C. — EXPÉRIMENTATION CHEZ L'ANIMAL

1° Chez le lapin. — Le Professeur FROMMEL administre du manganochlorure d’acétylcholine soit sous-cutané, soit per os (sondage). I1 mesure la pression de l’artère rétinienne par la méthode ophtalmoscopique de BAILLIART. Il résulte de ses expériences que le manganochlorure d’acétylcholine agit rapidement sur la pression carotidienne du lapin. Cette chute est cependant un peu moins rapide que celle que l’on obtient avec le chlorhydrate.

Le manganochlorure allonge la durée de l’hypotension chez le lapin de 7 fois celle du chlorhydrate d’acétylcholine.

D'autre part, l’ingestion par sonde ou l'injection à des lapins de 3 mg par kg de manganochlorure entraîne une hypotension de la pression de l’artère rétinienne 7 fois plus longue que celle obtenue par la même dose de chlorhydrate.

2° Sur la pupille de la grenouille. — L’acétylcholine est un des médiateurs de l’excitation vagale, d’où l'intérêt d’étalonner la puissance respective du chlorhydrate et du manganochlorure sur la pupille. Cet étalonnage est difficile à réaliser par instillation conjonctivale, plus aisé par le bain de l’œil détaché de la grenouille dans une solution étalonnée du sel d’acétylcholine.

La force respective du chlorhydrate et du manganochlorure d’acétylcholine peut encore s’apprécier sur l’antagonisme adrénalinique. FROMMEL fit les épreuves suivantes :

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Il place dans des godets de verre du sérum physiologique ; il énuclée les deux yeux de grenouille. Un œil est placé dans le godet contenant une solution de RINGER avec le médicament. L’autre œil est placé comme témoin dans le godet ne contenant que le sérum

physiologique. Chaque œil a donc son témoin provenant de la même grenouille.

Le chlorhydrate et le manganochlorure produisent un myosis très marqué lorsque le bain est à une concentration de 1 % ou de 1 pour 500. Les pupilles ne montrent aucune différence de réaction entre les deux médicaments.

Action de la bellafoline sur le myosis acétylcholinique.

Si l’on ajoute au bain de la bellafoline, on n’observe pas de dilatation pupillaire ni sur l’œil témoin, ni sur l’œil dont la pupille est rétractée par le myotique. Cette négativité doit s’interpréter comme un manque de tonus du vague, puisque les principes actifs de la belladone n’ont pas d’autre vertu que de contrecarrer l’action du parasympathique et ne peuvent s’opposer à une action purement myotique. L'épreuve qui consiste à traiter tout d’abord les yeux par une solution de bellafoline et ensuite seulement par l’acétylcholine montre que la belladone n’empêche pas entièrement le myosis produit par le manganochlorure d’acétylcholine.

Action de l’adrénaline sur le myosis acétylcholinique.

Si l’on traite le myosis acétylcholinique par l’adrénaline, on remarque que l’œil soumis préalablement au manganochlorure d’acétylcholine présente une mydriase plus considérable que celle de l’œil traité au chlorhydrate. Si l’on fait l’épreuve inverse : traiter la mydriase provoquée par l’adrénaline par les sels d’acétylcholine, on note que la dilatation pupillaire est plus intense sur les yeux immergés dans la solution du manganochlorure d’acétylcholine que sur ceux soumis au bain de chlorhydrate.

On serait en droit de conclure de ces expériences que la belladone ne neutralise pas entièrement l’action du manganochlorure et que l’antagonisme adrénaline-acétylcholine est plus puissant pour le chlo-

rométal que pour le chlorhydrate.

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Action antagoniste de la belladone sur l'effet du chlorhydrate et du manganochlorure d’'acétylcholine.

L'action inhibitrice des alcaloïdes de la belladone sur l'effet de l’acétylcholine se joue aux synapses. De faibles doses d’atropine contrecarrent totalement l'effet de la base quaternaire acétylée. Avec le manganochlorure il n’en est pas toujours ainsi. Ce sel est bien neutralisé dans son action myotique par les principes actifs de la belladone, mais cette action demande plus de temps et vraisemblablement le point d’attaque de cette neutralisation est différent.

En résumé, en synthétisant des chlorométaux d’acétylcholine, on obtient des corps chimiquement stables et difficilement hydrolysables.

Parmi eux c'est le manganochlorure d’acétylcholine qui est le plus intéressant. Il est stable, ne s’hydrolyse pas spontanément en solution aqueuse, cristallise et n’est pas hydroscopique. Ce complexe est moins toxique que le chlorhydrate. Il produit une hypotension à dose égale de la base quaternaire acétylée du chlorhydrate 7 fois plus durable. Son action immédiate est moins brutale ; elle n’est ni muscarinienne, ni nicotinique. Comme le chlorhydrate, il ne connaît pas d'accoutumance et ne doit ses vertus qu’à sa stabilité physico-chimique plus grande que celle du dérivé chloré simple.

L'action hypotensive mesurée sur la carotide est de même durée et de même intensité que celle que l’on observe sur l’artère rétinienne du lapin. Cependant, le point d’attaque du manganochlorure d’acétylcholine diffère de celui du chlorhydrate.

4° Mode d'action intime. — Il ÿ a dans la thérapeutique et l’action physiologique de l’acétylcholine un paradoxe qui n’est qu’apparent. Le chlorhydrate d’acétylcholine semble n'’agir en clinique qu'à des doses pléodynamiques et en physiologie son rôle est oligodynamique. Le clinicien injecte volontiers l'acétylcholine à dose de 0,20 g et ceci plusieurs fois dans la journée au cours de graves affections vasculaires, mais l’expérimentateur sait que le muscle isolé répond à des concentrations infiniment moindres. Comment, dès lors, s'expliquer l'écart énorme qui sépare le médicament chez l'homme de l’hormone en physiologie ?

