LE NOYAU

Le noyau ne manque dans aucune cellule nerveuse. D'ordinaire, chaque cellule n'en possède qu'un seul. Mais il est des cellules qui en possèdent deux ; tel est le cas pour un grand nombre de corpuscules des ganglions sympathiques chez le lapin, suivant les recherches de Remak, Gaye et Ranvier, de Schwalbe chez le cobaye, et de Mayer chez le chien, le chat * et

1. Vox LENHOssék, Ueber Nervenzellenstrukturen. Verhandl. der analom. Gesellschaft, auf der zehnten Versammlung in Berlin, 19-22, April, 1896.

2. COLELLA, Sulla degenerazione e sulla regenerazione dei ganglii del sistema nervoso simpatico. Giorn. internaz. delle Scienze mediche. Anno XIII, 1891.

3. Tirezur, Dei procesi riparativi nel ganglio intervertebrale. Annal. di Freniatria e Scienze affini, vol. V, 1895, et Arch. ital. de Biologie, t. XXIII, 1895.

4. Monri e Frescni, Sur la guérison des blessures des ganglions du sympathique. Arch. ilal. de Biologie, t. XXIV, fase. 3, 185.

5. Chez le chat, nos observations faites au moyen du bleu de méthylène prouvent cependant qu'il n'y a qu'un noyau par cellule.

rieurs et des invertébrés seulement.

Son rôle dans les cellules nerveuses.

Nombre, forme ct volume.

Parlies conslilulives.

Méthodes de coloration.

l'homme. La /orme du noyau est communément celle d'une sphère. On en rencontre aussi d'ovoides et même de coniques, avec des angles émoussés et ronds, par exemple dans certaines cellules pyramidales. On peut affirmer, en thèse générale, que la forme du noyau dépend de la plus ou moins grande abondance du protoplasma de la cellule. Ainsi, les cellules riches en protoplasma ont un noyau sphérique, tandis que celles où le protoplasma s'étend « en une mince pellicule enveloppante, renferment un noyau de figure plus ou moins polyédrique, avec des arêles mousses, par suite des pressions réciproques entre éléments voisins. C'est ce que l’on observe sur un grand nombre de grains du cervelet et dans certaines bipolaires de la rétine. Le volume du noyau est chose extrêmement variable, à un moindre degré pourtant que celui des cellules elles-mêmes. Il oscille entre 4 ou 5 u dans les grains du cervelet par exemple, et14 et 164 dans les cellules motrices de la moelle, la moyenne étant de 7 à 10 y. |

Structure du noyau. — Par sa structure, le noyau des cellules nerveuses ne diffère guère de celui des élémeñts conjonclifs, épithéliaux ou musculaires. Comme lui, il possède une membrane achromatique, un sue nucléaire lransparent, un réseau pâle, probablement de linine, et un ou deux blocs centraux d’une substance ressemblant à la chromatine de Flemming. Ce qui distingue réellement la structure du noyau nerveux de celle des noyaux ordinaires est dû à la forme et à la disposition de la substance chromatique. En effet, au lieu de présenter l'aspect réticulé, que l’on voit dans les corpuscules épithéliaux, conjonctifs, musculaires, etce., cette M substance est condensée, souvent même en un volumineux grain central, sans trace apparente de structure (nucléine nucléinique de Carnoy et Van Gehuchten). . 4

On peut se rendre un compte déjà très suffisant de la structure du noyau M nerveux sur des préparations obtenues par la méthode de Nissl. Le noyau et les nucléoles chromatiques y apparaissent fortement colorés, tandis que le réseau de linine reste incolore. Mais les renseignements les plus complets M ne sont fournis que par les méthodes de double coloration : toluidine et éry- L throsine de Lenhossék, érythrosine et bleu de méthylène de Held, mélange de Biondi au degré de dilution indiqué par Levi, ete. Dans ces mélanges tinctoriaux, la couleur acide, érythrosine, éosine, fuchsine acide, etc., se porte A avec vigueur sur le réseau achromatique des grains incolores et la membrane : nucléaire, alors que la couleur basique, bleu de toluidine, thionine, bleu de méthylène, etc., imprègne les nucléoles et parfois, mais avec moins d'intensilé, certains grumeaux placés aux entrecroisements du réseau achromatique et formés d'œdématine.

