CHAPITRE I

Lorsqu'on examine l'ovaire des Palées à l'époque du frai, ou quelque temps auparavant, on trouve les œufs les plus petits et les plus jeunes enfermés dans le parenchyme des feuillets de l'ovaire. Les plus petits sont imperceptibles à l'œil nu et même à la loupe; ce n’est qu'à l’aide d’un grossissement considérable qu'on parvient à les découvrir dans le tissu de l'ovaire, au milieu des œufs plus développés. Privé de micro— mètre, lorsque j'ai fait ces premières observations , je n'ai pas pu mesurer la grandeur de tous ces œufs; mais il est certain qu'elle varie beaucoup, comme on peut le voir par les six premières figures de PI. 1, qui représentent six œufs, dont le développement n'est pas achevé. Tous ces œufs sont dessinés sous le même grossissement, ensorte qu'ils donnent une idée juste des rapports de leur accroissement.

La membrane vitellaire (g) et le vitellus (b) avec ses granules {d) forment la masse principale de l'œuf.

La membrane vitellaire(g) est tendue , élastique et capable de subir une assez forte pression. Quant aux parties constitutives de son tissu, il m'a été impossible de les reconnaître même

sous le plus fort grossissement ; je l'ai constamment trouvée claire et transparente, sans aucune trace de fibres ni de cellules ; ses bords déchirés ne montraient aucune trace de dentelures ni de fibres. C’est, du reste, le caractère de toutes les membranes cellulaires, et l'on pourrait déjà en conclure de prime abord la nature de la membrane vitellaire.

Le vitellus (b) est clair et transparent comme la membrane vitellaire elle-même, sans aucune trace de coloration. Il se fige dans l’eau et dans l'esprit de vin, et forme une masse grenue d'apparence laiteuse, absolument comme le jaune des œufs développés. J'aurai soin d'indiquer par la suite l'effet que produit sur le vitellus des œufs mürs le contact des différens corps et surtout des liquides. Habituellement on observe des accumulations irrégulières de petits corps opaques et foncés (d) flottant dans} ‘érieur du vitellus. Leur nombre est variable sui- ‘vant les œuis ; cependant il m'a paru s’augmenter à mesure que l'œuf approchait de la maturité. Lorsque l'œuf a atteint un certain volume, ces petits corps remplissent le vitellus à tel point que toutes les autres parties de l'œuf en paraissent recouver- . tes. Je les ai souvent vus groupés en très-grand nombre autour de la vésicule germinative, tandis qu'il n’y en avait que peu dans les autres parties du vitellus (fig. 3 et 4). L’extrème petitesse de ces granules ne m'a pas permis d'en bien examiner la nature; cependant j'ai remarqué, à l’aide de très-forts grossissemens, que les plus grands n'étaient pointsolides, mais qu'ils paraissaient entourés d'un anneau très-foncé, tandis que le milieu était clair (fig. 6). (On sait que les petits globules adipeux et les gouttelettes d'huile les plus petites se présentent sous cette forme au foyer du microscope). Or, comme l'œuf mr renferme, ainsi que nous le verrons plus tard, une quantité de gouttelettes d'huile, il ne me paraît pas douteux que ces gra nules ne soient ces mêmes gouttelettes dans leurs premiers ru-

AVANT LA FÉCONDATION. 3 dimens, de manière que nous aurions ici, dès l'origine de l'œuf, le même phénomène qui, plus tard , excite à un si haut degré l'attention du physiologiste dans le cours du développement de l'embryon ; je veux parler de la confluence de ces gouttelettes d'huile en quelques grandes gouttes, qui, par la suite, ser vent à l'alimentation de l'embryon. Et, en effet, on ne comprendrait pas, sans cela, l'apparition soudaine delgouttelettes d'huile dans l'œuf mûr, puisque, à part ces granules foncés, le vitellus n’est nullement adipeux, mais se rapproche au contraire davantage, par sa manière d'être, des liquides albumineux.

