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Incubation une heure au bain-marie à 37°.

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Hémolyse 30 minutes au bain-marie à 37°.

Modalités de lecture :

On surveille le déroulement de la réaction et on fait une première lecture dès que l’hémolvse est totale dans les témoins généraux contenant du complément à deux unités, et dans les témoinssérums : on refait une deuxième lécture à la 30° minute ; si le titrage du complément a été convenable, il doit y avoir hémolyse totale dans les témoins généraux (A+C' et C.H.) contenant deux unités de complément, partielle dans ceux contenant une unité, et nulle dans ceux contenant une demi-unité ; le témoin antigène (A — C7) et le témoin hématies (T.H.) ne doivent pas hémolyser.

Pour chaque tube, la lecture est faite par transparence et nous avons l'habitude de distinguer 4 degrés de positivité :

— 0 ou 100 % : Hémolyse totale.

— (+) : Douteux ; le liquide n'est pas parfaitement clair.

— (+) ou 1 ou 75 % : Le liquide présente un louche certain ; un barreau regardé à travers lui n’est pas vu parfaitement net. (

— (++) ou 2 ou 50 : Le barreau est vu très estompé à travers le liquide.

— (+++) ou 3 ou 25 % : Le liquide est légèrement translucide sans qu’on puisse apercevoir le barreau.

— (++++) ou 4'ou 0 % : Absence totale d’hémolyse.

Nous ne retenons comme positifs que les tubes présentant une réaction à 3 ou 4 après 30 minutes (2° lecture).

Pour que l'ensemble de l’épreuve soit valable, nous exigeons enfin que deux sérums de référence connus pour être positifs retrouvent leur titre exact. Une variation de ce titre de plus d’un tube fait rejeter l’ensemble de la réaction. Par ailleurs, un sérum de référence connu pour être négatif ne doit montrer aucune fixation.

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