Entre 60 et
c. Entre 80 et 100« 33
d. Entre 100 et 120<» 20
e. Entre 120 et 130« 4
Il reste dans le ballon un liquide noir, /, qu'on récupère par l'alcool. Etudions chacune de ces fractions.
Fraction ii. •— La fraction A à laquelle on joint la fraction « pesaut S grammes obtenue au début de la seconde distillation, se prend au bout de quelque temps en un feutrage d'aiguilles blanches (2''',29) imprégnées d'une huile. Ces aiguilles ont été recristallisées de l'alcool et analysées.
I. Poids de matière ; 0,1379; V = 18«°,5; ^=25«; H=750;/ = 23,5
II. Poids de matière : 0,2600; V=:34«^,3; ^=25o; H=751;/=23,6
Trouvé.
Azote 14,53 14,50
Ces chiffres ne correspondent pas exactement à Téther du glycocolle CH2.AzH«-C0«.C«H5 qui exigerait 13.6 0/0 d'azote. Peut-être s'agit-il d'un produit de condensation.
On saponifie le corps en aiguilles par la baryte à l'ébuliition pendant 5 heures, élimine la baryte par SO*H* et évapore le liquide. On obtient un résidu sirupeux qui cristallise incomplètement et ne donne pas le chlorhydrate de l'éthylglycocolle quand on sature par HCl sec sa soluUon alcoolique.
On essaie de le transformer en sel de cuivre par ébuMition avec de l'oxyde cuivrique fraîchement précipité ; on n'obtient guère que 0»',6 d'un sel bleu
pâle qui donne à Tanalyse des chiffres assez rapprochés de ceux qu*exig6 le glycocoUate de cuivre.
Poids de matière : 0,0516; Poids deCuO : 0,0188
Calculé Trouvé. pour (C*H*A20«)«Cu.
Cu 2y>05 29,8
Les eaux-mères de ce sel abandonnent de belles aiguilles bleues foncées, solubles, contenant 46.08 0/0 de cuivre et 11.48 0/0 d*azote. 11 a été impossibles d'identifier ce produit avec une substance déjà connue. Peut-être s'agit-il d*un produit de condensation de Féther du glycocolle, lequel se condense facilement.
L'huile dans laquelle baignaient les aiguilles qu'on vient d'étudier a été saponifiée par une ebullition de 5 heures au contact de Teau de baryte. Après séparation de la baryte, l'évaporation du liquide filtré a fourni un dépôt blanc cristallin d'où l'on a pu, par fractionnement, séparer de petites sphères cristallines blanches, fondant à 245"*, ne réduisant pas l'azotate d'argent ammoniacal, présentant tous les caractères de l'acide aminovalérique.
Poids de matière : 0 , 1092 ; V = 12",2 : ^ = 24o ; H = 743o ; /= 22«,1
Calculé Trouvé. pour C»H"Ai0«.
Azote 12,07 11 ,96
En résumé, cette fraction A renferme donc : de l'acide aminovalérique, de petites quantités de glycocolle et un corps indéterminé qui est peut-être un produit de condensation de ce dernier.
Fraction B, — Cette fraction, soumise à une seconde distillation, a donné les portions : a (réunie à A et étudiée ci-dessus), /?, c, (/, e, /, qui vont être étudiées.
b) Après quelques semaines le liquide huileux qui constitue cette portion abandonne des cristaux en aiguilles qu'on essore et analyse, après une seconde cristallisation. Ces cristaux en aiguilles pèsent 0<^,46 et sont peut-être formés par un mélange d'alanine et de glycocolle, le premier prédominant.
Poids de matière: 0,2240; V:=34«s6; t=V^\ H = 729àllo; Ho-f=711,4
Calculé
Trouvé. C«H»Ax0«. C»H'Aï0».
Azote 16,91 18,6 16,09
La présence de l'alanine et du glycocolle à Tétat de liberté dans les ethers de ces deux corps s'explique par la saponification spontanée de ces ethers qui, à froid, se décomposent en quelques jours.
Le produit huileux, saponifié par la baryte à l'ébullition pendant 5 heures, a donné un composé qui a été, après plusieurs cristallisations, identifié avec l'acide amino-valérique C*fi**AzO*.
c) Fraction la plus abondante (33 gr.). Après saponification par la baryte, elle donne une substance blanche, opaque, dextrogyre (a = -j-0°10' pour une solution à 2,5 0/0) : c*est de la leucine impure.
