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3°) Extraction simultanée des deux acides nucléiqmes par l'acide trichloracétique à 5% à 900,
49) Elimination des phospho-protéines par chauffage no. des précédentes opérations avec la soude à 2 O
Nous avons dû adapter à la levure fraîche ce mode d'extraction. Dans nos premiers essais, nous éliminions les composés phosphorés acido-solubles, ainsi que l'indique SCHNEIDER, par l'acide trichloracétique à 10 % à 0°, Une centrifugation était faite ensuite à la température du laboratoire - soit environ I5 à 200°.- Nous avons voulu voir si l'extraction ainsi e ffectuée était complète: pour cela, nous avons pratiqué des dosages de phosphore - après minéralisation suivant la technique de MACHEBOEUF (56) - dans 7 extraits successifs; or, nous constations que la réaction colorée bleue due à l'acide phosphomolybdique réduit était encore très marquée dans le septième extrait. Ayant cherché la cause de cette persistance de phosphore dans les extraits successifs, nous avons pensé que cela pouvait provenir d'une hydrolyse partielle des acides nucléiques à la température à laquelle nous opérions. Nous avons alors fait deux expériences parallèles:
a/- dans la première expérience, les centrifugations étaient effectuées à 15-209, température ambiante, et nous dosions le phosphore total dans le troisième extrait trichloracétique: nous y trouvions encore IL,5.h g.
b/- dans la deuxième expérience, nous centrifugions à O° et le Phosphore total contenu dans le troisième extrait trichloracétique n'était plus que
de 5 Mg:
Il fallait donc faire l'extraction des composés phosphorés acido-solubles, et les centrifugations subséquentes, à 0° entièrement. Pratiquement, trois extractions successives à l'acide trichloracétique à 10 & à 0°, suffisent pour éliminer tout le phosphore acidosoluble car, un quatrième extrait, fait dans ces conditions, ne donne plus de coloration.
Nous nous sommes heurté par ailleurs à une autre
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