Deutsch. med. Woch,^ I0i3, n
3. Société de biologie^ 5 fév. 1910, aa juil. 1911, i3 juil. 191a, et Annales de l'InS' iitut Pasteur^ avril 1914.
particulière aux sérums des animaux hypervaccinés, nous faisons le mélange suivant :
ao cent, cubes de sérum de bovidé hyperimmum ; I cent, cube d'extrait bacillaire aqueux, nonpeptoné ^ (^0* 9 cent, cubes d*eau salée physiologique.
Après I heure de séjour à 87® et 18 heures de tepos à la glacière il se forme un précipité. On agite et on divise le mélange en deux portions égales A etB. L^une, A, est centrifugée. On décante le liquide surnageant et on émulsionne le précipité dans un volume d'eau salée égal au volume de liquide décanté.
Ce précipité de A émulsionne, le liquide décanté de A après cenlrifugationet la portion Bnon centrifugée vont, à des dilutions différentes, nous servir à efiTectuer des réactions de fixation et nous les emploierons soit seuls, soit en présence d*un sérum de cheval dont la teneur en anticorps a été préalablement déterminée en présence de l'extrait bacillaire aqueux B*.
L'expérience montre que toutes les réactions de fixation effectuées avec le précipité de A émulsionne, avec le liquide décanté de A après centrifugationetavec la portion B non centrifugée, — respectivement seuls ou en mélange avcco ce. 5 du sérum de cheval dont nous connaissons la valeur en anticorps, — sont négatives.
L'antigène jB*, mis en contact avec le sérum de bovidé hyperimmum, a perdu la propriété de fixer Talexine. C'est donc que ce sérum renjerme une substance {inhibitrice) qui empêche ou masque la réaction de fixation.
Nous avons cherché à déterminer Tinfluence que pouvait exercer, sur la mise en évidence de Tinhibitrice, l'ordre dans lequel les divers éléments de la réaction de fixation sont placés. Les mélanges suivants ont donc été effectués, chacun avec des doses variables de o ce. i à o ce. 6 d'alexine fraîche diluée au quart :
A. — o ce. 5 de sérum anticorps de cheval + o ce. 5 d'antigène B* dilué à I p. 4o + o ce. 5 d'^au salée physiologique -|- alexine.
B. — o ce. 5 d'antigène B^ dilué à i p. 4o + o ce. 5 de sérum de bovidé inhibant dilué à i p. 10 + o ce. 5 de sérum anticorps + alexine.
C. — Même expérience avec un sérum de bovidé sain, remplaçant celui de bovidé hyperimmun inhibant
D. — o ce. 5 d'antigène B^ dilué à i p. 4o + o ce. 5 de sérum de cheval anticorps (3o minutes à 87 degrés) -|- o ce. 5 de sérum de bovidé inhibant dilué à i p. 10 + alexine.
E. — Même expérience avec sérum de bovidé sain remplaçant le sérum de bovidé hyperimmum inhibant.
I. Raopelons que cet extrait bacillaire s'obtient par macération à 65o de 5 grammes (le bacilles secs dans un litre d*eau. On filtre après l\^ heures, on concentre à 100 ce. Cet antigène, que nous appelons B^, contient a p. 100 d'extrait sec.
LES « ANTICORPS » TUBERCULEUX
F. — O ce. 5 d'anligène B* dilué à i p. 4o + o ce. 5 de sérum de cheval anticorps + alexine (une heure à Sy degrés) -|- o ce 5 de sérum de bovidé inhibant dilué à i p. lO (3o minutes à 87 degrés).
G. — Même expérience avec sérum de bovidé sain remplaçant le sérum de bovidé inhibant.
On s'est préalablement assuré que le sérum de bovidé inhibant, chauffé ou non à 58 degrés, ne donne pas d'hémolyse en présence du sérum hémoly tique, ce qui est d'ailleurs vérifié par rexpérience F ci-dessus.
Dans cette série d'expériences, tous les tubes des séries B etD sont hémolyses. Tous les autres ont fourni une réaction de fixation positive.
Donc, tant que F antigène B* el les anticorps libres du sérum de cheval n ont pas fixé V alexine y le sérum inhibant empêche la fixation et, quand celle-ci s'est effectuée, le sérum inhibant ne peut plus remettre falexine en liberté.
