COLORÉ PENDANT LA VIE

A. Garance — L'examen à l'œil permet de constater que les cartilages vasculaires et les os spongieux, jeupes et adultes, sont

rougis par la garance. Il est insuffisant, quand il s'agit de décider si Tes compacta d'apparence blanche, contient des couches rouges.

En enlevant avec la scie de minces lamelles osseuses, et en les usant sur la pierre, on obtient des coupes assez minces pour y étudier la distribution des couches incolores ou colorées par la garance.

Serres etDoyère, Lieberkuhn, puis KôUiker ont employé ce procédé. Streizoff montait de plus les coupes dans la glycérine et les conservait à Tobscurité.

Lieberkuhn a prétendu que les principes de la garance, l'alizarine, en particulier, combinée à la chaux, sont insolubles dans l'alcool, c'est-à-dire que les os teints par un régime garance restent rouges dans Talcool. Je n'ai pas eu la chance de confirmer ce fait, car les os de mes animaux expérimentés que je mettais dans Talcool se décoloraient très vite.

Schreiber (voir p. 474) a également pu con.server la couleur des os rougis par le régime garance en traitant les os par l'alcool ou le formol. Le formol ne m'a pas donné des résultats meilleurs que l'alcool. Au lieu de décalcifier ou d'user l'os sur la pierre, Schreiber préfère enlever au rasoir ou au scalpel de minces fragments osseux. ^ 11 examina les frais dans la solution physiologique de sel marin, et l'os fixé dans la glycérine ou le baume.

Ces divers procédés ne m'ont pas donné de résultats satisfaisants : ils ont le grave inconvénient d'altérer la teinte, qui s'efface peu à peu. Après de nombreuses tentatives, j'ai réussi à conserver dans les préparations microscopiques la couleur des os rougis pendant la vie par la garance.

Voici la méthode qui m'a permis de faire ces préparations persistantes. Je ne parle ici que des tissus squeleltiques, bien qu'elle puisse s'appUquer, dans une certaine mesure, aux membranes et aux organes mous.

Les tendons, les cartilages ou les os non calcifiés encore, ont une consistance suffisante pour être coupés entre deux morceaux de moelle de sureau. Quant à l'os calcifié, j'enlève de minces lamelles avec le scalpel ou j'use sur la pierre les coupes faites à la scie. Je déshydrate rapidement les lamelles ou les coupes d'os, puis je les inclus dans' du baume sec : à cet effet, je chauffe un morceau de baume de Canada sur la lamelle couvre-objet jusqu'à disparition des

bulles d'air, puis, à Taide d'une pince, je porte et je renverse la lamelle sur la lame qui supporte Tobjet déshydraté, et, après y avoir exercé une douce pression, je refroidis rapidement. Je possède des préparations qui datent de 8 à 9 mois et j'ai la satisfaction de constater que la couleur rouge et les nuances intermédiaires entre le rouge elle jaune s'y sont parfaitement conservées.

B. Bleu de méthylène. — Après avoir coloré le tissu osseux vivant par le bleu de méthylène, je mets les os soit dans le picrate d'ammoniaque, soit dans le molybdate d'ammoniaque. J'applique, en un mot, pour avoir des préparations persistantes, à l'os coloré par le bleu de méthylène, la technique que j'avais employée pour le cartilage*.

C. Carmin d'indigo, rouge neutre et rouge Congo. — Les os colorés pendant là vie au carmin d'indigo sont mis dans l'alcool qni précipite et Hxe le carmin d'indigo. Quant au rouge neutre et au rouge Congo, je me suis borné à examiner frais les os rougis pendant la vie par ces colorants.