I. Académie des sciences, 4 juil. 1910. a. W., 8nov

L INFECTION B4CILLAI&E

Se2 IMMUNITÉ NATURELLE ET PROCESSUS DIMMUNISATION

soit par injection sous-culanée, soit par culi, ou ophtalmo-réaction, soil même par inoculation intracérébrale aux cobayes tuberculeux.

Il n'est pas davantage constitué par de la tuberculine sensibilisée car, aux doses de précipité correspondant à la tuberculine initiale, il n*ab* sorbe pas Talexine et ne fournil pas la réaclioa de Bordet-Gf?îgou.

Par contre, le même sérum, traité par la quantité de tuberciiline susceptible de produire le maximum de précipité, ou par des quantités moindres, et dont on a séparé le précipité par centrifugation, contient à peu près toute la tuberculine initiale. On obtient, avec des dilutions de ce sérum débarrassé du précipité, les mêmes réactions tuberculi niques {sons-cabanée, cuti ou ophlalmo, toxicité intracérébrale) qu'avec les dilutions de tuberculine aux mêmes titres. Donc // ne renferme pas (V antiïuberculine .

c) Anticorps.

La recherche des aniicùrps dans les sérums antituberculeux parait, en l'état actuel de nos conn&issaDces, inGniment plus intéressante pour la détermination de leur valeur respectàve, car un grand nombre de travaux récents tendent à faire admettre qu'il existe un parallélisme assez étroit entre la formation de ces anticorps dans le sang des sujets tuberculeux et Tintensité des processus de défense de l'organisme contre rinfection bacillaire.

On sait, depuis les expériences qne j'ai publiées sur ce sujet avec L. M.vssoL S qu*îl est relativement facile d'obtenir des sérunis riches en anticorps tuberculeux en injectant, soit à des chevaux, soit à des bovidés sains, des doses répétées et espacées d extrait bacillaire. Toutefois, la production de ces anticorps est liée à la manière dont on pratique les injections : ainsi un cheval tjeuf reçoit deux doses successives de 20 centimètres cubes d'extrait bacillaire (contenant 2 % d!extrait sec), à douze jours d'intervalle : les anticorps apparaissent brusquement abondants dans le sérum de la saignée laite le douzième jour après la dernière injection. Si l'on continue les injections d'extrait bacillaire à pins haute dose (de 4o à 100 ce.) répétées aux mêmes intervalles, les anticorps disparaissent totalement et il ne s'en produit plus par la suite.

Par contre, si Ton injecte à un autre cheval seulement de petites doses d'extrait bacillaire (2 ce. dilués dans i ce. d'eau physiologique) répétées quotidiennement pendant 20 jours, l'animal fournit, dès le 2*" jour après k dernière injection, un sérum beaucoup pins riche en anticorps que celui traité dans les conditions précédemment indiquées.

Il est essentiel de bien préciser les conditions d'obtention de la réaction de déviation du complément avec les divers antigènes (tnbercn-

I. Sociéié de biologie, i3 nov. 1909 ; i5 janv., 5 fév. 1910 ; 22 juil., 26 oct. 191 1 ; 6 janv , 27 avril, i3 juil. 19 12.

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liaes, extraits bacillaires, bacilles, etc.) et les anticorps tuberculeux. Or nous avons établi que la quantité d'alexine fixée est sensiblement proportionnelle aux quantités d'antigène et d'anticorps mis en présence.

L'anticorps ne doit jamais, dans un© réaction, se trouver en excès par rapporta l'antigène, sinon il n'y aurait plus de fixation.

En étudiant les sérums d'animaux en cours de vaccination, nous avons observé que certains d entre eux acquièrent la curieuse propriété d'empècber la réaction de fixation de se produire, autrement dit de Y inhiber t lorsqu'on introduit une petite quantité de ces sérums dans un mélange antigène -f-anticorps,aYantd*ajouterralexine. La propriété inhibitrice ne se manifeste pas si l'on introduit le sérum inhibant dans le mélange antigène + anticorps avant d'ajouterralexine(CAa/>. XXXVII),

Si, dans une réaction de fixation effectuée en présence d'un sérum inhibant, on fait varier successivement les quantités d'antigène (extrait bacillaire) ou d'anticorps, en employant uniformément la dose de o ce. o5 de sérum inhibant, on voit que l'excès d'anticorps n'exerce aucune influence. Par contre, au fur et à mesure que la proportion d'antigène s'accroît, la réaction de fixation se manifeste de nouveau et l'inhibition est masquée.

