CULTURE DES MICROBES

aussi ne faisons-nous que renvoyer aux ouvrages qui les résument; néanmoins nous avons pensé quMI n'était pas inutile de montrer, par les figures ci-après (fig. 333 à 335) comme exemples, Taspect de quelques-uns des organismes microscopiques les mieux étudiés et les plus connus ; ces figures, que nous devons à l'obligeance de l'éditeur M. Georges Masson, sont extraites du livre de M. le D' Duclaux; elles sont toutes au même grossissement de 500 diamètres.

Technique de M, Pasteur pour la culture des microbes. — La démonstration directe ou méthode expérimentale de la nature parasitaire des maladies infectieuses se compose de deux opérations distinctes : il faut d'abord arriver à isoler le microbe et ensuite reproduire le microbe ainsi isolé. Cette seconde partie de l'expérimentation s'effectue à l'aide de l'inoculation. Quant à la première, elle s'obtient par la méthode des cultures dont le principe, ainsi que l'établissent MM. les D'» Zuber et Du Cazal dans une revue critique sur le Rôle pathogénique des microbes {Revue des sciences médicales y 1881), appartient incontestablement à M. Pasteur depuis ses études déjà anciennes sur les maladies du vin et de la bière. Nous extrayons de ce travail les principes suivants de la technique actuellement employée par M. Pasteur, telle qu'il l'a indiquée lui-même à cette occasion :

Il s'agit de préparer d'abord le liquide de culture qui varie avec les microbes que l'on se propose d'étudier.

Les liquides les plus usités sont :

1® L'urine que l'on neutralise avec quelques gouttes d'une solution de potasse ;

3*» L'eau de levure de bière : on fait bouillir, pendant 30 à 30 minutes, 30 grammes de levure dans un litre d'eau ; on filtre et on neutralise ;

3° Le bouillon de poulet : on prend parties égales de muscles maigres et d'eau et l'on fait bouillir pendant 1/4 d'heure ; on filtre et on neutralise, toujours par le même procédé.

Le liquide ainsi préparé est introduit dans des ballons de dimension moyenne, dont le col est ensuite étiré à la lampe.

Les ballons ne doivent pas être trop remplis, mais il est important aussi de n'y pas trop laisser d'air à cause de l'opération suivante : la stérilisation du liquide de culture.

Les ballons fermés à la lampe sont placés dans un bainmarie composé d'un récipient en cuivre surmonté d'un couvercle à deux ouvertures (l'une au centre pour la tige du porteballons, l'autre sur le côté pour le thermomètre). Le porteballons se compose d'un plateau au centre duquel s'élève une lige de métal portant 4 anneaux pour soutenir et maintenir les ballons.

MALADIES ËPIDËWUUES.

' Infusion d« (oiD. — Principales (ormes qn'OD rencontre dkni nno m de toin, m haut de 5 1 6 jours de stjoiir a l'jiuve. — Ei a, grai odes, poriani i l'arant des rides conTenes de cils vibritiles, t l'aide nels ib ivalenl les atimenls dans une sorte de bouche, placte obliquement la partie rectrinlc; à l'arrière, vésienlo coDlracIile, ttntôl visible en ftli lire, tanlôl iuvisilile quand elle est conlnciée et qu'on doit assimiler à nu r; un de ces lotpodes est en boule et commeDce à E'eol^rster; c'est ce qui e quand les conditions d'eiisteace deviennent diniclles. — En i, vibrlo»

is régulière ment en spirale, qu'on ippelle spicillains. — En c, monades

B t'iviDt. — Ëo t. aoias aoiorpheB de micrococcos. —

n chaînes; fb et li, dans le champ, petits bilanneu

.. , retliligoes ,otl llcjiienj, composant le monde des

tibriODs. Au milien du champ, lonl près de e. cellules rondcB, de la crossBir

des cellules de '--"-" i-— --' • ■<- K^n j< — >■•-.. (ii',„i.. n >.

D' DaelaniO

des cellules de letlirc. — Grossissement dg 500 diamètres. — (D'après H. te

VIUtlON SEPTIQUE.

Fir. iî3. — Vibrion seplique. — On a reprïsentt dans celle flrnre al aiui bien qu'il ■ éit possible, la nriiti de formes et ds dimensions vriinent remarquable de cemierote. Dans le qnirt du champ on a essayé de représenter ce qn'i] deiienl quelques lienres aprts la mort dans le sang, où 11 est ponrtaal noini Tlsitle que ne le représente la tlgaK. i ranse des f[lobnles an milien desquels II te clisse. On le devine plus qu'on ne le voit alors, mali ancun dessin ne peut rendre celte impression. Ou l'a représenté Iraversinl une de ces places lides de globales, comme it ; en a quelqaerols dinf une préparation, quand la surface dé l'un dés deux verres qui li maintiennent préxeule quelqnes taches de matière ip'asse. — Grossissement de 500 diamètres. — {D'spriiM. le D'.Duélaui.)

