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difficulté: les levures contiennent, comme nous l'avons dit, très peu d'acide désoxyribonucléique et nous opérions, au début, sur de faibles quantités de matériel cellulaire. En effet, les liquides extractifs étaient assez abondants et nous complétions leur volume à 20Oml, Comne la réaction colorimétrique se fait sur 3 ml., notre prise d'essai se trouvait ainsi réduite aux 3/20.

Pour obvier à cet inconvénient, nous avions d'abord essayé de concentrer par évaporation l'extrait trichloracétique de plusieurs manières:

- Bain-marie bouillant, - vide sulfurique très poussé, - Rayons infra-rouses.

Ces opérations étaient fort longues, mais surtout, l'évaporation de l'eau apportait par là même une très importante concentration de l'acide trichloracétique, ce qui altérait la réaction colorée, ou même 1L'empêchait de se produire, comme nous l'avons plusieurs fois vérifié.

Nous avons donc décidé:

1°/ d'opérer sur de plus fortes quantités de levure de l'ordre de 5 g.” frais, représentant environ 600 ml. de culture, faite dans les conditions habituelles.

20/ de faire un extraittrichloracétique, non plus de 20 ml., mais seulement de IO ml. De cette manière, la quantité d'acide désoxyribonucléique soumise au dosage sera deux fois plus forte.

En résumé, la technique que nous adoptons, est la suivante:

I0- Centrifugation à 0° de la culture, suivie de deux lavages successifs du culot à L'eau distillée glacée.

29 = Trois exXbtractions successives:

a) avec 5 ml. d'acide trichloracétique 21062 00 CARE

b) avec 5 ml. d'acide trichloracétique à I0O % à O° ss. Lsrminutes,.

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