Société de biologie, 7 avril

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tubercuHne précipitée) chez les cobayes tuberculisés depuis plus de quarante jours. Les symptômes d'intoxication observés sont toujours les mêmes: hoquet, convulsions, asphyxie presque immédiate).

En Allemagne, le titrage officiel des tuberculines commerciales est régulièrement effectué par les soins de l'Institut de médecine expérimentale de Francfort, autrefois sous la direction de P. Ehrlich. On y emploie la méthode d'Orro * qui consiste à prendre, par exemple, 5o cobayes de même poids (35o à /|00 gr.), dans le péritoine desquels on injecte G mgr. 5 d'une culture en bouillon âgée seulement de 12 à i4 jours, bien émulsionnée dans l'eau physiologique (i cc.de liquide pour I mgr. de culture pesée à l'état frais). Ala fin de la troisième semaine on s'assure, par l'autopsie de 2 à 4 cobayes, que la tuberculose s est bien développée et, dans l'affirmative, on en éprouve 2 a 4 autres avec o ce. 3 et occ. 5 d'une tuberculine étalon {Slandart-tuberkulin). Ces doses doivent suffire à tuer les animaux par voie sous-cutanée. Si occ. 5 ne tue pas, c'est que la tu berculisati on n'est pas assez avancée et l'on doit attendre quelques jours pour répéter l'expérience préliminaire. Lorsque celle-ci a donné des résultats positifs, on divise les cobayes en deux séries parallèles, dont l'une reçoit des doses de tuberculine-étalon de o ce. o5, 0,075, 0,1, 0,2, 0,3, et l'autre les doses correspondantes de la tuberculine dont il s'agit de mesurer la toxicité. La mort des cobayes doit se produire en moins de 2/1 heures et on doit trouver à l'autopsie les lésions caractéristiques de l'intoxication par la tuberculine. La dose habituellement mortelle de la tuberculine-étalon dans les conditions susindiquées est de o ce. 070.

Plusieurs expérimentateurs, en particulier Detre, Spengler, ont cru trouver des différences de toxicité dans les tuberculine^ suivant qu'elles élaient préparées avec des cultures de bacilles d'origine humaine ou bovine. Weber et Dieterlen *, au « K. K. Gesundheitsamt » de Berlin, ont fait de nombreuses expériences pour juger celte question. Leur conclusion, entièrement conforme à celle à laquelle on était arrivé des 1891 à l'Institut Pasteur de Paris, est que, sur les bovidés et sur les petits animaux de laboratoire, ont peut employer indifféremment les deux tuberculines, pourvu qu'elles aient le même équivalent de toxicité mesuré, par exemple, comme il a été dit ci-dessus, par voie inlracérébrale chez les cobayes tuberculeux infectés avec la même quantité de bacilles humains ou bovins et arrivés au même stade de la maladie (environ 4 ou 5 semaines après inoculationsous-cutanée de i centigramme de bacilles,, pesés à l'état frais).

La tuberculine de bacilles aviaires possède exactement la même action réciproque, mais elle est toujours plus faible.

I. Arbeilen aus demKgL Institut/, experimentelle Thérapie^ 1906, fasc, a. Tub. Arb, a. d, K, Gesandh., 1910, fasc. 10, p. 217.

'cFFE!fEAu * Ont bien étudié l'action toxique des tuber- ►réparées avec des milieux sans peplone. Ils ont cons- )roduit, provenant de cultures non chauffées, concen- , dialysées et précipitées, le lapin succombait après brale de o gr. 02. Pour le cobaye sain la dosé mortelle jb (inlracérébrale) et, pour la souris, de o gr. 10 par Les cobayes tuberculisés depuis 4 semaines succôm- KK>i (intracérébrale.)

Imetlre que les poisons tuberculeux {endo et exoioxines), ues pour les animaux infectés de tuberculose^ le sont - sans cependant être tout à fait inoffensifs, — pour les

) sensibilité, constatée d'abord par R. Kogh, des à la tuberculine, se vérifie chez toutes les espèces découverte a été la base d'innombrables applications, ^quelles nous aurons à nous étendre plus loin, — au pronostic et au traitement de l'infection lubercu-

\ aussi, dans d'autres chapitres (xxxv,xxxvi et xxxvii). siologiques des tuberculines, ainsi que leur aptitude à ;t à provoquer dans l'organisme des sujets sains ou mation d* « anticorps » ou de substances défen-

, nous ne devons envisager que les divers modes d'obulines et les principaux caractères présentés par elles, înls produits qui en dérivent.

lunrs DÉRIVÉS de la tuberculine de koch.

ux de R. Kocii, on a cherché, comme je l'ai dit, à iline, mais malheureusement aussi, sous l'empire de )rdre commercial, on a préparé une foule de substances :ins et aux malades sous des dénominations variées et [iventeurs attribuent des avantages qui sont loin d'être juement établis. Aussi me bornerai-je à ne menlîonqui présentent quelque intérêt pour l'expérimentateur

NE TR. — Proposée par R. Kogh - en 1897, ^^^ tenue en broyant finement, dans un mortier et avec des bacilles tuberculeux desséchés dans le vide. Ces sut triturés, sont ensuite émulsionnés dans l'eau disfugés pendant 3o à 45 minutes à 4.000 tours à la

r, 21 mars igoSei 6 (év, 1909.

ich.t 1897, n" i4.

