PROCÉDÉS DE TECHNIQUE
2. Procédés de technique. — Pour mettre en évidence sur les coupes et sur les frottis les corpuscules rabiques, chaque auteur a donné une technique différente de coloration.
\\ant de citer les principales, rappelons que le choix doit varier suivant le but proposé. S'agit-il d'établir un diagnostic rapide de la rage, on pourra se contenter du procédé des frottis et adopter la technique de Ira van Giesen, par exemple: elle ne demande pas plus de quelques minutes. Si l'on désire au contraire étudier la structure des corpuscules, il faudra pratiquer des coupes en série.
Toutefois celle dernière méthode sera toujours préférable quand on pourra la' suivre, car il faut compter avec les cas assez fréquents où les corpuscules sont très raréfiés.
Dans son travail fondamental. Negri, après avoir signalé la recherche possible de ses corpuscules sur des préparations non colorées, conseille la technique suivante.
Fixation d'un fragment de la corne d'Ammon dans le liquide de Zenker, inclusion à la paraffine, coloration au Mann, suivant la formule :
Solution d'éosine à 1 p. 100 35 ce.
Solution de bleu de méthylène à 1 p. 10,0. .35 — Eau distillée 100 —
En contact vingt-quatre heures; ensuite déshydratation dans l'alcool sadique (alcool absolu, 3o ce; solution sodique au centième, 5 gouttes).
Lavage à l'eau acétique.
Déshydratation.
Cette méthode colore les corpuscules de Negri en rou»r vif.
Negri les a ainsi observés chez les oiseaux, qui prennenl si difficilement la rage.
La planche en couleurs ci-jointe (fig. 8) montre une ooupe de la corne d'Ammon pratiquée sur le cerveau d'un chien inoculé avec le virus des rues. Après fixa tion par le liquide Zenker, la coupe a été colorée par la méthode de Mann.
Volpino recommande la coloration au picrocarmin pendant vingt-quatre heures, suivie d'un passage dans le bleu de méthylène étendu: les noyaux des leucocytes et des cellules nerveuses sont rouges, le protoplasma rose jaune, les hématies jaunes, les corpuscules de Negri jaunes ou vert jaunâtre ; les formations vacuolaires sont d'un rose jaune. Dans celles-ci on peut reconnaître une partie claire et l'autre granuleuse, colorée fortement en bleu.
Par ce procédé, \olpino reconnaît les corpuscules dans la corne d'Ammon trente et une fois sur trentesept animaux; les six autres chiens n'avaient pas la rage (diagnostic par inoculation).