MEMBRANE NUCLÉAIRE. — Pour étudier la membrane du noyau, il faut s'adresser aux élémenis les plus volumineux. On voit alors que la membrane, dont le double contour est très nettement appréciable, est constituée par une substance tout à fait homogène. Par sa face interne, elle donne inserion aux travées du réseau de linine, tandis que par sa face externe elle

donne altache aux travées du spongioplasma cellulaire. Les matières colo-

Mb UF LES EE at LS GRR ÿ » LE C , > \

rantes n'ont aucune prise sur cette membrane, sauf les couleurs acides d’aniline, qui la teignent quelque peu. Flemming a signalé une autre membrane chromatique à l'intérieur de cette membrane incolorable, dans certaines cellules nerveuses. Nous n'avons jamais pu confirmer l'existence de cette seconde membrane, el en cela, nous sommes d'accord avec Levi et Lenhossék. Peut être, Flemming déerit-il comme membrane la réticulation chromatique périphérique que nous avons reconnue dans les grains cérébelleux et les cellules névrogliques, réticulation ayant, en effet, un aspect membraneux.

CHROMATINE DU NOYAU OU NUCLÉINE. — Lorsqu'on étudie la chromatine par la méthode de Nissl, on la voit affecter plusieurs formes, dont les suivantes nous semblent les plus constantes et les plus caractéristiques !.

1° Chromatine réticulée (fig. 62, C).— Cet aspect, qui rappelle complètement celui des cellules épithéliales ou conjonctives, est propre aux noyaux des cellules nerveuses de petite taille, telles que : grains du cervelet, bipolaires rétiniennes, etc. Dans ces noyaux, on découvre, en effet, une substance

Fi. 62. — Divers types de noyaux dans les cellules nerveuses et névrogliques du lapin. Méthode de Nissl, coloration à la thionine. \

À, deux aspects du noyau des cellules névrogliques ; — a, avec mise au point sur la face supérieure du noyau; — b, avec mise au point sur son équateur; — C, noyau d'un grain du cervelet; — D, noyau d'une cellule pyramidale du cerveau; — E, noyau d'une cellule motrice de la moelle.

basophile, répandue sous forme de granules allongés ou ronds sur les travées et les nodosités d’un réseau de linine à mailles étroites. Ce réseau de linine, étendu dans tout le noyau, devient plus dense au-dessous de la membrane nucléaire, au point d'y simuler souvent une enveloppe chromatique. Un ou deux grains de cette substance, placés au centre, sont de plus grande taille que les autres et semblent des nucléoles.

L'aspect de la chromatine des granulations nucléaires varie considérablement suivant les réactifs fixateurs employés. En se servant de l'alcool, notre fixateur préféré, la chromatine se montre nettement réliculée ; use-t-on, au contraire, du sublimé, du liquide de Hermann, etc., la réticulation chromatique fait le plus souvent défaut, ou, si elle persiste, c’est seulement à l'état de vestige attenant à la membrane, tout le reste s'étant aggloméré en un amas central. C'est sous cet aspect, qu'est apparue à Levi? la chroma-

1. Les principaux détails que l'on trouve dans cette description sont tirés du travail suivant : CasaL, Estructura del protoplasma nervioso. Rev. trim. microgr. AñolI, fasc. 1, 1896.

2. Levi, Su alcune particularità di struttura del nucleo delle cellule nervose. Rev. di patol. nervosa e mentale, vol. I, fasc. 4, 1896.

Chromaline des petiles cellules nerveuses.

Aspec! variable suivant les fixaleurs,

Chromaline des cellules nerveuses de laillemoyenne.

Forme de transition chez les vertébrés inférieurs.

Chromatine des cellules nerveuses de grande taille.

Noyaux à deux nucléoles.

tine des grains cérébelleux, après coloration au Biondi. En présence d telles variations morphologiques dues à l'emploi de fixateurs divers, on ne saurait déclarer, sans manquer à la plus élémentaire prudence, que telle ou telle disposition de la chromatine est seule normale. Aucun

fixateur n'est, à notre avis, inoffensif ; aucun ne doit donc nous inspirer une absolue confiance dans ses résultats. Mais il y a des degrés ; de lous les fixateurs que nous avons expérimentés, el ce sont presque tous. ceux connus, l'alcool absolu est certes le moins dommageable, du moins, à la structure du noyau. Viennent ensuite le formol et le sublimé, qui, eux, … semblent léser beaucoup moins la texture de la trame proloplasmique de la cellule.

