PROCÉDÉS DE RECHERCHE ET DOSAGE
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à I. — RECHERCHE DE L'UROBILINE FR
Mai PROCÉDÉS CHIMIQUES.
Réaction de fluorescence. Tr. C'est la LR la plus ancienne et la plus communément
employée. Elle a été indiquée par Jaffé. L'urine # urobilinique, récemment émise est acide, de colo- ‘ration rouge foncé. Elle ne présente pas la dichroïcité particulière de l’urobiline. Vient-on à l’addi-
Dr tionner d'un alcali, ou devient- elle spontanément
4 ‘alcaline par fermentation, la coloration change.
Elle est rosée à reflets verdâtres. Le chlorure de D zinc ne fait qu augmenter ce commencement de A fluorescence. à Pour l'obtenir on se contentait autrefois d'ajouter ni à
pe chlorure de zinc ammoniacal à l'urine. Pour se
débarrasser des corps étrangers, Riva eut l'idée
de recueillir préalablement le pigment dans l'alcool amylique, et d'opérer ensuite sur cette solution. En \ 4 }
réalité il faut avouer qu'il est très difficile d'ob- LS
ee “ " À RL $
tenir une belle fluorescence verte. Le nombre des procédés proposés pour modifier la méthode primitive est une preuve. ” S Méthode de Riva. — Dans un verre à pied on ‘agite fortement quantités égales d'urine et d'alcool amylique. On laisse reposer, puis on décante LES cool qui s’est séparé de l'urine, et on ajoute quel- 70 ques gouttes de la solution de chlorure de ne (1). À ammoniacal. La fluorescence apparaît s'il A a de.
je LA lorobine
que, et nous pensons qu il faut tenir compte seulon de la fluorescence rapide. Avec. presque toutes les urines en effet, si l’on abandonne pendant
“Ne Un cértanr temps à à l'air l'alcool amylique qui a servi
EE « La: fluorescence doit être immédiate ou pres: |
à les traiter, on voit se produire une fluorescence légère qui nous parait tenir à ce que Palcool amy. E lique a dissous le chromogt ène contenu dans l "urine, “6
lequel s’est oxydé sous l'influence de l'air et. de 04
la lumière (2) ». A défaut d’alcool amylique, o On 24 peut encore recueillir Furobiline avec de l'alcool
ordinaire, de l’éther : acétique, ou tou autre dissol. vant. ; ‘ps | \ 1
(1) Le chlorure de zine forme avec l'ammoniaque plusieurs. Te es sons, celle qu'on emploie ici répond à la formule ZnCl24 (AzH#) H20.On l’obtient en versant de l CHROME dans une solution concentrée , . chaude de chlorure de zine, jusqu à redissolution du pr écipité formé. Par . ù refroidissement il cristallise en paillettes. Les eaux mères contiennent UD s autre chlorure Ar?HZnCl?. La solution de chlorure de zinc FPS doit être étendue et contenir un excès d’ ammoniaque. re
PTT (2) GizBerT ET HERSCHER. — Presse méd. 3 sept. 1902. Tor #.
4 Bocédé Mer letti (1). — On ajoute un centimètre
on de solution alcoolique de chlorure de zinc à re 0 à l'extrait chloroformique de 5 centimètres cubes d'urine alcalinisée avec cinq gouttes d’ammoniaque. Ce procédé est presque identique à celui 4 de. Katz (2) qui év apore le chloroforme et fait agir sur le. résidu le chlorure dé zinc en solution | ammoniacale. ge É Procédé Nencki BE TRE réactif de Nencki, préparé en dissolvant 1 gr. de chlorure de zinc dans 100 d'alcool absolu, et en ajoutant de Pam- 4 ue . moniaque jusqu'à dissolution du précipité formé, 2 permet, d’après Merletti, d'obtenir plus sûrement la fluorescence que par le procédé précédent.
__ZLoja, de son côté, affirme qu'on l’obtient mieux en ajoutant l’ammoniaque isolément à cause des 4 substitutions possibles avec les composés métalli- | ques.
hrocédé Oliviero (4).— Cet auteur propose le réactif suivant pour la recherche rapide de lurobiline.
Chlorure de zinc sec ........... os RO DT:
€ Ammoniaque q- s. pour dissoudre soit 30 gr. Alcool à 90°........... SERRE MELE 80 gr.
Hther:acétique:::.2, #11. A DES 20 gr
Pour l'usage, dans un tube à essai verser 3/4 d’u-
(4) Rivista Veneta di Sc. medische, 1903,
. (2) Karz. — Wiener med. Woch. 11 juillet 1891.
- (3) Zora. — Arch. ital de biologie XIX p.495 et arch. ital de clin. med. XXXII. 1893.
(4) Un. Pharmac. 1904.
ne rine et 1/4 de réactif. Agitez, filtrez EaÉ PURE le À.
part des liquides. physiologiques et des exsudats.
précipité des phosphates terreux. La solution GET
trée est limpide, dichroïque et très fluorescente,
s’il y a de l'urobiline, le spectroscope. permet de à spectre d'absorption caractéristique.
