter l’oxygène. Ces auteurs étudièrent alors le comportement d'animaux, dont on remplace le sang circulant par un tel liquide.

Is préparèrent, à partir d’hématies de bœuf, des solutions d’hémoglobine, auxquelles ils donnèrent une composition minérale conforme à des données établies déjà en 1898 par Abderhalden. Ils perfusèrent aveé de telles solu-

tions le système vasculaire de différents animaux, en particulier des chats, et remplacèrent intégralement leur Sang par le liquide sus-mentionné. La teneur en hémoglobine des premières solutions qu’ils utilisèrent était voisine de 5 p. 100, ceci afin de tenir compte de la mise en garde de Barkroft, disant que des solutions à pression osmotique très élevée seraient rapidement mortelles. Des animaux traités dans ces conditions conservèrent intégralement leur conscience, mais la durée de la survie fut très faible, de l’ordre de six à sept heures. Avec des concentrations plus élevées, ils constatèrent que la survie était d’autant plus longue que la teneur en hémoglobine était elle-même plus élevée. Le délai de survie maximum fut finalement de trente-six heures.

Les auteurs décrivirent, chez leurs animaux ainsi traités, une action narcotique passagère, un abaissement transitoire de la pression artérielle, une légère élévation du nombre des pulsations cardiaques, une augmentation du rythme respiratoire au moment de la narcose, une forte dyspnée peu avant la mort. La température des animaux a varié peu après l’injection, mais elle décrut au fur et à mesure que la mort approchait. Immédiatement après la période d’assoupissement initial, le comportement du sujet était absolument normal, les animaux ainsi traités étaient capables de voir, d'entendre et de se diriger; ils montraient de la curiosité et de la crainte; ils conservaient leurs habitudes; mais ils n’avaient ni faim, ni soif. Ils avaient tendance au sommeil et peu à peu tombaient dans le coma, dont on pouvait les tirer momentanément par administration d'oxygène.

Cherchant ce que devenait l’hémoglobine dans l’organisme des animaux ainsi traités, les auteurs constatèrent qu’elle disparaissait progressivement de la circulation. Elle est en partie éliminée par les reins. Cependant, même chez les animaux néphrectomisés, on ne retrouve plus en totalité le pigment dans le sang. Barkroft et Konlein, en 1922, ont