2° Chromatine en granules, les uns épais. les autres très ténus, à lendance centripèle. — La cavité nucléaire est parcourue par un réseau extrêmement délicat de linine, dont les (travées minces convergent pour la plupart vers certains points où logent les nucléoles ; dans ce réseau, dans l'épaisseur … même de ses fils pâles ou aux nœuds de leur croisement, plus ou moins près du centre du noyau et jamais sous sa-membrane, on trouve quelques grains chromatiques d'une si grande finesse, que seuls les plus puissants apochromatiques permettent de les voir ; on y aperçoit encore deux, trois ou plusieurs nucléoles,amaschromatiques volumineux, souvent irréguliers, orientés en tous sens et dont un, d'ordinaire, dépasse par sa taille tous les autres. Tel est le type structural du noyau dans l'immense majorité des cellules nerveuses de taille moyenne, grains de la fascia dentata, cellules, de cordons et de la substance de Rolando dans la moelle, petites cellules pyramidales du cerveau, etc. (fig. 62, D).

Chez les reptiles, batraciens et poissons, ce type nucléaire, par exemple dans les cellules pyramidales du cerveau et les funiculaires de la moelle, est plus richement pourvu de granules chromatiques fins : en certains points même on y voitune véritable réliculation nucléinique. Cette variété constitue donc un passage à la structure chromatique des grains du cervelet.

3° Chromatine concentrée en un seul nucléole, homogène, sphérique et plus ou moins central. — Telle est la disposition de la chromatine dans toutes les cellules de grande taille : cellules motrices médullaires, cellules des ganglions spinaux, cellules de Purkinje, pyramidales géantes du cerveau, cellules à cylindre-axe court du cervelet, etc. (fig. 62, Æ).

Dans toutes ces cellules, le suc nucléaire est traversé par un reticulum irrégulier de Jinine, où, aux croisements, il est impossible d’apercevoir le moindre granule chromatique. On ne voit, au centre ou au voisinage du centre du noyau qu'un amas chromatique, le nucléole, épais et parfaitement sphérique. Mais parfois aussi, il existe deux nucléoles, dont l’un est toujours plus volumineux. Celle variété nucléaire à nueléole double, visible surtout dans les cellules géantes de moindre taille, sert donc, également ici, de transition entre le type nucléaire à nucléoles multiples et celui à nucléole unique. Une remarque, en passant : dans les grandes cellules des poissons, des batraciens, des reptiles et des oiseaux, le noyau ne renferme également qu'un nucléole.

Quelle peut être la signification de celte concentration chromatique ?

Est-elle exigée par l'intensité fonctionnelle des neurones ? ou bien n'est-elle simplement que l'expression de l’atrophie presque originelle de la faculté génératrice dans les cellules nerveuses? Nous ne rejetons pas absolument la première hypothèse, mais la seconde nous parait plus naturelle et plus jusüfiée. On sait, de fait, que dans les cellules, en général, la reproduclivilé semble être liée à une certaine dissémination et disposition de la chromatine nucléaire, substratum de l'hérédilté. Or, dans les neurones, cette disséminalion est remplacée par une concentration ; il est donc logique -de supposer que cette concentration, qui a détruit le dispositif morphologique de la substance héréditaire, équivaut à la suppression de la fonction reproductrice du neurone. Mais la fonclion reproductrice n'est point la seule activité dont le noyau soil capable; il possède aussi une action trophique et nourricière sur le reste de la cellule. Celle-ci, exaltée par la suppression même de la faculté reproductrice, retentirait avec plus de puissance sur le corps et les diverses expansions du neurone !, C'est à une conjecture analogue, exposée dans une publication récente, que Levi? est aussi parvenu.

Tout ce qui est intensément coloré dans le noyau par les anilines basiques usitées exclusivement dans la méthode de Nissl correspond-il vraiment à ce que Flemming nomme chromatine et à ce que d'autres auteurs appellent nucléine ?

L'opinion classique, soutenue par presque tous les histologistes et surtout par Flemming, Carnoy, Kôülliker, nous-même et Van Gehuchten, suppose que toute la nucléine de la cellule nerveuse est employée, dans les corpuscules volumineux, à la constitution du noyau el des nucléoles, seules parties attirant avec énergie le carmin, l'hématoxyline et les anilines basiques.

