OM

Exemple : Une solution de paraglobuline examinée dans le tube de 10 centimètres produit une déviation de lo. 16', soit en fraction décimale Le pouvoir rotatoire de la paraglobuline ot [D] étant — 47o.8 (c'est-à-dire que la solution à 1 o/q ^ considérée sous une épaisseur de 10 centimètres, dévie de 00.478), il suffit de diviser lo.25 par 0.478 = 2.6, pour avoir la quantité en poids de paraglobuline contenue dans 100 ce. de liquide. Le liquide en contient 2.6 «/q.

Fig. 23.

Aréomètre ou pèse-urine.

n. - SERUM DE BŒUF.

13. Couleur, odeur, saveur, alcalinité, densité du sérum de bœuf. — L'odeur musquée du sérum s'exagère quand on y verse une goutte d'acide.

Une bande de papier de tournesol rouge, plongée dans le sérum, bleuit fortement.

Remplissez (au 4/5) de sérum un petit vase cylindrique et plongez-y un petit aréomètre ou pèse-urine, gradué de 1000 à 1060 : le liquide affleure vers le trait 1029.

14. Paraglobuline. — Ancienne méthode de xiréparation. Diluez 10 ce. de sérum de bœuf dans un gobelet avec vingt fois son volume

d'eau distillée ; ajoutez, goutte à goutte, de l'acide acétique au 5'' Les premières gouttes d'acide font apparaître un précipité de paraglobuline ; ajoutez un peu plus d'acide : le précipité se redissout.

Préparation par Mg S 0' {méthode de Denis et Hammarsten) 50 ce. de sérum, sont saturés dans un gobelet avec du sulfate de magnésium en petits cristaux.

Ajoutez d'emblée assez de cristaux, pour que le sulfate occupe dans le fond du gobelet un peu moins de la moitié de la hauteur totale du mélange de sérum et de sulfate. Agitez pendant plusieurs minutes avec une cuiller en corne : ajoutez, s'il y a lieu, par petites portions, de nouvelles quantités de sulfate, tant que le sel se dissout, c'est-à-dire jusqu'à saturation complète.

Jetez le liquide avec le précipité de paraglobuline sur un filtre à plis (diamètre 19 c), en laissant au fond du gobelet les cristaux non dissous de sulfate. La filtration demande plusieurs heures; il est bon de laisser égoutter le précipité sur le filtre pendant un jour ou deux.

Enlevez le filtre de l'entonnoir, ouvrez-le complètement, et étalez-le à plat sur une plaque de verre, le précipité de paraglobuline tourné vers le haut. Pliez le filtre en deux, glissez-le entre plusieurs doubles de papier à filtre, et placez dessus la plaque de verre et un corps médiocrement pesant, faisant office de presse. Au bout d'un quart d'heure, d'une demi heure...., le filtre est suffisamment sec pour que le papier se détache de la paraglobuline, et que le gâteau jaunâtre de paraglobuline puisse être plié sur lui-même en 2, en 4, en 8, et finalement ramassé en une seule masse pâteuse. Une partie de cette pâte est délayée dans un peu d'eau (50 à 100 c. c. dans un gobelet), au moyen d'une baguette de verre; la paraglobuline se redissout complètement, grâce au sulfate de magnésium qui l'imprègne. La solution est filtrée, puis reprécipitée par Mg S 0 ' : cette fois, le précipité est presque incolore.

Recueillez-le, dissolvez-en une partie, pour l'examen au polarimètre (voir n° 12), et, s'il y a lieu, pour répéter quelques-unes des réactions des matières albuminoïdes.

Une autre partie du précipité peut être abandonnée à la dessiccation spontanée sur le filtre, puis recueillie sous forme d'une masse d'un blanc-grisâtre, que l'on réduit facilement en poudre. Placez cette poudre dans un tube, avec l'étiquette : paraglobuline de bœuf -\- Mg S CP.

Pour éliminer Mg SO', il suffirait de soumettre à la dialyse, la pâte détachée du filtre. Au bout de deux à trois jours, la paraglobuline serait recueillie au fond du dialyseur, sous forme de grumeaux insolubles dans l'eau distillée.

17. Albumine. — Le sérum privé de paraglobuline par Mg S 0*, contient l'albumine. Mettez le tiers du liquide de côté pour exécuter

l'expérience de dialyse indiquée au n" II . Les deux tiers restants sont mesurés dans un cylindre gradué, et additionnés de quelques gouttes d'acide acétique non dilué (1 pour "/„ du volume de la solution d'albumine) : l'albumine se précipite. Jetez-la sur un filtre à plis; vous la recueillerez le lendemain ou le surlendemain, sous forme d'une pâte jaunâtre. On peut purifier par redissolution et reprécipitation par Mg 8 0' et ac. acétique ; on peut aussi précipiter la seconde fois, en saturant le liquide de sulfate ammonique. Le précipité séché est recueilli, et conservé dans un tube, avec l'étiquette: albumine -\- Mg iS 0\ ou albumine -f {N H^)^S 0\ suivant le cas.

18. Sels et sucre du sérum. — Faites bouillir dans une capsule 40 ce. d'eau avec 10 ce. d'une solution saturée de NaCl (ou de MgSO'), et deux gouttes d'acide acétique; versez-}^, goutte à goutte, au moyen d'une pipette, 10 c. c. de sérum, en ayant soin d'agiter avec une baguette. Filtrez sur un filtre à plis. Recherchez dans le liquide filtré les :

Chlorures, par le nitrate d'argent; Sulfates, par le chlorure de baryum ;

Phosphates, par l'ammoniaque et le sulfate de magnésium.

La recherche du chlore ne peut évidemment se faire, que si on n'a pas employé NaCi; celle des sulfates, que si on n'a pas employé Mg SO'.

Recherchez le sucre par Na HO et quelques gouttes de Cu SO'; faites bouillir : précipité rouge d'oxyde cuivreux. Voyez plus loin, au chapitre de la digestion, les procédés pour la recherche du sucre.

19. Ferment de la fibrine.— Introduisez dans un petit matras 5 à 10 centimètres cubes de sérum, ou 5 à 10 ce. de sang exprimé d'un caillot. Ajoutez 50 à 100 ce d'alcool, bouchez et mettez de côté. Au bout d'une, ou mieux de plusieurs semaines, vous recueillerez le coagulum sur un petit filtre, le laisserez sécher par évaporation spontanée de l'alcool, et le pilerez dans un mortier avec 5 àlO c c d'eau; filtrez et recueillez le liquide. C'est une solution de ferment, qui sera utilisée dans les expériences de coagulation du fibrinogène. (Voir n"* 22 et 23.)

m. — PLASMA SANGUIN ET COAGULATION DU SANG.