L’acétylcholine se trouve dans l'organisme sous forme de complexe vraisemblablement lipoprotidique et inactif.

Or, le clinicien, en injectant le chlorhydrate d’acétylcholine, inonde l'organisme d'une hormone libre et cette hormone est immé:-

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diatement happée par la cholinestérase. Cette vitesse est d’autant plus grande que le taux de l’acétylcholine est plus fort (BENDER). GALEHR et PLATTNER ont, en effet, montré qu’un ce. de sang détruit une solution d’acétylcholine au 1/10.000° en 24 secondes à une température de 20° et en 15 secondes à une température de 40°.

En injectant donc 0,20 g de chlorhydrate aux malades et en comptant une résorption sanguine maximale et pratiquement irréalisable à cause d’une destruction enzymatique locale, nous aurons pour 7 litres de sang une concentration de 30 grammes au cc.

Ces considérations font comprendre que l'injection d’acétylcholine en clinique doit être de nature pléodynamique, quoiqu'il faille se rappeler que chez le lapin l'injection de petites doses peut avoir un effet plus prolongé.

Le chlorométal augmente la durée de l’hypotension chez le lapin de 10 fois celle exercée par le chlorhydrate.

Ces quelques réflexions nous montrent que la posologie du manganochlorure d’acétylcholine doit tenir compte en clinique de la différence fondamentale qui existe entre le chlorométal et le chlorhy-

drate d’acétylcholine.

La libération de cette acétylcholine doit se faire selon les besoins physiologiques de l’excitation nerveuse sans pour cela être liée au nerf lui-même. En effet, VON EULER a montré que l’acétylcholine est encore active sur les tissus dépourvus de système nerveux (vaisseaux placentaires, membranes amniotiques, etc.). Maïs cette constatation n'empêche nullement que le nerf soit chargé de cette hormone. MARNAY a, en effet, démontré que les plaques motrices ont un taux de concentration de 1.000 fois et plus supérieur à celle des muscles. Or, ce complexe acétylcholine-substances lipoprotidiques resterait inattaquable par le ferment hydrolysant parce que ce dernier serait séparé de son substrat par les membranes imperméables à l’une comme à l’autre. Le ferment se localise à la surface des cellules. Lorsque la liaison s’établit entre l’acétylcholine et son ferment elle se ferait par échange ionique.

La présence d'ions étrangers peut perturber cet échange, de telle sorte que l’on peut se représenter la structure de la cholinestérase comme une molécule présentant deux pôles d’attraction, l’un pour le groupement ester, l’autre chargé négativement et servant de

fixateur au substrat.

Si l’on prend comme étalon la dose de chlorhydrate d’acétylcholine de 0,10 g, celle du manganochlorure sera de 0,01 g.

Ainsi :

1° La transformation de l’acétylcholine en son complexe manga-

nochlorure en fait une médication oligodynamique à l’encontre du chlorhydrate qui est d’action pléodynamique ;

2° Le mécanisme d’action du manganochlorure tient au fait que ce complexe n’est que difficilement hydrolysable de lui-même et par la cholinestérase.

On a invoqué deux facteurs pour expliquer le paradoxe de l’effet éphémère du manganochlorure en injection intra-veineuse comparativement à son action durable en injection sous-cutanée :

a) D'une part le pH du sang précipite le manganèse ;

b) D’autre part l’action différentielle du manganochlorure avec le chlorhydrate est d'ordre biochimique : la puissance de diffusion du complexe métallique est inférieure à celle du chlorhydrate de la base quaternaire ; et qui dit diffusion différée peut expliquer une action plus durable. Ceci par le fait que le manganochlorure agit sur la perméabilité cellulaire. Tout se passe comme si le manganèse contractait avec les éléments constitutifs de la membrane cellulaire des liens réversibles qui entravent la perméabilité.

o° Preuves expérimentales de l’activité per os. — Pour trancher la question de savoir si le manganochlorure d’acétylcholine agissait par voie bucale, FROMMEL et BISCHLER prirent la mesure de la tension de l’artère rétinienne sur le lapin en position normale.

Ces épreuves montrèrent que la pression de l'artère rétinienne réagit à l’ingestion par sondage de 25 mg par kilo de manganochlorure.

1°” lapin : la pression rétinienne, qui est de 50 au début, tombe à 40 à la 15° minute et se maintient à ce chiffre jusqu’à la 60° minute.

2° lapin : au début la pression rétinienne descend à 45 à la 15° minute, à 39 à la 60° minute.

À six étudiants à jeun ils firent absorber 0,15 g de manganochlorure d’acétylcholine. Voici les résultats obtenus, comparatifs entre la tension de l’artère rétinienne et la pression de l’artère du bras :

Avant 30° 60? 90? ù 1207 —— "à B R B R B R D R B R 1. 12-6 20-40 12-6 20-40 11-6 20-35 10-35 11-6 10-35 2. 13-7 30-55 12-7 30-50 12-7 25-40 20-40 11-7 25-40 3. 15-10 50-100 16-10 40-80 16-10 35-70 30-70 16-10 30-60 4. 14-8 55-70 14-8 30-60 13-8 30-60 13-8 25-50 12-8 30-60 5. 14-9 40-70 15-10 30-70 15-10 30-60 15-9 30-55 15-10 30-60 6. 14-10 35-70 14-10 35-70 13-9 25-50 14-9 30-60 14-10 25-50