Outre le vitellus, le petit œuf renferme encore deux autres élémens qui, dans ces derniers temps , ont attiré d'une manière particulière l'attention des naturalistes , la vésicule germinative (vesicula Purkinjei) fig. 1-5 (c) avec la tache gernunative ou plutôt les taches germinatives , attendu que , dans l'œuf de la Palée, comme dans celui de tous les poissons osseux, ces ta— ches sont multiples. La vésicule germinative s’est toujours présentée à moi sous la forme d’une vésicule circulaire, limpide et très-délicate, se déchirant généralement avant la membrane vitellaire, lorsque je soumettais l'œuf à une certaine pression ; et sa pellicule est tellement fine , qu'une fois crevée , il m'était impossible de la reconnaitre. Cette vésicule -est rarement placée au milieu de l'œuf; je l'ai trouvée habituellement située sur l'un ou sur l’autre de ses côtés et ordinairement très rapprochée de la face supérieure de la membrane vitellaire : cependant je ne l'ai jamais vue réellement accolée à cette membrane. Je ne la crois donc pas adhérente à cette dernière ; j'attribue bien plutôt sa position supérieure à son poids spécifique, qui, étant plus léger que celui du vitellus, fait qu'elle doit flotter entre ce dernier et la membrane vitellaire !

et gagner le point le plus élevé, dans quelque position que

l'œuf se trouve placé. Or comme, pour bien voir, 1l est néces— saire de serrer un peu l'œuf sous le compresseur, l'on comprend que cette vésicule soit généralement excentrique. Les taches germinatives que contient la vésicule germinative, au nombre de six à douze, sent entourées d'un liquide très-limpide : ce sont en général de petites vésicules transparentes comme la vésicule germinative elle-même, mais de forme moins cireulaire. Je les ai souvent vues comme attachées à la membrane de cette dernière ; d’autres fois, j'ai cru les apercevoir flottant libre ment.

Il est intéressant d'observer l'accroissement du petit œuf. Le vitellus et la membrane vitellaire sont évidemment les parties qui croissent le plus rapidement ; mais la vésicule germinative et les taches germinatives augmentent aussi, quoique dans des proportions moins considérables. On a nié cette croissance de la vésicule germinative; mais elle est si évidente dans l'œuf de la Palée qu'elle ne saurait échapper à l'observateur le plus superficiel. Je regrette de n'avoir pu, faute de micromètre, indiquer les rapports de grandeur entre l'œuf, la vésicule germirative et les taches germinatives dans les différentes phases du développement de l'œuf. Mais, comme les figures de 1-5 sont dessinées sous un même grossissement, et que d’ailleurs j'ai eu plusieurs fois l’occasion de placer plusieurs petits œufs, l’un à côté de l’autre, sous le foyer ,:1l m'a été facile de comparer la grandeur relative des vésicules germinatives et du vitellus ; ensorte que, s'il s'est glissé quelques erreurs dans l'appréciation de leur grandeur relative, elles ne sauraient du moins être que très-insignifiantes. J'ai vu des œufs, dont la vésicule germinative était aussi grande qu'un autre œuf placé à côté (comparez les fig. 3, # et 5 avec la fig. 1); d'où je conclus qu'elle grandit le plus dans les pre-

miéres périodes de l'œuf, mais que cet accroissement se ralentit

à mesure qu'elle atteint une certaine dimension. Le vitellus et les gouttelettes d'huile augmentent au contraire continuellement de volume. Les taches germinatives croissent tout aussi bien que les vésicules germinatives ; mais il est plus difficile de s’en assurer, à cause de leur grande diversité; car l'on rencontre dans des vésicules de même dimension des taches de grandeur très-inégale. Ce qui me fait cependant croire à un accroissement de ces taches, c'est que, dans les plus petits œufs que j'ai examinés (fig. 1), elles ne me sont apparues que comme de très-petits points, visibles seulement sous le plus fort grossissement, tandis que dans la plupart des œufs plus grands, elles étaient d’un diamètre beaucoup plus considérable. D'ailleurs on comprendrait difficilement comment de nom-— breuses taches de la grandeur de celles de fig. # et 5 pourraient avoir place dans une vésicule comme celle de fig. 1.