Une autre opinion, celle-ci tout récemment exprimée par Levi et Lenhossék, admet au contraire des distinctions dans cette nucléine. Ainsi, d’après Levi#, le mélange de Biondi déparlage cette soi-disant chromatine en deux substances, de propriétés tout à fait différentes : l'une avide de vert de méthyle et disposée en deux ou trois amas semilunaires qui entourent en partie le ou les nucléoles, et l’autre, ayant une très grande affinité pour la fuchsine acide; cette dernière substance se manifesterait sous la forme même des nuecléoles, c'est-à-dire de ces masses sphériques, intensément colorées par les anilines basiques. La première substance, de nature basophile indiscutable, serait, suivant Levi, la nucléine vraie; tandis que la seconde, se rapprochant par son caractère acidophile des nucléoles acidophiles des cellules ordinaires, serait la paranucléine. Cette manière de voir est également celle de Marinesco #, dont les dessins repré-

1. CaJAL, Estructura del protoplasma nervioso. Rev. trim. microgr., n° 1, Marzo,

2. Levi, Ricerche citologiche sulla cellula nervosa, ete. Riv. di patol. nervosa e mentale, fase. 5-6, 1897, p. 39.

3. Levi, Su alcune particularità di struttura del nueleo delle cellule nervose. Rev. di patol. nervosa e mentale, vol. I, fase. 4, 1896. — Ricerche citologiche comparate sulla cellula nervosa-dei vertebrati. Rev. di putol. nervosa e mentale, vol. IT, fase. 5 et 6, 1896.

4. Marixesco, Recherches sur le noyau etle nucléole de la cellule nerveuse, etc. Journ. f. Psych. u. Neurol., Bd. V, 1905.

Sens el rôle de la concentralion chromalique.

Opinions diverses sur la nucléine des neuroneselsur ses réaclions chimiques.

1 sn int Editer il bts + d

Le

Aspect.

sentent également des nucléoles acidophiles, pourvus de deux amas semilu-

naires basophiles.

La constitution chimique du nucléole est aussi discutée par Lenhossék !, dans les études approfondies qu'il en a faites sur les cellules des ganglions spinaux de l’homme. « D'un côté, nous voyons, dit-il, le nucléole nerveux se colorer par les pigments basiques : thionine, bleu de toluidine, bleu de méthylène, etc., à la façon de la chromatine ordinaire, et même si nous recourons à des mélanges de deux couleurs, l’une de basicité énergique et l’autre d’acidité faible, telles que bleu de méthylène et éosine, ou bleu de méthylène et érythrosine, nous reconnaissons que la couleur acide faible est inapte à masquer l'affinité du nucléole pour la couleur basique. Mais, d'un autre côté, si nous employons, comme ci-dessus, des colorations doubles, où la couleur acide a, au contraire, un grand pouvoir, telle que, par exemple, le mélange de Biondi, alors, nous assistons à la métamorphose de la basophilie en acidophilie; le nucléole, au lieu de fixer le vert de méthyle basique de ce mélange, comme le fait la nucléine des cellules conjonctives et névrogliques, attire à lui, énergiquement, la fuchsine acide. Notre conclusion est donc : le nucléole des grands neurones est constitué par une chromatine qui n’est point la chromatine ordinaire, la basichromatine d'Heidenhain. C'est un produit analogue, si l'on veut, mais de basophilie plus faible. Quant aux blocs chromatiques, de basophilie pure, signalés par Levi, le noyau des cellules nerveuses de l’homme n'en possèdent point. Peut-ètre sont ils propriété exclusive des vertébrés inférieurs. »

Nous avons longuement pesé les raisons avancées par Levi et Lenhossék; nous avons comparé leurs observations aux nôtres et nous sommes arrivé à penser que le grand nucléole des cellules nerveuses n’est constitué que par de la chromatine ordinaire, quelque peu modifiée, il est vrai, par le long repos karyokinétique, auquel les cellules nerveuses se trouvent condamnées dès leur naissance.

SPHÉRULES INTRANUCLÉOLAIRES (fig. 63, a). — Dans les préparations colorées par la méthode de Nissl, la masse chromatique du nucléole présente une homogénéité parfaite; il n’en est pas de même dans les coupes traitées par d’autres techniques. Les recherches de Ruzicka ?, faites sur les grandes cellules nerveuses, au moyen du bleu de méthylène, celles de Simarro et celles que nous avons entreprises par le procédé du nitrate d'argent réduit * ont prouvé que le nucléole est, en réalité, d’une structure plus compliquée. Il est formé, en effet, par de nombreuses sphérules, groupées grâce à une substance homogène. Chacune de ces sphérules représente vraisemblablement un chromosome ou filament primaire des noyaux ordinaires. Sur les coupes traitées par l'argent réduit, les globules sont colorés en marron foncé ou en rouge brique landis que la substance interposée est teintée en jaune ou en gris clair. Parfois, ainsi que Marinesco l'a observé, un ou plusieurs de ces granules sont plus intensément imprégnés que le reste par le nitrate d'argent. Le nombre de ces granules, parfaitement sphériques,

1. Vox LENHossÉk, Ueber den Bau der Spinalganglienzellen des Menschen. Arch. Psychiatr., Bd. XXIX, H. 2, 1897.

2. Ruzicka, Zur Geschichte und Kenntniss der feineren Structur der Nucleolen in den centralen Nervenzellen. Anat. Anzeiger, Bd. XVI, 1899.

