PROFESSEUR A L'INSTITUT PASTEUR

Hommage de ma reconnaissance.

P. DELANOË.

htips://archive.org/details/IA41534902 0021

Il y à dix ans que Laveran et MEesnic ont, pour la première fois, dans un mémoire publié dans les Annales de l'Institut Pasteur (1), montré que l’immunité du rat, blanc ou pie, à l'égard du 7. Lewisi Kewr, est uniquement d'ordre phagocytaire.

Chez le rat, activement immunisé, ces deux savants ont montré que la destruction des trypanosomes a lieu dans la cavité péritonéale même, c'est-à-dire au lieu de l'injection, sans que les parasites puissent pénétrer dans la circulation sanguine. En observant en goutte pendante et en frottis colorés le liquide péritonéal d'un rat activement immunisé et récemment inoculé, Laverax et Mesnir ont très nettement vu toutes les phases de la phagocytose. Les flagellés, tout en gardant leur pleine mobilité, se piquent sur les phagocytes. Ceux-ci ne tardent pas à réagir et poussent de part et d'autre du parasite deux fins tentacules qui finissent par l'englober en totalité. Le trypanosome, qui, jusqu'à la fin, n’a cessé de se révolter contre la prise du leucocyte, une fois inclus dans le cytoplasme de ce dernier, est très rapidement digéré ; si bien qu'à la coloration, on ne retrouve, la plupart du temps, à l'intérieur des mononu cléaires, que des boules irrégulières présentant les réactions de

(1) « Recherches morphologiques et Expérimentales sur le Trypanosome des Rats (7. Lewisi Kent)», n° du 25 septembre 1991. Voir aussi : Trypanosomes el Trypanosomiases, Paris, Masson, 1904.

la chromatine et qu'il est possible d'interpréter comme les derniers vestiges de la digestion des trypanosomes.

Chez le rat, passivement immunisé, auquel ils injectent successivement dans le péritoine un sérum très actif et des trypanosomes, Lavera et Mssniz constatent la destruction des parasites par phagocytose. Les flagellés, demeurés mobiles malgré l'action agglutinante du sérum, sont englobés en pleine vitalité et cela tout comme chez le rat en immunité active. Ajoutons que Lavera et Mesniz ont très minutieusement mis en évidence que les actions agglutinante et préventive du sérum anti-Lerwisi sont des propriélés nettement distinctes.

Ainsi, dès 4901, Lavera et Mesxir établissent, les premiers, ces deux faits essentiels : l'immunité active et passive du rat à l'égard du 7. Lewisi est fonction d'une stimulation phagocytaire ; les trypanosomes sont détruits en pleine vitalité.

En outre, dans leur mémoire, Laveran et Mesniz montrent que le cobaye est susceptible de s’infecter légèrement à la suite d'une inoculation péritonéale de T. Lerwisi : ils constatent, en effet, pour la première fois, une discrète multiplication des parasites dans le péritoine de cet animal. Avec KanrTHAGK, Duran et Bcanprorp (1), ils établissent que le trypanosome des rats, inoculé dans le péritoine du cobaye, pénètre dans le sang où ils le retrouvent déjà vingt-quatre heures après l’inoculation. Les trypanosomes augmentent d'abord de nombre dans la circulation sanguine jusqu'à atteindre 1/20° à 1/50° des hématies, puis deviennent plus rares et enfin disparaissent. La disparition des trypanosomes du péritoine est due à la phagocylose.

IL ressort de ces expériences de Laveran et Mesniz que la phagocytose joue un rôle capital aussi bien chez le rat, animal réceptif, que chez le cobaye, animal réfractaire, infectés avec le 7. Lewisi. C'est même pour ces auteurs le seul mode de disparilion du parasite.

Levaprri et SEvin (2) montrent en 1905 que l'immunité de la souris et des calfats naturellement réfractaires au T. paddæ

(1) Proceedings of the R. Society, 1. LXIV, 1898, et Hygienische Rundschau, no 24, 1898. |

(2) Comptes Rendus de la Soc. de Biologie, 15 avril 4905, p. 694, t. LVIII.

est une immunité d'ordre phagocytaire. Le trypanosome, avant de disparaître, est susceptible de se multiplier légèrement.

SAUERBECK (1), dans la consciencieuse étude qu'il a consacrée à l’histologie patholugique de l'infection des rats, des cobayes, des lapins et des chiens, par le Trypanosome du Nagana (T. Brucei), considère la phagocytose comme l'arme fondamentale de la défense. Par la méthode des coupes aussi bien que par celle des frottis, Savkrgeck a observé la phagocytose dans la rate, le foie, les ganglions lymphatiques, la moelle osseuse et l'épiploon. 1! a très rarement observé des figures typiques de phagocytosc : il n'a constaté, la plupart du temps, dans les mononucléaires des viscères el dans les cellules qui leur sont propres (cellules de Kupffer pour le foie, cellules endo-alvéolaires pour le poumon et peut-être cellules endothéliales des sinus pour les ganglions Iymphatiques) que des restes analogues à des noyaux de flagellés. Ce n’est qu’exceptionnellement qu'il a pu rencontrer dans les leucocytes «la forme ronde caractéristique avec un noyau et tout autour une couche de protoplasma et la racine du flagelle ».