Le mode d'accroissement de l'œuf primitif dans l'ovaire, tel que venons de l’exposer, me paraît propre à jeter quelque jour sur la manière dont on doit envisager l'œuf en lui-même. M. Schwann dans son ouvrage sur la conformité de structure et de croissance des animaux et des plantes (*), s'est demandé si la vésicule germinative de l'œuf était une jeune cellule se développant librement dans une cellule-mère (l'œuf) et dont la tache germinative serait le noyau ou cytoblaste, ou bien si l'œuf n'était pas plutôt une cellule normale dont le noyau serait formé par la vésicule germinative , qui renfermerait la tache germinative à l’état de nucléolule. Ces deux manières de voir rencontrent de graves difficultés, et Schwann lui-même

n'a pas osé décider la question. On a cru voir une confirmation

(*) Microscopische Untersuchungen über die Ubereinstimmung in der Structur und der Wachsthum der Thiere und Pflanzen , 8°. Berlin, 4859.—Les Annales des sciences naturelles, janvier 4842 , ontreproduit Pextrait que M. J. Müller a

donné de cet ouvrage dans son #rchiv für Anatomie, ete.

de la première de ces opinions dans les observations plus récentes de M. Barry sur le développement de l'œuf du lapin (*), ce naturaliste ayant démontré que, au lieu de crever ou d'être résorbée après la fécondation, la vésicule germinative se remplit de cellules qui deviennent la base de l'embryon futur ; mais il est à remarquer qu’à cette époque, on n’avait encore signalé aucun exemple de cellules se développant dans le noyau. Ce n'est en effet que dans les cellules-mères que peuvent se former de jeunes cellules ; car d’après l'opinion généralement recue , le cytoblaste est envisagé comme un tout complet dont le développement est achevé, et qui » par conséquent , ne peut être assujetti qu’à une résorption, mais qui ne saurait donner lieu à de nouveaux corps dans son intérieur. Je reviendrai plus tard sur la formation et le développement de la cellule animale en général , et je montrerai que l'opinion d’après laquelle les cytoblastes seraient toujours les précurseurs des cellules, n’est nullement fondée dans la nature, mais qu'au contraire le noyau est dans beaucoup de cas une jeune cellule se développant dans la cellule-mère et que le nucléolule lui-même n’est autre chose qu'une cellule de seconde génération formée dans le noyau. En partant de ce point de vue, toutes les difficultés dis paraissent dans l'étude du développement de l'œuf. Voici comment je conçois sa formation : il se forme dans une cavité de l'ovaire une cellule, la vésicule germinative , et dès qu’elle a acquis une certaine taille, on voit se former autour d'elle une seconde cellule, la membrane vitellaire, qui renferme la première ; il se forme en même temps dans l'intérieur de la celluie germinative un nombre considérable de jeunes cellules, les taches germinatives , qui tantôt restent tellement petites et

(*) Researches in Embryology. Philosophical Transactions. 1840, Tome IT,

page 529 el suiv.

groupées ensemble, qu'elles ne forment qu'une seule tache d’apparence grenue, comme c'est le cas chez les animaux vertébrés supérieurs, mais tantôt aussi sont isolées les unes des autres, formant alors ces taches germinatives multiples que l’on observe chez la plupart des animaux sans vertèbres, et dans les vertébrés chez les poissons osseux et les batraciens. Il paraît en effet que M. Rodolphe Wagner (*) a observé ce mode de formation de l'œuf primitif chez un Agrion, où il a trouvé , dans les extrémités effilées de l'ovaire , des vésicules limpides contenant un corpuscule simple, d'apparence solide, et il en a conclu que la vésicule germinative, ainsi que la tache germinative, étaient de formation primitive , et que ce n’était que plus tard que la membrane vitellaire se formait alentour. Cette dernière cellule (la membrane vitellaire), qui renferme la vésicule germinative de formation plus ancienne, se développe avec une rapidité excessive, tandis que la cellule primitive, dans l'attente de la fécondation, ne s'accroît que lentement et paraît de plus en plus petite, relativement à la membrane vitellaire. Ceci nous explique suffisamment la grandeur proportionnellement trèsconsidérable de la vésicule germinative dans les jeunes œufs et son accroissement lent pendant la maturation de l'œuf avant la fécondation. On s'explique également de cette manière l'accroissement des taches germinatives qui n’est en aucune façon approprié au rôle que veut lui faire jouer M. Schwann , soit qu'on les envisage comme des noyaux ou comme des nucléolules de cellules.