3. CayJaL, Un sencillo método, etc., Trab. del Lab. de Invest. biol. t. IT, 1903.

roît avec la taille du noyau; les cellules nerveuses de grande dimension ne nferment, en général, qu'un seul amas de sphérules; celles dont la taille st moyenne en comprennent le plus souvent deux, l'un plus gros que autre; les neurones de petite taille en contiennent deux, trois ou davanage et dans chacun de ces amas, qui sont petits, on trouve rarement plus e trois à cinq globules.

SPHÉRULES DU NUCLÉOPLASMA (fig. 63, b). — Lorsqu'on colore le noyau es grandes cellules nerveuses de la moelle et du bulbe par le nitrate d'arent-réduit, sans fixation préalable au moyen de l'alcool, on aperçoit, en utre de l’amas nucléolaire décrit plus haut, un corpuscule et moins souvent eux ou trois corpuscules situés à une certaine distance du nucléole et lus volumineux que les granules de ce dernier ; c'est ce qu'on appelle le ou es corpuscules accessoires. Il en existe d'ordinaire un seul dans les neurones le la moelle, du cerveau, etc., du chien et du chat; mais chez le lapin on n trouve parfois deux et trois. On reconnaît toujours la sphérule nucléaire sa coloration rouge ou marron clair et à sa situation presque toujours au

F16. 63. — Noyaux de cellules nerveuses colorées par la méthode

au nitrate d'argent réduit. \ a, Sphérules du nucléole; — b, corps accessoire; — c, nucléole secondaire.

voisinage du nucléole principal. A l'aide de certaines formules d'imprégnaion par l'argent réduit on peut la voir seule colorée, en noir, tandis que le aucléole ne l’est pas. Il est difficile de dire ce qu'est cette sphérule ; peutêtre répond-elle aux amas acidophiles de Levi. Toul ce que l'on peut affirmer, c'est qu'en présence du nitrate d'argent elle réagit autrement que les sphérules nucléolaires et semble, par là, posséder une constitution chimique différente.

Lorsque l’imprégnation par le nitrate d'argent est précédée par une fixation à l'alcool, on voit, en outre, dans toute l'étendue du noyau une infinité de tout petits grains noirs ou gris, en tout cas d’une teinte plus foncée que le nucléole. Il s’agit peut-être là des granules fuchsinophiles d'Altmann et Held, et peut-être aussi, d'après Marinesco, des corpuscules -métachromaliques de Babès ou des nucléoles secondaires d'autres auteurs.

RÉSEAU DE LININE. — Nous avons mentionné, dans tous les types nucléaires que nous avons décrits, l'existence d'une charpente de filaments pâles plus ou moins rectilignes, convergeant souvent vers le ou les nucléoles et disposés en réseau à mailles irrégulières. Cette charpente, dite de linine, ne manque dans aucun neurone. Elle est facilement mise en évidence par la coloration des noyaux au moyen des mélanges de couleurs basiques et acides d’aniline. Elle prend les pigments légèrement acides, par exemple l’érythrosine, l’éosine, et apparait ainsi en rose plus ou moins intense.

Nombre suivant la laille des neurones.

Aspecl,nombre, siluation, caractères et nature des corpusculesaccessoires.

Autres inelu-

sions nucléaires énigmatiques.

Caractères.

Nalure des deux sorles de granulations contenues dans les travées de ce réseau.

Dans l'épaisseur des travées de cette charpente on observe des gran lations irrégulières, parmi lesquelles on peut distinguer deux espèces : 1° des granulalions épaisses, sphériques ou polyédriques, sises aux carrefours du réseau, réfractaires aux couleurs basiques, mais attirant les couleurs acides et l'hématoxyline de la méthode de Heidenhain, fait que nous avons dé= montré dans les neurones des invertébrés ! et que Lenhossék ? a confirmé chez les mammifères ; 2° des granulations extrêmement fines, pâles, assem= blées en amas autour du noyau et sur divers points du réseau de linine. Ces, granulations ne sont colorables ni par les anilines basiques, ni par l'hémaztoxyline de Heidenhain. Ce sont peut-être de simples précipités protéiques produits par les agents fixateurs. Il n'en est pas de même des premières,