D'après l’auteur, ce réactif très sensible permettrait
de retrouver l'urobiline normalement dans la plu- 4
Nous verrons ce qu il fan en PENSER
fe
Procédé Lépinois. —. La modification suivante a s
été préconisée dans le cas où les urines fortement | |
pigmentées | renferment à Ja os. de Poinliue et.
des pigments biliaires. On prépare une solution de
chlorure de zinc 1/10, contenant juste assez d’ acide chlorhydrique pour avoir une liqueur limpide, puis. i
une solution d'ammoniaque au quart. Dans une
éprouvette graduée on mesure 5 emc.de la première | €
solution et20 eme. d'urine. On ajoute 3 à 4 eme. d’ammoniaque diluée ét on filtre. La liqueur alcaline filtrée est fluorescente, sil Y a de l’urobiline. Les
autres pigments urinaires restés sur le filtre avec
le précipité d'oxyde de zinc sont délayés dans LE ques eme. d'eau. On ajoute goutte à goutte de l’acide acétique jusqu’à dissolution complète. Cette solution donne avec l'acide azotique nitreux la réac- à
tion de Gmelin s’il y a des pigments biliaires,
Critique de ces procédés. — Quelle que soit la
méthode employée, les résultats ne sont pas tou- Î { CPR
Jours brillants. Certaines urines donnent par exem-
er :
DS À bis
ple un spectre d'absorption très net, alors que la fluorescence est douteuse ou absente (Merletti,
En à 1
moniaque, par exemple le réactif d'Oliviero qui en
et ne LS 1m bc.
le chlorure de zinc, la réaction ne se produit pas.
Jin. Aussi le réactif d’Oliviero doit il être rejeté de la pratique.
sont susceptibles de se combiner avec le chlorure de zine et la réattion ne se produit plus (Riva
Nencki, Zoja, Merletti); ce qui nous mène à cette
excès de chlorure de zine, et que la liqueur doit
Schlesinger (1), etc.). Bien mieux, en employant deux NC
échantillons de la même urine, eten suivant la méme AT:
| technique on est parfois étonné de trouver des ja ° réactions de fluorescence tout à fait différentes. | “je
Quand on opère sur l'urine elle-même, cela peut tenir à plusieurs causes ; si elle est trop acide, et
qu on emploie un réactif contenant trop peu d’am-
contient juste la quantité nécessaire pour dissoudre
* Il faut, en effet, que le milieu soit nettement alca-
En second lieu, les composés minéraux de l'urine : » P
conclusion, que le réactif employé doit contenir un
être toujours alcaline. ( Dans d’autres cas, on croit obtenir une fluores- 6
cence qui en réalité n'existe pas. \ 1400 Quand l'urine est acide, que l’ammoniaque est
saturée, le chlorure de zinc se reprécipite. Si au
contraire l’urine est alcaline, avec le chlorure de
zinc les phosphates terreux donnent un précipité
(4) I policlinico, 1904 444.
pigment contenu dans l'urine. À PE 4
le tube des flocons gélatiniformes. Leur couleur
de phosphate trizincique (PO:?Z,à qui sr due
blanc bleuâtre superposée à celle de Purine, donne
des reflets verdâtres faisant croire à une légère fluorescence. En filtrant elle disparait.
IL faut donc pour qu'on puisse affirmer la fluo-
rescence par lé chlorure de zinc ammoniacal, que
cette coloration persiste après filirations #2 470
Quand, au lieu d'opérer sur lurine, on recueille
préablement les pigments dans l'alcool amylique, :
une partie ‘de ces erreurs sont évitées. Mais la
réaction demande plus de temps. De plus on n'est
pas certain de recueillir dans ce dissolvant tout le
Aussi on ne peut pas juger de la quantité d’uro- 6 … biline par Fintensité de la coloration obtenue.
Quand on agite l'urine avec l'alcool amylique, il se produit une émulsion qui persiste très long-
temps: afin de la détruire, il faut centrifuger l urine
ee qui complique les procédés. LR ALORS NTI
Pour obvier à cet inconvénient j'ai composé uns réactif miscible à l'alcool amylique mais de densité différente: I1 suffit d'en verser environ un quart
Le
dans l'alcool amylique pour voir l'émulsion se!
détruire aussitôt: La centrifug ation est ainsi rendue :
inutile. S'il y a de l'urobiline la AUDI EE SPP
raît. Il se compose de :
Chlorure de zinc .. ... 4 Brel AIcOb La 900 ER Ammoniaque,........ A0 » Fi
Alcool que
onaoUe Anita D pour saturer r acidite dé r urine et maintenir le milieu nettement alcalin. Selon les
| besoins on peut faire varier les proportions de chlorure de zinc, mais il n'est pas avantageux de se ser-
Me. de solutions plus concentrées.
Les résultats sont meilleurs qu'avec les autres :
À réactifs, mais en définitive cette méthode ne vaut Pees la rapidité et la précision de l'analyse spectrale.
Recherche dans le sérum par le chlorure de zinc
Jusqu'i icinousn ‘avons eu en vue que la recherche
1e l’urobiline dans l'urine. On ne peut procéder de
même avec le sérum. L’ agitation avec l'alcool amy
lique ou le chloroforme donne des émulsions encore plus stables qu'avec l'urine. |
Je leur préfère alors l'emploi ds l’éther acétique, excellent dissolvant de l'urobiline, et qui se sépare
très: ‘facilement. L'évaporation rapide de ce liquide |: permet d’ obtenir facilement des solutions coucentrées ce qui est précieux dans certains cas. Le réactif employé sera ainsi modifié :
ne
| Chlorure 1 Gr LI LORME EUNAr " n PACE SO AA RE 1 30 »
AMMOMAQUES SL... 24 LTORSS Ether acétique........ POS 60 »
On F'ajoutera à la solution d'Éther acétique qui
contient les pigments, jusqu'à l'obtention d’une Ë limpidité parfaite : la fluorescence apparait de suite
vs il y a del urobiline.