Nous avons d'ailleurs expérimentalement démontré que les sérums inhibants contiennent eux-mêmes des anticorps dont la présence est masquée par la propriété inhibilrice. L'inhibitrîce masque donc l'existence des anticorps jusqu'à ce que son affinité pour l'antigène soit satisfaite, et cette affinité est plus grande que celle des anticorps pour lantigène. Il y a là un phénomène comparable à celui qu'on observe avec les antitoxines diphtériques par exemple, dont l'affinité n'est pas la même vis-à-vis de la toxine que vis-à-vis des ioocones et des toxo'ides

d*EHRLIGH.

Ces constatations nous ont déterminé à diviser les sérums antituberculeux en deux groupes :

1° Ceux qui renferment uniquement des anticorps ; ces sérums donnent la réaction de Bordet-Gengou en présence des plus faibles doses d'antigènes. Ajoutés en grand excès à la même dose d'antigène, ils ne modifient pas la fixation.

2** Ceux qui renferment à la fois des anticorps et Cinhibitrice, Ces sérums ne donnent la réaction de Bordet-Gengou qu'en présence de doses d'antigène élevées. Employés en excès, ils ne dévient pas le complément.

Les sérums à anticorps, mis en contact avec des bacilles, ne se comportent pas tous de la même manière : les uns (ceux du premier groupe) fixent leurs anticorps indifféremment sur l'anligène soluble du milieu ou sur celui adhérent aux bacilles ; les autres (ceux du second groupe) fixent exclusivement leurs anticorps sur les bacilles vivants ou morts.

par exemple sur les émulsions de bacilles résiduels de la > préparation des extraits bacillaires aqueux, ou sur TanligèDe extrait par macération au bain-marie pendant 48 heures à 65** des bacilles secs dans une solution de 10 p. 100 de peplone de Witte.

La technique des réactions de fixation ayant été décrite précédemment {voir Chap. XXXVU), je rappelle seulement ici que l'attention des expérimentateurs doit être constamment attirée, d'une part sur la nécessité d'employer toujours, pour chaque réaction, une dose de sérum hémolytique lo à 20 fois supérieure à la dose minima nécessaire pour produire l'hémolyse et, d'autre part, sur l'opportunité de n'employer que de l'alexine titrée immédiatement avant l'expérience.

Comme antigène on peut utiliser la tuberculine brute de KocH ; mais celle-ci contient des substances inactives qui gênent les réactions de fixation,

La tuberculine purifiée par précipitation à l'alcool est inutilisable. Il en est de même des bouillons filtrés fet évaporés après séparation des bacilles.

L'extrait bacillaire peptoné B 2, ou les bacilles secs tués par ébulHtion à 100** etémulsionnés à i p. i. 000 dans Teau physiologique, représentent les meilleurs antigènes. Ils permettent dans tous les cas de fixer les anticorps que renferment les sérums, alors même que ceux-ci contiendraient des inhibilrices.

Lorsqu'on a préparé et titré comme il convient les diflférents éléments nécessaires à la réaction de fixation, la recherche des anticorps et leur détermination quantitative peuvent être calquées sur celles des antigènes. L* unité d* anticorps contenue dans un sérum peut être représentée par la quantité d'anticorps capable de dévier une dose minima d'àlexine.

Les sérums dits antituberculeux dont nous avons parlé ci-dessus ne renferment pas tous des anticorps. Quelques échantillons de ceux que nous avons étudiés n'en contenaient aucune trace. D'autres, tels que celui de Ruppell et Rickmann, en fournissaient jusqu'à i5.ooo unités par centimètre cube au titrage ; celai de nos bovidés hypervaccinés donnait 2.5oo unités ; celui de Vallée 2i3 unités seulement, etc.

Or, lorsqu'on étudie expérimentalement l'action thérapeutique de ces divers sérums sur les animaux de laboratoire et aussi sur les bovidés, on constate que parfois ceux d* entre eux qui sont le plus riches en anticorps hâtent l'évolution de la maladie au lieu de la retarder. Peut-être ces efl'ets défavorables résultent-ils de ce fait, que j'ai constaté avec C. GuÉRiN, qu'ils mobilisent les bacilles dans l'organisme, puisqu'ils déterminent en partie Vexpulsion de ceux-ci par la voie hépatico-intestinale.

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