MALADIES ËPIDÉMIQOES.

le rrannlce iDi^suenli. isoliiou nircou « liquide cl le rendcni trouble. — côlt di

— Cdié E'Dchc : Cnltar» rècenle. tarait

11 de EOO diomttrci. — (D'après H. la D' Dneliu

BACTËRIDIE DD CBARBON.

— CS1£ gaDche : Aspect de li

biclérldie cliir.

Iileiir: i-U« Ml

jn laaM Bl» eutrelieéa, bomoitiMe» d'abord, ii

dis «iiori* qii< BBliiMDi par Bliuler cl deicnli

WDlB ^Brlqgeï-uiM de rei >|iorM loa eneon

■meliiKi iHlmiliTi:* et arraDuéca vu ligaei réEnlltres. — C6\i droit : A«|>ret de 11

btrlrridle ilin* le «ant d'an animal mort cnatbouaeni: bcanrniin de niiounett

iiolts Od M' eoiplw, rarenent dei chaîne; pIdb loiiRiia* ; dM (tnbiries

créaelei siirlenr ponrlODr; en hintelea bas, deil ledcocjus.

it SuO diamttres. — (D'apTti M. le D' Dvelaai,)

ITG. EH FKAHCI.

-3M HALAIIIES ËPIDÉHIQUES.

Des ustensiles de ce genre existent dans tous les laboratoires de chimie.

Le porte-ballons se place facilement dans le récipient de cuivre, rempli d'eau additionnée de chlorure de calcium en quantité plus ou moins considérable suivant qu'on veut retarder plus ou moins le degré d'ébullition. On met le couvercle et on fait chauffer de façon à fitire bouillir pendant 30 minutes ou une demi -heure (à une température de 14S° à 120»). Cette opération n'est pas sans quelque duji^'er ; la vapsui' J'itau bit quelquefois éclater les ballons. Aussi estril nécessaire d'assujelli^lç couvercle. On évitera de i:irculer aulouj' de l'appareil pendapt qu'il' fonctionne et l'on &o garantira, des éclats <iui peuvent se prod^iire en interposant une [ilanche ou un tableau noir. — On laisse refroidir dans le rci^ipi^nt, puis on lave les balldns à (p^nde eau.

Les'liquides de culture sont alors iilLTlIisés et resteront indéfiniment dans les mêmes conditions «ans subir aucune alt^ ration.

Lorsque l'on veut les utiliser, on ouvi% un- ballân> pour en retirer le liquide que l'on répartit dans des petits flacons spéciaux : k culture.

Pour cela, il faut se placer dans un lieu" où l'air soit ausw pur, aussi immobile que possible. Pendant toute Ik durée des opérations suivantes, on évitera avec le plus grand soin d'agiter l'^ir, 0(1 se bornera aux mouvements striçlément nécess^res et V(i!l se gardera de tout mouvement it»riis(jiie.

Poiy ouvrir J(Ç flacon, on donne sur le {^^IkÙp trait de I me que Ton continue au moyen d'un charbon enOammè.

Puis arec une pipelt(f'(dfr^^Pastenr) on aspiré- 1« liquide et on le répartit dans les petits flacons à culture. Ce sont des flacons fermés à l'émeri par un bouchon ouvert contenant du coton stérilisé à l'étuve. Ils doivent être naturellement stérilisés euxmêmes, puisqu'ils peuvent contenir des germes. Pour cela, ils doivent être maintenus pendant une heure dans une étuve à air sec à une température de 130* environ.

Les flacons à culture étant remplis comme nous venons de le dire, on les met à l'étuve pendant quelques jours à une température constante de 36». Si le liquide reste clair, c'est qu'il est stérile et prêt pour l'ensemencement ; s'il se trouble, c'est qu'un germe s'y est introduit pendant l'opération. En général quatre jours suffisent pour cette épreuve.

Pour ensemencer une culture, on prend avec une pipette (de Pasteur), stérilisée à l'étuve et dont on casse la pointe au moment d'en foire usage, une petite quantité du liquide à essayer et on l'introduit dans le liquide, — toujours en évitant d'agiter l'air pour ne pas introduire dans le ballon d'éléments étrangers. Le liquide étant ensemencé, on reporte leballonàl'étnve.