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EHESS

$ I.- TECHNIQUE de la NUMERATION:

: La suspension de levure est centrifugée IO minutes à 3.200 tours et à 0° (centrifugeuse Jouan C,53): Le culot est lavé à deux reprises à l'eau distillée, puis pesé. Son poids (humide) oscille entre 2 et 9 grammes suivant les expériences. Le culot est remis en suspension dans 200 ml. d'eau distillée et agité mécaniquement pendant I/2 h.

Une première prise d'essai de IO ml. est placée dans un cristallisoir taré; l'eau est évaporée au bainmarie bouillant, le résidu repris par de l'alcool à 959, l'alcool chassé au bain-marie et le cristallisoir porté à l'étuve à I05° jusqu'à poids constant (I2h. en général).

Une autre prise d'essai sera utilisée pour faire la numération des levures; on emploie le mélangeur de Potain pour globules blancs et on réalise ainsi une dilution susT/20.

Nous avons voulu nous assurer de la rigueur de nos déterminations en voyant si les mes'ires étaient réproductibles:. pour céla.,. il fallait retrouver avec un minimum de précision - que l'on peut chiffrer à r (5%) (Tl)- les mêmes valeurs pour deux numérations parallèles faites sur la même suspension cellulaire,

Pour cela, il fallait obtenir une suspension très homogène et assez stable pour que la sédimentation ne soit pas notable au cours des mesures. Tout au début de ces recherches, nous utilïsions, pour effectuer la dilution, les pipettes ordinaires, maïs les suspensions de levure se sédimentant avec grande facilité, cela occasionnait de grosses erreurs. L'emploi de pipettes dites mélanseurs de Potain nous a donné satisfaction, à condition d'augmenter la viscosité du milieu de dilution; nous avons alors additionné le soluté chlorurosodique servant à la dilution de diverses quantités de gélose et nous nous sommes arrêtés à la formule suivante qui nous a donné satisfaction:

Chlorure de Sodium ST Gélose RSR Eau distillée de S

(I)] Trest le degré de précision que SLONIMESRT (TJ PES)

assigne aux numérations systématiques qu'il a faites sur la levure.