DEUXIÈME PROCÉDÉ
- 1°) 100 centimètres cubes d’urine sont exactement neutralisés à la phtaléine par addition de soude décinormale. On ajoute une quantité d’acide hippurique
cristallisée supérieure à celle qui peut être dissoute.
On laisse en contact pendant 24 heures en agitant. . de temps à autre. Au bout de ce temps, on retient par filtration l'excès d'acide non dissous. L’acidité dûe à l’acide hippurique dissous est mesurée par le volume de soude décinormale qui ramène au virage de la phtaléine. N
Chaque centimètre de soude — correspond à
0 gr. 0179 d’acide hippurique. 10
Résultat 29 cc. soit 29 X 0,0179 — 0 gr. 519 d'acide dissous dans 100 c« d'urine, résultat analogue à la valeur donnée par le premier procédé.
2°) On peut opérer de même avec 100 ce. d'urine
additionnés de 50 gr. de sulfate de magnésie.
| additionnée de 100 Aie “bre 4 magnésie Ga 2 <
ration obtenue, il reste un excès de sel non dissous)
donne le résultat suivant : 4 ce. 3 soit 0 gr. 077 d'acide dissous dans 100 cc. d'urine saturée de sulfate de ma-
gnésie. La même méthode a donné les résultats sui-
FJ
vanis : 2 gs Et + =
a) Pour l'urine saturée de sulfate de soude, la
solubilité de l'acide hippurique est de 0 gr. 38 pour
100 cc.
b) Dans l’eau distillée, la olubilité de l'acide hippurique est de 0 gr. 18 pour 100 cc. soit 1 bone 600 ainsi que l’indiquent les formulaires.
c) Dans l’eau distillée saturée de sulfate de soude, la solubilité de l’acide hippurique est de 0,13 pour 100. |
d)Dans l’eau distillée saturée de sulfate de magnésie, la solubilité de l’acide hippurique est de 0,08 pour 100. |
Ces chiffres exacts de solubilité étant bien établis. pour 100 centimètres cubes
0 gr. 52 dans l’urine seule
0 gr. 33 dans l'urine additionnée de sulfate de
magnésie à 50 %.
o gr. 08 da l’urine additionnée de sulfate de
ne à saturation,
la mise au point d’un dosage exact est facile.
Dosage précis de Pacide hippurique dans l'urine.
L'étude précédente montre qu’un dosage ne peut déceler l'acide hippurique à des concentrations inférieures à 5 pour 1.000 dans l’urine seule, à 3 pour - 1.000 dans l’urine à 50 % de sulfate de magnésie. à ] pour 1.000 dans l’urine saturée de sulfate de magnésie,
Opérer comme je le préconise en milieu saturé de
sulfate de magnésie présente de multiples avantages :
Les dosages permettent de déceler et doser l’acide hippuriaue sous des concentrations minimes: ils sont précis puisque la correction de solubilité résiduelle est très faible et toujours identique pour toutes les urines saturées de sulfate de magnésie. Dans la technique de Quick, on applique bien aussi toujours la même correction; mais étant donné les variations de solubilité de l’acide hippurique avec la concentration du milieu. il n’est pas certain que cette solubilité soit la même pour les urines à densité élevée des oliguries et pour les urines claires des polyuries.
Au contraire, en milieu saturé de sulfate de ma-
gnésie, la concentration propre de l’urine est négligea-
ble par rapport à la forte quatité de sel dissous.
Technique définitivement adoptée.
20 ec. d’urine filtrée exactement mesurés à la pipette sont versés dans un petit vase d’Erlenmeyer dans lequel ont été au préalable déposés 20 gr. de sulfate de magnésie pesés au trébuchet: On agite pendant quelques minutes pour dissoudre le maximum de sel, maïs
il en reste toujours un excès non dissous.