Précisons maintenant le temps de contact nécessaire pour que cette fixation de Talexine soit définitive :
Dans une première expérience, nous déterminons, à des temps variables, la fixation de l'alexine par le complexe antigène B* -|- sérum de cheval anticorps, en ajoutant le sérum hémoly tique et les hématies aux temps indiqués sur les tableaux.
Dans une seconde expérience, après les mêmes temps de contact de l'antigène, des anticorps et de l'alexine, nous ajoutons le sérum inhibant, le sérum hémolytique et les hématies.
Enfin, dans une troisième expérience, après addition du sérum inhibant, aux temps indiqués, au complexe antigène + anticorps + alexine, nous portons une heure à 87 degrés, puis nous ajoutons le sérum hémolytique et les hématies.
Exp. I.
Pas de sérum inhibant. La fixation,
— nette déjà après 10*, augmente ensuite
— avec le temps.
Alexine
Temps
au 1/4
5* 10' io'
0 ce. I
0 ce. 3
occ. 3
0 ce. 4
Alexine
Temps
tu 1/4
0 ce. I
0 ce. 2
occ. 3
occ. 4
l'iSFICTIOII TUBimCCLEUSt
L'addition de sérum inhibant ne remet pas en liberté Talexine fixée.
L'hémolyse correspond à celle que produit l'alexine restée libre dans l'expérience I.
au i/4
ao
o ce. I
ooc. s
o oc. 3
ooc 4
40S PROCESSUS JÛE DÉFENSE ET DJA aNOSTlC
Exp. m.
A'iexine Temps
L'addition ée «sërmin ink^Mmi «prêt taktmimic tfmp^cbt if siAmt mains ia fix«tiDiiq»eia éarèt/êmamwâmct jaëiila Ue 4e l*akiiae a^rec . TiMitâ^km -«fc Jba <ajiticor^ a été fAus kngue.
Quand la fixAlion t»l ootmsBeneée^ ie Bértioa iikbîbaat Ae j»eut flos TteBAraver.
I^or pbsttrver sûpeaieni Jes pkéaoHàèikes d'înliibitioiL, «aa deitl£NH jours faire agir le sérum inhibant direclenient sur l'antigène avaat JWldition dm «érara asiiioorps «t -de lalexiAe* Cellô^ doU ûOertfosir^tti dernier lieu.
€oin{MraUveAfienft ayac ii€s «énuAS de ibowléfi kjpeskawMàS aous avons ^ïiulié divers «émins Banaaux ou iliéra{)e«tÂfue6 {«énms 4e bovidés «aÛM, «éruiM •eifcisU'eptooooûîifao, «niîïipbténque, aaiiléianique, anlivenimeux, antipesteux) et nous avoBaconstaiéqae la p»#{M>îé(é infaibaoke ne ae ^Kmcùtdue q«ae chns k pramer. Cette fDopdéké •aat-dacic spëdfiqoe. £lleB''«xîated4iiJ]leur6 pas aeuleoionl dans les aéruaas .4e bovidés hyperimmuns, car nays4*avaDs4rouvéeégal6iiiaat dans oertaias cch«DtilkiBSrdeBéinifns4e chevaux vaccMiés parVAA.Lto (d'AJIar^ «tpar Ru^pnr (Ae Naatas^. EUe exiaieaiiasi ckez certains auiiies animaïuL at on lavenoûotre {Mrfois,quoîque«x<%pttoaaalteBiâat,<diâzllui«aia talisr» culeux (Calmette et Massol, CAULFEiuaei Beaivt) K
Nous avons pu constater que le pouvoir inhibant du sérum des bovidés hyperimmuns s'accroît immédiatement après les injections intraveineuses de bacilles. Il atteint son maximam après xûnq à six jours, puis s'abaisse sans cependant disparaître tout à fait, même si rammal reste deux mois au repos.
Les l>ovldés reconnus tuberculeux à l'abattoir n'ont généralement pas de sérum inhibant, ^ous n'en avons trouvé qu'un seul dont l'activité fût manifeste. Ce bovidé, porteur de lésions chroniques très étendues, était d'ailleurs en excellent état apparent.
Le sérum de$ petits animaux de laboratoire (cobayes, lapins) infectés par voie sous-cutanée, ne possède pas non pltis de propriétés irrttibî- Irices.
Nos expériences ont montré que la substance inhibante agit sur les antigènes tuberculeux quels qulls soient, y compris les bacilles. Elle masque aussi bien les anticorps contenus dans les sérums de même