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minute. La partie liquide, opalesceate, qui surnage, renferme une partie des endotoxines bacillaires. Elle constitue la préparation TO, On la décante. Le résidu boueux, refoulé au fond du tube, est alors desséché, broyé, repris par Teau, centrifugé et rebroyé de nouveau à plusieurs reprises jusqu'à ce que la centrifugation n'en sépare plus de bacilles intacts. Ces divers résidus de trituration sont réunis, additionnés de glycérine à 20 p. 100 et forment la TR, émulsion des diverses substances qui entrent dans la constitution des corps microbiens, i ce. correspond a environ 2 milligr. de substance sèche provenant de 10 milligr. de bacilles également secs. On fabrique cette tuberculine à l'usine de produits chimiques de Hoechst, prèsFraacfort-sur-le-Mein.

IJ. TUBERCULINE BE. — En 1901 , R. Koca * a proposé de lui substituer une préparation nouvelle, présentée sous le nom de Neutuberku- Un-BaziUenemulsion ou BE, obtenue par mélange d'une émulsion de bacilles, soit humains, soit bovins, préalablement desséchés, puis très finement pulvérisés. L'émulsion est titrée à i p. 200 dans Teau distillée glycérinée à 5o p. joo et elle n'est pas centrifugée. On en fait des dilutions avec de l'eau salée physiologique, en exprimant le titre par la teneur en bacilles, et en partant de cettô base que i cent, cube du produit brut initial renferme 5 milligr. de poudre bacillaire.

in. TUBERCULINE AF (ALBUMOSEFRCI) DE R. KOCH. Cette tuberculine offre cette particularité qu'à Tencontre de l'ancienne tuberculine elle est obtenue au moyen d« cultures faites sur des milieux qui ne contiennent ni viande, ni peptones. Pour la préparer on se sert des milieux minéraux, — celui de Prosk.auer et Begk (modifié par R. Koca) par exemple (Voir chap. ii), — dans lesquels la substance ajoutée est représentée par de Tasparagineet par des sels ammoniacaux. Lorsque les cultures sont développées, ce qui sxîge environ deux mois, on les tue par chauffage à 60** répété deux jours de suite pendant deux lieures et on les filtre Le liquide, après avoir été concentré au dixième par évapocation dans le vide, est additionné de o,5 p. 100 d'acide phénique pour garantir sa conservation, et on s'assure, par l'inoculation sous-cutanée à an certain nombre de cobayes, qu'il ne renferme plus de bacilles vivants. iVprès cette vérification, le produit peut être employé au traitement des malades. Il semble, d'après les cliniciens qui l'ont expérimenté, qu'il soit en général mieux toléré (G. Jochma^n et R. Mc£LLEas) ^ ; mais le sérum des sujets qui le reçoivent ne s'enrichit pas sensiblement en anticorps, et ces sujets restent sensibles à la tuberculine ordinaire, tandis qu'ils supportent mieux dans la suite les injections d'émulsions de bacilles.

i.Dealsch. med. Wo:^h,, 1901, n» 48.

2. /(/., i3 juiL iSjii,^ p. 1297, et Verôjfeatl. d. Roltert Koeh SUflung^ fasc. 3,

Au point de vue chimique, celte tuberculine, provenant d*un milieu exempt d'albumines, présente seulement avec moins d'intensité les mêmes réaction^ des matières albuminoïdes que celle préparée avec le bouillon ordinaire. // s*est donc formé des matières albuminoïdes pendant la culture, et une grande partie de celles-ci provient de Taulolyse des bacilles.

Dans leurs recherches sur les tuberculines sans albumines, E. Lcew- ENSTEiN et E. PiCK. ^ n'ont pas trouvé, au produit qu'ils ont obtenu, toutes les réactions caractéristiques des matières albuminoïdes. Leur tuberculine, préparée sur un milieu à based'asparagine, de lactate d'ammoniaque, de phosphate de soude, chlorure de sodium et glycérine, précipite cependant par l'alcool, par le tanin acétique et Tiodure double de mercure et de potassium en milieu chlorhydrique ; elle est dialysable et détruite par la digestion pepsique ou trypsique. Elle a donc plutôt les caractères d'un polypeptide.

IV. TUBERCULOCIDINE DE KLEBS. — Klebs 2 traite la tuberculine par l'alcool, puis redissout le précipité dans Teau et fait agir sur cette solution un mélange d'alcool, de chloroforme et de benzol pur. Ces dissolvants éliminent la plus grande partie des impuretés. Le produit ainsi recueilli est desséché à l'étuve à bè"". On le reprend par loo ce. de glycérine phéniquée à o,5 p. loo et, après une dernière (iltration, on obtient une substance soluble dans l'alcool, dont la conservation est indéfinie et qui représente environ 5 p. loo de la tuberculine primitive mise en œuvre.

Cette préparation, dépouillée d'après Klebs des principes alcaloïdiques auxquels sont dus les efifels nuisibles de la tuberculine brute, exercerait une action spéciale sur le bacille qui se trouverait en quelque sorte « vacuolisé ».Elle n'est d'ailleurs que très faiblement toxique. Les cobayes et les lapins sains en supportent i ce. sans malaise, et elle est très bien tolérée par les malades, à des doses quatre ou cinq fois plus fortes- que l'ancienne tuberculine. D'autre part elle offrirait l'avantage de pouvoir être administrée par voie stomacale. Turban en a fait usage autrefois dans ces conditions à Davos ; ses malades en prenaient quelques gouttes le matin, à jeun, et il en obtenait des effets favorables. Mais depuis longtemps déjà elle n'est plus employée.