Poids de matière : 0,0872; V=8'^s0; t^2h^\ H = 745; /=2o,5
Calculé Trouvé. pour C«H"Ar0*.
Azote 10,01 10,68
218 L. HUGOUNENQ
Par des cristallisations répétées, on obtient de la leucine pure en écailles brillantes (12«^',03) et dont le pouvoir rolatoire a été trouvé égal à p = + 21*,5.
Les eaux-mères abandonnent un produit qu'on purifie par des cristallisations successives et qui transformé en sel de cuivre par ebullition avec l'oxyde cuivrique» donne un sel en écailles bleu pâle.
Poids de matière : 0,3515; CuO trouvé : 0,1006.
Calculé Trouvé. pour (C»H*«Ar0»)«Cn.
Cu 22,73 21,43
Ces cristaux sont formés d'acide amino-valérique C^H**AzO* impur, contenant sans doute de Talanine C^H'^AzO*.
d) Du liquide saponifié par la baryte, on retire :
1° 4'',94 d'une substance en écailles blanches, brillantes, ayant tous les caractères de la leucine. La moyenne de deux dosages d'azote a donné 10,60 au lieu de 10,68. Le pouvoir rotatoire p==-}-20*,0 (0^^,50 dissous en 25 c. c. de liquide contenant 10 c. c. d*acide chlorhydrique concentré).
2^ Un second dépôt pesant S^',40, formé de cristaux blancs, fusibles vers 238"*, ne réduisant pas le nitrate d'argent ammoniacal et présentant les caractères de l'acide amino-valérique.
Poids de matière : 0,1484; V = 15%6; t=2b^; H-- 747; /=23,5
Calculé Trouvé. pour C»H"Ai0«.
Azote 11,71 11,96
S"" Une masse cristalline, pesant O^^'fiS, réduisant Tazotate d'argent ammoniacal avec formation d'un miroir brillant, comme l'acide pyrrolidine-carbonique ou proline de Fischer. Cette substance fond à 198"* (corrigée) au lieu de 202^ (point de f^ision de la proline). Le dosage d'azote confirme ce rapprochement.
Poids de substance: 0,1336; V=14«'<',0; ^ = 24<>; H =742; /=22,1
Calculé Trouvé. pour C»H»AiO*.
Azote 12,06 12,17
On prépare l'urée de cette substance en l'attaquant par l'isocyanate de phényle et on transforme ensuite cette urée en hydantoïne en la traitant au bain-marie par l'acide chlorhydrique à 25 0/0. Après deux cristallisations dans l'alcool faible, on obtient de longues aiguilles soyeuses, fusibles à 121*, dextrogyres : c'est l'hydantoïne en C**H**Az«0^.
Poids de matière : 0,1042; \=zl3^fi; H = 744; ^=28; /=28,1
Calculé Trouvé. pour C"H"Az«0«.
Azote 13,32 12,96
4* Les eaux-mères refusent de cristalliser et contiennent une matière
amorphe qui ne cristallise pas, non plus, quand on la transforme en sel de
cuivre. On met ce produit à part : nous y reviendrons à la fin de ce travail.
^ e) Huile colorée en jaune, assez peu mobile. Saponification par la baryte.
Élimination de cette dernière. GristaUisation qui donne :
!• Une petite quantité d'acide amino-valérique fusible vers 285«, ne réduisant pas l'azotate d'argent ammoniacal.
Poids de matière: 0,1002; V=10<'%4; r=23o,5; H=747; /=21,4
Calculé Trouvé. pour C»H"Az0«.
Azote 11,41 11,96
2^ Un produit gommeux incristaliisable soit directement, soit à Fétat de sel de cuivre ou de baryte. Il en sera question plus loin.
/) La saponification par la baryte donne un produit incristaliisable sur lequel on reviendra.
Fraction C, — Liquide huileux saponifié par 5 heures d*ébullition au contact de l'eau de baryte. On élimine exactement la baryte par SO^H^, filtre et fait cristalliser.
. 1® On obtient de la leucine impure.
Poids de matière : 0,0918 ; V = 8««,4 ; ^= 24« ; H = 743 ; /= 22
Calculé Trouvé. pour C*H«»AïO«.
Azote 10,03 10,68
Cette leucine est dextrogyre. On la purifie par des cristallisations répétées. 2* Eaux-mères sirupeuses incristallisables qu'on met de côté.