On ajoute alors 1 centimètre cube d’acide chlorhydrique pur, cette quantité est toujours suffisante. Le début de précipitation de l’acide hippurique est immédiat, il est absolument nécessaire de laisser en contact au moins une heure en agitant énergiquement de temps à autre pour que la précipitation soit complète.
Au bout de ce temps, la filtration est faite très rapidement à l’aide d’un creuset à fond filtrant de type courant, disposé sur une fiole à vide reliée à une trompe à eau.
Le petit Erlenmeyer est lavé avec environ 10 cc. de solution aqueuse saturée de sulfate de magnésie à 4 reprises successives, chaque eau de lavage servant à
passer sur le précipité pour entraîner l’excès d’acide
chlorhydrique.
Dans ces conditions, cette opération ne dure que
quelques secondes et on peut s’assurer que les 10 derniers centimètres cubes ne troublent pas une solution d’azotate d'argent. Le sulfate de magnésie en excès déposé dans le creuset ne gêne aucunement.
Le’ creuset à fond filtrant est déposé allongé de champ dans un becher à large ouverture renfermant de l’eau distillée chaude à 80-90° en quantité suffisante. Le précipité d’acide hippurique se détache immédiatement pour se dissoudre dans l’eau chaude, Ie dosage se termine par addition de soude décinormale jusqu’au virage à la phénolphtaléine. |
La quantité d’acide hippurique contenue dans la
prise d’essai de 20 cc. est de 0 gr. 0179 x n nombre N de centimètres de Na OH —. Il faut y ajouter la quantité fixe de 0 gr. 02 due à la solubilité de l’acide
hippurique dans les conditions du dosage.
La quantité d’acide benzoïque correspondante
s'obtient en multipliant par le facteur 0,68.
En cas d’urines fortement chargées en pigments bi-
liaires, le précipité d’acide hippurique retient une P P PPUrIiq
grande quantité de ces pigments qui colorent en jaune
verdâtre l’eau chaude du becher par redissolution.
Le virage est néanmoins facile à saisir. Dans quelques
cas très rares d’urines surchargées de pigments et sels
fie de la tension tele élevée du Vide us . de >
Le
On peut alors effectuer 1 dosage en milieu moins # concentré, par exemple 50 % de sulfate de magnésie, soit 10 gr. de sel pour 20 ec. d’ urine, avec le même 7 mode opératoire; la correction de solubilité est ici de 0 gr. 07 pour la prise d'essai. Cet variante ne permet |
évidemment pas de déceler l’acide hippurique à une
concentration inférieure à 3 pour 1.000 et présente
l’inconvénient d’exiger pour les faibles doses une cor-
rection élevée par rapport à la quantité mesurée.
Remarques.
1°) IT est absolument nécessaire d’attendre au
moins une heure avant la filtration pour que la préei-
pitation soit complète. Au bout de 30 minutes, 70 à
80 % seulement d’acide sont déposés.
2°) La filtration peut évidemment être effectuée sur filtre ordinaire mais le passage de ces solutions saturées serait très lent. D’autre part le lavage d’un filtre en papier pour retirer le gros excès d’acide chlo-
rhydrique n’est jamais aussi parfait qu’avec un creu-
set à fond filtrant.
3°) Il est absolument nécessaire d’effectuer le la-
centimètre cube Te Na 0 57: Cortes) “0
: Jume . ne nee pour 1 un de chez un sujet normal. est de 15 à 20 CC. chez un hépatique de 4 à <
ER 12 cc. environ. On conçoit aisément la sensibilité du
dosage. Se L ie 0) Je me suis assuré à de multiples reprises que le précipité est bien constitué par de l’acide hippurique seul et recristallisé il présente le point de fusion
188° “indiqué dans la littérature. :
Ke
Avantage de cette technique. ’ A
1Ë ) Elle ne aude la manipulation que d’un pe-
tit volume de liquide.
2°) Elle est simple, rapide; à part le contact d’une
heure, un dosage s’effectue en quelques minutes.
3°) Elle permet un dosage de très faibles quantités