En ponctionnant le péritoine des cobayes inoculés, depuis vingt-quatre à quarante-huit heures, avec T. Brucei, SAUERBECK a pu constater l'attachement des flagellés aux leucocytes, soit par leur extrémité antérieure soit par leur extrémité postérieure. Les trypanosomes attachés à un seul mononucléaire étaient au nombre de plusieurs, deux, trois et même quatre. SAUERBECK n'a pu constater l’englobement en pleine vitalité des éléments fixés. Il ne nie d’ailleurs pas le processus décrit par Laverax et MEesniz, « puisque ces auteurs l'ont constaté », mais il croit que ce processus doit être très rare. SAuExBecK pense que le trypanosome une fois attaché au leucocyte est d'abord paralysé par un poison que sécrèle le globule blanc. Il perd alors ses mouvements et, lorsque le phagocyte s'apprête à l’englober, il est déjà réduit à l’état de « grumeaux » plus ou moins ronds. Bref, l'originalité de la conception de Sauergeck est que le trypanosome, une fois fixé au phagocyte, est d’abord paralysé par

(4) Zeilsch. f. Hyg. und Inf. Krankheiten, 1905.

BE tree

une sécrétion du globule blanc avant d'être incorporé. « Dans la règle, dit Sauergeck, il se produit d'abord une fixation, puis une paralysie (1) ».

Roper et Varcer (2), dans la rate du rat el du chien naganés (1. Brucei), constatent à l'approche de la mort et surtout après elle, une destruction très accentuée des trypanosomes en dehors des leucocytes. Pour eux, Sauersecx à eu tort de négliger ce phénomène qu’il a vu le premier « pour exagérer l'importance de la phagocytose (3) ». Celle-ci n’a qu'un rôle secondaire. Elle se borne à enlever les déchets des trypanosomes détruits par l’action trypanocide de la rate. Du reste, celle-ci ne fait aucun doute. En mélangeant, entre lame et lamelle, une goutte de sang nagané et une goutte de suc splénique, Roper et Vazrer n'ontils pas constaté la mort rapide des trypanosomes?

Laverax et Tairoux (4) ont critiqué les résultats obtenus par Roper et VaLLeT en ce qui concerne la propriété trypanolytique de la rate. Leurs expériences ont été faites chez des cobayes inoculés avec 7. togolense (virus fort de Martini) et des chiens inoculés avec 7. Pecaudi. Pour Laverax et Tairoux, les frottis faits avec la rate sitôt après la mort ne montrent pas de trypanosomes désintégrés. L'extrait de rate ne jouit d'aucune action trypanocide. Les résultats de Roper et VazLer s'expliquent en grande partie par des fautes de technique (5).

(1) « In der Regel aber wird wohl eine Fixirung und nachfolgende Lähmung den Process einleiten », p. 77 du tiré à part.

(2) Comptes rendus de l'Acad.des Sciences ; 28 mai 1906, 6 août 1906, 29 juillet 1907, et Archives de Médecine Expérimentule, juillet 1906.

(3) P. 479 du Mémoire des Archives de Médecine Expérirmentale.

(4) Comple rendus de l'Acad. des Sciences, 1° et 29 juillet 4907, et Annales de l'Inslitut Pasteur, t. XXI, août 1907.

(5) Nous noterons ici, simplement à litre documentaire, que Jarré (Centr. f. Bakter. I, Orig., 1. LV, f. 6, 6 septembre 1910, pp. 519-527) a montré que les produits d'autolyse de la rate du rat, du lapin et du cobaye, neufs ou naganés, exercent une action trypanocide marquée. Il est, en conséquence, légitime de se demander si, dans certaines expériences faites in vitro, Rongr et VaLLEr n'ont pas eu affaire, à leur insu, à des phénomènes d’autolyse. Cette hypothèse est d'autant plus plausible que les expériences de Roper et VAzLet ont été faites, à Montpellier, en été (p. 481 du mémoire). On sait bien aujourd'hui que les endoferments cellulaires, responsables des phénomènes d’autolyse. ont leur optimum d'action à 38 et 40 degrés. Consulter à te sujet l'excellente revue de L. Lauxoy in Bulletin de l'Institut Pasteur, 1908, t. NI.

