MESURE PAR REACTION AU DIAZONIUM
On peut se proposer maintenant de comparer les résultats que nous avons obtenus par cette méthode pour les concentrations en bilirubine avec ceux obtenus par la méthode de VAN DEN BERGH (7) (8). Pour cela nous avons examiné le sérum, enrichi de façon variable'en bilirubine, qui a servi à établir la courbe d'étalonnage et nous avons procédé pour ces sérums, dilués à des taux variables, à l’épreuve de VAN DEN BERGH telle que nous avions l’habitude de la pratiquer au laboratoire, pour la recherche de la bilirubine indirecte.
Technique : A 2 cc. d’alcool à 96° on ajoute 1 ce. de sérum, on centrifuge et on prélève 1 ec. du filtrat alcoolique auquel on ajoute 0,25 cc. de réactif et 0,5 cc. d’alcool à 96°. Au bout de 3 minutes on compare
aux étalons colorés.
Dh nee
Le réactif est préparé extemporanément par mélange de 0 cc. 3 de solution B à 10 cc. de solution A.
La solution B est une solution à 0,5 p. 100 de nitrite de soude dans l’eau distillée.
La solution À contient :
1 g d'acide sulfanilique
15 ce. d’une solution d’HCI à 25 p. 100
De l’eau distillée q. s. p. 1000 cc.
Les résultats de la méthode de VAN DEN BERGH sont un peu inférieurs à ceux que nous donne notre méthode. Ceci peut s'expliquer aisément par la fixation de bilirubine sur le précipité protidique comme le confirme l’examen de la colonne 4 comparativement à la colonne 3 du tableau représentant les absorptions procentuelles des filtrats alcooliques d’une part et des sérums correspondants d’autre part. Les chiffres de la colonne 4 sont aussi indiqués par la courbe n° 3 de la figure 9. En effet chaque filtrat alcoolique présente une absorption procentuelle inférieure à celle
du sérum correspondant, compte tenu de la dilution.
Cette diminution de l’absorption est faible, elle correspond à une baisse de la concentration en bilirubine de 1 à 2 mg. au litre. Notons de plus que cette quantité est à peu près constante. Ces résultats s’expliquent en admettant que la bilirubine ajoutée au sérum
in vitro se comporte comme de la bilirubine indirecte
