X.Berlin, îdin, Woch., 1899, p

a. Zeitsch, /. Hyg.^ LU, p. 110-127. 3. Académie de médecine, Paris, 1903.

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que renferment les milieux de culture et qui peuvent être par ellesmêmes susceptibles d'exercer une action nuisible (peplone, sels, cires et graisses). Le procédé le plus reoommaudable consiste à diluer un poids déterminé de tuberculine brute dans cinq parties d'eau distillée et à faire tomber ce mélange par petites portions, en agitant constamment, dans 20 volumes d'alcool k gô*.

On recueille le précipité sur un filtre en papier Berzélius, on le redissout dans un volume d'eau correspondant à la quantité de tuberculine mise en œuvre et on précipite une seconde fois par 20 volumes d'alcool. Ce second précipité, séché à l'étuve, fournit une masse spongieuse, d'un blanc grisâtre, très soluble dans l'eau et très toxique. I milligramme de cette poudre produit les mêmes effets que 5o milligrammes de tuberculine brute. Le rendement oscille entre i à 2 gr.^ p. 100. Cette tuberculine précipitée, redissoute dans l'eau glycérinée à 5o p. 100, permet d'obtenir des solutions transparentes, de facile conservation, stérilisables à Tautoclave à 120^ et, très stables. Mais elle renferme encore beaucoup d'impuretés qu'on peut éliminer en grande partie par des redissolutions et des reprécipila lions successives.

On obtient des produits plus faciles à purifier en parlant de cultures en milieux liquides sans peptone, tels que celui dont j'ai déterminé avec L. Massol la composition (v. chap. 11), que l'on concentre dans le vide à 45° et seulement jusqu'à réduction au cinquième du volume primitif. On précipite ce liquide par 20 volumes d'un mélange à parties égales d'alcool à 95° et d'éther sulfurique ; on redissout le précipité dans un faible volume d'eau, et on le soumet pendant 6 à 12 heures au plus à la dialyse à l'eau distillée courante, froide, sur parchemin animal ; puis on précipite une dernière fois par 10 volumes d'alcool absolu. La poudre blanche (r«6erc«///î^ CL) qu'on en retire après dessiccation est encore dix fois plus active que celle fournie par la précipitation alcoolique de la tuberculine ancienne. Le rendement est d'environ o gr. 75pour un litre de culture.