Maxwreurez (1), en injectant des 7. Lewisi dans le péritoine de rats immunisés activement ou passivement, a bien vu l’attachement des trypanosomes aux mononucléaires par leur extrémité non flagellée. Ce phénomène n'aurait cependant aucune importance : les trypanosomes, au cours de leurs mouvements, sont susceptibles de s'attacher à tout ce qu'ils rencontrent sur leur passage, globules rouges et bulles d'air aussi bien que leucocytes. Manreurec n’a pas vu l'attachement des trypanosomes être suivi d'englobement. « Une seule fois, il a pu observer, sans aucun doute, un trypanosome mobile, bien reconnaissable, à l'intérieur d’un globule blanc. » A l'examen des frottis colorés, l’auteur n’a vu à l'intérieur des leucocytes que de petits amas, plus ou moins irréguliers, ayant les réactions de la chromatine et qu'il interprète comme des vestiges de trypanosomes. Man- TEUFEL pense qu'il serait possible de rencontrer des trypanosomes intacts à l'intérieur des leucocytes, si la phagocytose était vraiment le mode normal de disparition de ces parasites. En réalité, la phagocytose ne joue qu'un rôle secondaire. Les leucocytes se bornent à enlever les restes des flagellés, dont la destruction relève exclusivement de la propriété lytique des humeurs.

En février 1909, F. Mesxic et E. Brimonr (2) ont étudié le mode de destruction des trypanosomes du Nagana du Togoland, T. togolense Mesxis et Brimowr (3), inoculés dans le péritoine des souris en mélange 2n vitro avec le sérum d’un bouc infecté avec ce virus. Mesniz et Brimoxr ont constaté que la disparilion des trypanosomes pathogènes a lieu chez la souris d’une manière identique à celle du 7. Lewisi chez le rat immunisé. L'englobement du trypanosome du Nagana se fait même plus rapidement que celui du 7. Lewisi ; les exemples de phagocytose se voient plus fréquemment si bien qu’au bout d’une demi-heure, il n’existe plus un seul trypanosome libre dans le péritoine d’une souris qui à reçu « un mélange de 0,20

(1) Arbeilen aus dem Kaïserliches Gesundheilsamle, novembre 1909.

(2) Annales de l'Institut Pasteur, &. XXII, février 1909.

(3) F. Mzsniz. Sur l'identification de quelques trypanosomes pathogènes. Sociélé de Pathologie Exotique, juin 1910.

SRE

à 0,25 centimètres cubes de sérum avec 0,4 à 0,5 centimètres cubes de sang dilué, c'est-à-dire un mélange qui protège à la limite et qui peut mème amener une infection après un long retard ».

Toujours en février 1909, MassaGzra (1) fil paraitre un long travail dont une grande partie est consacrée à l'étude de l'immunité dans les trypanosomiases.

MassacLia commence, tout d’abord, par constater, d'accord en cela avec Laverax et Mesxir, que les sérums des animaux réfractaires (cobaye et lapin) n’ont pas d'action trypanocide sur le 7. Lewisi, soit quand on mélange ces sérums 2x vitro au {rypanosome, soit lorsqu'on les injecte à de jeunes rats en pleine infection sanguine (2).

C'est sur le cobaye que MassacciA poursuivit ses « recherches relatives à la manière dont les {rypanosomes sont détruits quand on les inocule à des animaux réfractaires ». Les expériences de MassaGciA portent sur deux cobayes de 300 et 400 grammes.

Pour Massaërra, le cobaye serait absolument réfractaire au T. Lewisi, qui ne passerait pas dans la circulation sanguine et serait détruit en quelques heures dans le péritoine, à l'endroit de l'injection. En faisant des ponctions abdominales de demiheure en deini-heure, MassaGLra aurait constaté que les trypanosomes ne commencent à être détruits qu'au bout d'une heure et demie à deux heures après le moment de l'injection. Jusqu'alors, les flagellés resteraient en parfaite intégrité. Il y a donc, de l’aveu même de MassaGriA, une phase en quelque sorte latente, qui suit l'injection des parasites, au cours de

(1) Communication faite à la Société médico-chirurgicale de Modène, séance du 13 février 1909.