Il m'est impossible de dire ce que deviennent par la suite la vésicule et les taches germinatives; car dès que les œufs sont assez grands pour pouvoir être aperçus à la loupe entre les feuilles de l'ovaire, sous la forme de petits points, les granules

(*) Prodromus historiæ generalionis. Fol. Lipsiæ. 1856, Page 9, Fig. 48.

huileux du vitellus occupent tout l'espace de l'œuf, qui perd à peu près sa transparence sous le microscope (fig. 6), et il est impossible de distinguer plus longtemps ces deux organes. En crevant l'œuf, la vésicule germinative se déchire ordinaire ment et les parties albumineuses du vitellus se figent en une masse opaque et grenue qui rend également toute observation impossible.

Quand l'œuf à atteint un diamètre d'environ */; de ligne, il s'échappe des parois de l'ovaire, en les déchirant, et tombe dans la cavité abdominale. Nous reviendrons sur cette sécrétion dans la description anatomique de l'ovaire ; il nous suffit pour le moment de savoir que les œufs, gisant dans la cavité abdominale de la Palée, sont mürs et susceptibles d'être fé condés.

L'intérieur des œufs mürs est de nouveau parfaitement diaphane et laisse apercevoir, à l'œil nu , un liquide transparent, dans lequel se voient de petites gouttelettes jaunes qui donnent aux œufs, lorsqu'ils sont réunis en masse, une teinte jau— nâtre. La surface des œufs est lisse, mais sans aucune trace de cet enduit visqueux qui permet à beaucoup d’autres œufs de poissons de s'attacher aux plantes et aux pierres. L'œuf de la Palée, comme celui de tous les Salmonides, est livré entièrement au gré des vagues.

Le microscope ne montre, dans l'œuf, d’autres parties que celles qui sont visibles à l'œil nu ; on n’aperçoit qu'une seule membrane entourant l’œuf (fig. Tet8 à) ; le vitellus est par— faitement limpide (b) et les gouttelettes d'huile nagent à la surface de ce dernier (e).

La membrane extérieure (a) de l'œuf, qui correspond évidemment à la membrane coquillière de l'œuf des oiseaux , est assez épaisse et élastique, de manière qu'il faut une certaine pression pour faire crever un œuf mür. Si l'on examine cette

membrane sous un fort grossissement, l'œuf élant intact, on trouve qu'elle présente un aspect granuleux très élégant, qui résulte d'une quantité de petites figures annulaires, réunies comme les mailles d'un filet (fig. 7 et 8). Cette réticulation est extrêmement délicate et visible seulement sous un jour favorable ; elle s'étend sur l'œuf entier et même sur les gouttelettes d'huile, de manière qu'elle paraît faire partie intégrante de la membrane externe.

Il est très-difficile, lorsqu'on examine la membrane co— quillière isolée, de reconnaître cette réticulation; on n'en aperçoit que çà et là quelques traces. Mais un phénomène plus remarquable frappe l'observateur , lorsqu'il considère cette membrane sous un fort grossissement : elle a alors l'apparence du chagrin, et cet aspect particulier paraît résulter d'une quantité de petits points opaques, qui sont répartis d’une manière régulière à sa surface. Traités à l’acide muriatique, ces points deviennent plus transparens et ressemblent alors à de petites verrues. M. Valentin m'a fait remarquer combien cette formation ressemblait à celle de la carapace des écrevisses d'eau douce, qu'il a également trouvée composée de membranes , présentant, sous un fort grossissement, des points tout-à-fait semblables (*). Il s'est convaincu , en outre, que, dans l'écrevisse, ces points sont de petits tubes placés verticalement et remplis de calcaire, et que la membrane traversée par ces tu bes est composée de cellules régulièrement polyédriques. Dans l'œuf de la Palée, la membrane coquilliére est trop mince pour qu'il soit possible d'arriver à des résultats précis sur la nature de ces points et de leur contenu calcaire, avec les moyens de grossissement que nous possédons maintenant. Toutefois, leur position , leur manière d’être et leur apparence réliculée doi-