Fraction D. — Après saponification par la baryte, on extrait : l"" Un corps bien cristallise en prismes mesurables fusibles à 206"* (l'acide glutamique fond à 208''), donnant un sel de zinc peu soluble, bien cristallisé en rosettes, comme celui de l'acide glutamique. Le dosage d'azote identifie ce corps avec l'acide glutamique.
L Poids de matière : 0,1548; II. Poids de matière : 0,2408;
Azote
Trouvé.
Calculé pour C»IPAi0*.
2^ Dans les eaux-mères se*trouve un composé qu'on ne parvient pas à purifier suffisamment pour l'analyser, mais qui donne avec l'acide sulfurique à 1/5 et le bichromate de potasse, l'odeur de la phénylacétaldéhyde. Il y a lieu de penser à la phenylalanine G«H».CH«-CH.AzH«-CO«H.
8* Signalons aussi, mais en très petites quantités (quelques decigrammes), deux substances qui ont donné à l'analyse des chiffres voisins de la serine GH«.AzH«-CH.OH-GOOH et de l'alanine CH3-CH.AzH«-C0«H (18,21 d'azote au lieu de 13,83 et 15,02 au lieu de 15,70). On avait trop peu de matière pour une identification plus précise.
4* Résidu incristaliisable qui, transformé en sel de cuivre, donne un sel vert, mal cristallisé. On le reprendra avec les produits similaires.
Fraction E. — Huile assez épaisse, de couleur jaune, qu'on saponifie par la baryte comme précédemment.
On obtient : Un corps blanc cristallin (Iff', 10), qui n'est autre que la phenylalanine C«H5.CH«.CH.AzH«-C00H. En effet :
tîO L. HUGOUNENQ
à) Ce corps en solution pas trop étendue dans l'acide sulfurique à 5 0/0 précipite par Tacide phosphotungstique en donnant de grosses gouttes huileuses, caractère que Schulze et Winterstein ont montré appartenir à la phenylalanine.
b) Chauffé avec de l'acide sulfurique à 20 0/0 et un fragment de bichromate de potasse, ce composé dégage Todeur piquante et aromatique de la phénylacélaldéhyde.
c) Le dosage d*azote confirme ces caractères.
Poids de matière : 0,067; V =^^fi; t=2b^; H = 743; /=23,5
Calcule Trouvé. pour C»H**Az0«.
Azote 8,09 8,48
2* Les eaux-mères du corps précédent additionnées d'alcool ont donné un composé insoluble dans l'alcool et qu'on a fait cristalliser dans l'eau (2*^,85). Parmi les cristaux obtenus, se trouve un beau prisme incolore meswant 4 mm. de long, fondant à 202**, ne présentant pas la réaction de la phénylacétaldéhyde : c'est de l'acide glutamique C*^H®AzO*.
Poids de matière : 0,1601; V = 14«,2; ^ = 30«,5; H = 748; /=32,4
Calculé Trouvé. pour C'flMrO*.
Azote 9,40 9,52
3° Une eau-mère qui refuse de cristalliser et* qu'on traitera par la suite.
Fraction F. — C'est la matière visqueuse restée dans le tube du réfrigérant après la distillation des ethers. On Tenlève à l'alcool, chasse ce dernier et saponifie par la baryte.
1"* On sépare, par cristallisations répétées, de gros prismes fusibles à S08'', ne donnant pas la réaction de la phénylacétaldéhyde : c'est encore de l'acide glutamique C^H^AzO*.
Poids de matière : 0,1180; V = 10<^,6; ^ = 28^• H = 747; /=28,1
Calculé Trouvé. pour C»H»Aï0*.
Azote 9,61 9,52
2« Les eaux-mères donnent un résidu incristaliisable qui sera traité ultérieurement.
Fraction G, - Matière brune visqueuse restée dans le ballon. On la reprend par l'alcool, élimine ce dernier et saponifie par la baryte à l'ébullition, après avoir essayé de décolorer au noir de sang qui parait retenir beaucoup de substance. Pendant la saponification, on remarque la formation d'un précipité blanc abondant, formé probablement par l'aspartate de baryum. Un accident a entraîné la perte de ce précipité et n'a pas permis de le déterminer.
Le liquide surnageant, débarrassé de baryte par précipitation exacte avec SO*H* a été transformé en sel de cuivre par ebullition, au contact de l'hydrate d'oxyde de cuivre fraîchement précipité. On obtient un sel vert cristal-
Usé en longues aiguilles rayounées et qui n'est autre que le sel de cuivre de l'acide asparlique C*H''AzO*.
