Préparation des dilutions de complément
On prépare 3 portoirs, À, B, G, contenant chacun 5 tubes à hémolyse numérotés de 1 à 5, qu’on place de façon à mettre en regard les tubes homologues.
On répartit d'abord la solution tampon véronal :
Portoir'A.:21" tube : ln 2e SE PS0 RAI 7 EEE
Portoirs B et G : 0,50 ml. dans tous les tubes.
On répartit ensuite le complément :
Portoir À : À partir d’une dilution au 1/5’, on répartit 0,25 ml. dans chacun des tubes. On agite.
Portoir B : On prélève dans chaque tube homologue du portoir A, 0,50 ml. du complément dilué et on les reporte dans le tube correspondant du portoir B.
Portoir GC : On répète l'opération en prélevant 0,50 dans les tubes du portoir B et en les reportant dans les tubes correspondants du portoir C.
Ces opérations sont représentées dans le tableau suivant :
CHdITÉ AU AS MRC 0 À SOL ML AVES LR EM 1 Dilution obtenue 1
C’ dilué du tube homo-
logues deAN re 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 B SOS LAVER AE nt A 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50
Dilution obtenue .... 1/50 1/60 1/70 1/80 1/90
C’ dilué du tube homo-
losterde Dre re 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 G SOLS EN EEE Te ELA 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50
Dilution obtenue .... L/100 7 L/120 7/40/1160 PEL 0
(1) Solution d’Alsever : dextrose anhydre : 20,05 g. - CINa : 8 g. - Citrate trisodique (5 HO) : 4,2 g. - Eau distillée : 1.000 ml. - Le pH doit être ajusté à 6,1 avec une ‘solution d'acide citrique à 5 % ; stérilisation à la chaleur 3 jours de suite à 1000 pendant 30 minutes. Le mélange se fait à volume égal de sang et de liquide conservateur.
(2) Solution de tampon véronal : Solution-mère : ICINa : 85 g. - Véronal : 5,75 g. - Véronal sodique : 3,75 g. - Dissoudre l'acide dans 500 ml. d’eau distillée ; compléter à 2.000 m1. ; ajouter : CIMg : 1,68 g. - Cl°Ca : 0,28 g. - Autoclaver 20 minutes à 105°. - Conservation à 40 et pH : 7,8 - Au moment de l'emploi, diluer au 1/5 en eau distillée. .
AS