{*) Repertorium für Anatomie und Physiologie. Tom. 1, pag. 122.

vent naturellement faire supposer une structure analogue à celle des tubes de la carapace des écrevisses. Il paraîtrait ainsi que la membrane coquillière est une membrane celluleuse composée, formée de la réunion de cellules aplaties, qui ne se déposent autour de l'œuf primitif que vers l’époque de sa maturité ; la présence de ces petits tubes, qui traversent la membrane, expliquerait suffisamment l'absorption de l’eau dans l'intérieur de la membrane coquillière.

Au premier abord, il semble que la membrane extérieure ou coquillière (a) entoure immédiatement le vitellus (b); cependant , il résulte des modifications que l'œuf subit dans l'eau, que la membrane vitellaire existe aussi ; mais elle est tellement adhérente à la face interne de la membrane coquillière, qu'il est impossible de l'en distinguer si l'œuf n’a pas séjourné un certain temps dans l'eau. Il résulte de cette adhérence que l'œuf de la Palée ne contient aucune trace d'albumen aussi long temps qu'il est encore enfermé dans le ventre de la mère, car, dans ce cas, il devrait se trouver entre la membrane vitellaire et la membrane extérieure.

La membrane vitellaire (g) elle-même est une membrane très-mince et transparente, sans texture apparente ; au moins je n'y ai pas remarqué la moindre trace de cellules ; elle est imperméable pour l’eau, ce que n’est point la membrane co— quillière ; mais elle ne résiste pas aux acides, puisque le vitellus se coagule instantanément lorsqu'on met l'œuf en contact avec un acide. Elle est de plus l’enveloppe primitive de l'œuf, et ce n’est que plus tard que la membrane coquillière s'étend autour d'elle ; aussi avons-nous indiqué dans nos dessins ces deux membranes par des lettres différentes. Je n'ai pas pu observer le moment de la formation de la membrane coquillière dans le Coregonus palæa, mais bien dans un autre poisson de la même famille, le Salmo Umbla. Là, j'ai ren-

contré , à côté d'œufs non mûrs, composés uniquement de la membrane vitellaire , de la vésicule germinative et des taches germinatives , d'autres œufs un peu plus grands, montrant une double membrane, en même temps que les taches et la vésicule germinatives étaient encore visibles. La membrane extérieure, très-peu distante de l'intérieure, était évidemment la membrane coquillière en voie de formation. Les œufs étaient trop petits pour que j'aie pu distinguer si les cellules primitives, dont se forme cette membrane, étaient plus distinctes qu'elles ne le sont par la suite.

Le vitellus proprement dit (b) ressemble, par ses propriétés extérieures, moins au jaune qu'à l’albumen des œufs d'oiseaux. C'est un liquide parfaitement limpide, homogène, visqueux, sans aucune trace de cellules ou d’autres corpuscules, comme il s’en trouve dans le vitellus d'autres animaux. J'insiste d'une manière toute spéciale sur ce point, parce qu'il est d’une importance capitale pour la théorie de la formation de l'embryon, et nous verrons plus tard qu’en aucun cas il ne s'y forme des cellules. Son pouvoir de réfraction est plus fort que celui de l'eau; sa pesanteur spécifique est aussi beaucoup plus considérable, puisque l'œuf, malgré ses parties huileuses, tombe aussitôt au fond du vase. Lorsqu'on crève un œuf dans l'eau, on voit à l'instant même la masse entière du vitellus se transformer en une matière blanchâtre, lactée, opaque et filamenteuse, qui n’a plus aucune ressemblance avec la substance vitellaire de l'œuf intact. Voulant m’assurer si c'était réelle ment l'effet de l'eau, j'ouvris un œuf au foyer du microscope, et jy mélai une goutte d’eau, pendant que j'observais le vitellus : partout où les deux liquides entrèrent en contact, il en résulta à l'instant même une quantité de petits granules opaques , qui furent affectés pendant longtemps d’un mouvement moléculaire très-prononcé. Ces granules étaient si petits