(2) Massaczra, en se servant de jeunes rats infeciés pour éprouver l'action des sérums des animaux réfractaires, n’a fait qu'imiter Laveran et Mesnir. Ces derniers auteurs disent expressément : « Toutes nos expériences ont été failes avec de jeunes rats de 30 à 125 grammes. Avec ces rats, on a toujours des infections longues el intenses avec trois périodes bien nettes pour l'évolution du parasite. On peut donc, avec la plus grande facilité, reconnaître la perturbation que-jette dans cette évolution parasitaire l'introduction d'un sérum, alors même qu'il n'arrête pas toute infection. » Loc. Cats p. 708.

ps

laquelle ceux-ci demeurent intacts; phase de durée sensible puisqu'elle peut persister deux heures, c’est-à-dire la moitié du temps nécessaire à la destruction de tous les parasites. Pour MassaGzra, le rôle de la phagocytose, chez le cobaye, est sinon nul, du moins très secondaire. Ce sont les trypanoly- ‘sines contenues dans le liquide péritonéal qui détruisent les microbes et nullement les phagocytes. La destruction des trypanosomes à lieu par un mécanisme analogue à celui qui se passe chez les animaux immunisés contre le vibrion de Koch (1). Les leucocytes n'apparaissent dans le champ de la lutte que quand les trypanosomes sont en grande partie détruits. Leur rôle est tout à fait secondaire. 11 se limite à baiayer du péritoine les résidus des trypanosomes. Quant à la lyse des parasites, elle est sous la dépendance exclusive de causes extra-cellulaires.

L'immunité active et passive du rat à l'égard du T. Lewisr serait également pour MassacuiA d'ordre humoral.

Au mois de septembre 1909, Massaccia (2), étendant ses premières recherches, étudia, dans le laboratoire du professeur Laveran, le mode naturel de défense de certains vertébrés à sang froid — couleuvre à collier, tortues, grenouilles (maintenues à la température ordinaire ou chauffées), tritons, lézards — à l'égard du trypanosome du Surra, T. Evansi Sreec, inoculé sous forme de sang de cobaye, de rat et de souris riche en parasites. MassaGLiA ne constate pas la phagocytose : les trypano-

(4) Cette comparaison est faite également par Me Neac au cours d’un mémoire sur « le Cycle évolutif du T. Lewisi et du T. Brucei ». Journ. of Inf Diseases, vol. I, n° 4, 5 nov. 1904, p. 517-543. Voici le passage de Mc NEaz auquel nous faisons allusion : « By injecting trypanosomes (T. Lewisi) into the peritoneal cavity of guinea pigs immunized to this organism, and subsequently examining the peritoneal fluid, Laveran et Mesniz were able to find various stages ofingestion ofthe protozoa by the leucocytes. We have attempted to confirm this by a similar procedure. Instead of phagocytosis, howewer, we could find evidence only of the immobilization and gradual solution of the trypanosomes in the peritoneal fluid. Stains made from time to time showed the protoplasm of the parasites paler than before, until finally il seemed to have dissolved. The process appeared to be quite analogous to that met with in the well-Known Pfeiffer's phenomenon. In other words, the trypanosomes disappear as the result of the presence and action of cylolytic agents rather than by phagocytosis. » P. 526-527.

(2) Comptes rendus de l'Acad. des Sciences, 13 septembre 1909, p. 516.

somes sont très rapidement détruits en dehors des leucocytes.

Levanrrr et Morermiccx (1) ont dernièrement appelé l’attention sur le mécanisme de la phagocytose.

En mélangeant, dans un tube à essai, 1 goutte de sang de souris naganée (7. Brucei), des globules blancs de cobaye neuf et du sérum trypanolytique, préalablement inactivé, de cobaye saigné au moment de la crise (Roper et Vazrer, MassaGzra), ces auteurs constatent que les trypanosomes, après s'être fixés sur les leucocytes, sont finalement englobés.

L'attachement des trypanosomes aux leucocytes est un phénomène d'ordre physico-chimique, dans lequel la vitalité des leucocytes n’est pour rien. Il se produit aussi bien avec des leucocytes tués (par séjour prolongé à 0 degré, par congélations et décongélations successives, par chauffage à 45 degrés, 35 degrés et mème 60 degrés) qu'avec des leucocytes vivants.

Cet attachement n'en est pas moins spécifique. Mélangés à une bouillie d'organe (foie ou rein), les trypanosomes se fixent exclusivement sur les leucocytes contenus dans cette bouillie.

Le trypanosome, au cours de l’englobement, ne resterail mobile qu'aulant que la région du noyau n'est pas atteinte, mais, « 4 partir de ce moment, 1l se meut de moins en moins, finit par S'immobiliser et devient transparent (rryPANOLYSE) avant qu'il soit totalement phagocyté (A) ». Levaorrr et Murermicn pensent que les leucocytes vivants, excités par l'attachement de l’objet phagocytable, sécrètent un poison microbicide destiné à imprégner le trypanosome sensibilisé et à le détruire, avant qu'il soit complètement incorporé. Cette sécrétion aurait lieu au moment même de l'acte phagocytaire, car il a été impossible à Levaorn et à Murermirca de retirer des globules blancs une substance capable de détruire in vitro les trypanosomes sensibilisés.

(1) Comples rendus de la Soc. de Biologie, séance du 18 juin 1910, & LXVII, p. 1079.