que, sous mon plus fort grossissement , ils ne m'apparurent que comme de petits points foncés et leur nombre considérable me prouva suffisamment que ee n'étaient pas des nueléolules devenus libres par l'effet de l’eau qui auraient fait crever les parois des cellules ; car, en se représentant chacun de ces petits corps enveloppés d'une cellule, il en serait résulté que l'œuf entier aurait eu un volume au moins dix fois aussi grand que le volume réel du vitellus. Cette manière d’être du vitellus vis-à-vis de l’eau est très-importante à connaître , parce qu'elle est la cause principale des modifications que l'œuf subit lorsqu'il se corrompt.

Une autre partie essentielle du vitellus consiste dans les gouttelettes d'huile qui nagent à sa surface (c). L'huile qu'elles contiennent est d’un beau jaune de paille, très-claire, transparente et tachant distinctement le papier: vues au microscope , ces gouttelettes se distinguent de la masse vitellaire proprement dite par leurs bords foncés, tandis que le centre est plus clair, ce qui est une conséquence de leur plus grande réfraction. Cependant, ces bords noirs ne sont pas aussi tranchés dans l'œuf même, que lorsque les gouttelettes nagent librement dans l'eau; car, à raison de leur pesanteur spécifique moins considérable, elles se trouvent refoulées par le vitellus et aplaties par la pression contre la face interne de la membrane vitellaire. Cette pesanteur spécifique moins considérable des gouttelettes est aussi la cause qui fait qu'elles s'accumulent toutes sur un seul point de l'œuf, où elles forment une espèce de disque qui est toujours tourné en haut, aussi longtemps que l'œuf reste dans l’eau, d'où il résulte un inconvénient assez grave pour l'observateur, surtout lorsque plus tard le jaune devient mobile : alors le disque huileux se porte continuellement en haut de quelque manière que l'on tourne l'œuf.

Telles sont les parties de l'œuf que l'on observe avant la

AVANT LA FÉCONDATION. 13 fécondation. Une fois arrivé à 5a maturité, je n'ai plus trouvé en lui aucune trace de la vésicule germinative, quoique l’on ne puisse douter de son existence jusqu'à la fécondation. Il semble en effet résulter des recherches qui ont été faites sur d'autres animaux vertébrés, que la vésicule germinative se maintient au milieu du disque huileux et que les nombreuses taches germinatives qu'elle contient continuent à se développer après la fécondation et représentent ainsi la base cellulaire de l'embryon. J'essaierai de démontrer plus tard, par l'examen des cellules primitives de l'embryon, que ce sont réellementles taches germinatives qui forment la première base de l'être qui se développe dans l’intérieur de l'œuf.

En résumant sous un point de vue général tout ce qui vient d'être dit sur la nature de l’œuf du poisson et les modifications qu'il subit, il en résulte : que l'œuf primitif doit être envisagé comme une cellule, dont l'enveloppe est la membrane vitellaire; celle-ci renferme un contenu liquide, le vitellus, dans lequel sont réparties, comme un dépôt alimentaire, les gouttelettes d'huile. Au milieu du vitellus flotte une autre cellule, la vésicule germinative, et dans celle-ci, une seconde génération de cellules, les taches germinatives. Plus tard, d’autres cellules se développent autour de l'enveloppe vitellaire de l'œuf et forment une membrane continue, d’une structure parti culière, la membrane coquillière , qui par conséquent n’est pas primitive, mais ne peut être envisagée que comme un acces soire de l'enveloppe ou cellule primitive. Des observations ultérieures devront nous apprendre laquelle de ces cellules qui se trouvent ainsi renfermées l’une dans l’autre , est la cellule primitive. D'après les observations de M. R. Wagner, que nous avons citées, ce serait la vésicule germinative, autour de laquelle se forme la cellule vitellaire.