RÉACTIFS

être, dans certains cas, d'une réelle importance pour diverses études histologiques, mais ne sont pas indispensables pour les recherches qui nous occupent ici.

Matières colorantes, -t- Nous ne saurions énumérer toutes lee matières colorantes introduites, si utilemeat, jurant ces dernières années dans la technique micrographique. Pour l'observation de la cellule animale, il suffit de quelques-unes d'entre elles.

Le carmin doit être cité en première ligne ; un histologiste réduit à n'avoir à sa disposition que de la glycérine, du carmin et de l'acide acétique, pourrait déjà recueillir d'intéressantes observations.

Mais, pour que le pouvoir électif du carmin se manifeste, il faut que cette matière colorante soit employée en solutions rigoureusement préparées. Les meilleures sont : le carmin am^moniacal , le carmin aluné et le carmin picrique ou picrocarmin. Leur préparation a été minutieusement exposée par M. Banvier (1).

Le vert de méthyle est excellent pour l'étude du noyau, dont il colore en vert les filaments chromatiques. Il agit aussi comme un fixateur délicat ; on ne peut qu^ s'associer à M. Carnoy pour le recommander, même aux débutants. On l'emploie en dilution aqueuse assez concentrée, à laquelle on ajoute souvent un ou deux volumes d'acide acétique.

La vésuvine ou brun Bismarck fournit également un bon colorant des noyaux. Pour l'avoir en solution dans

(1) Ranvier, Traité technique cT Histologie (2« édition, p. 83 et suiv.).

l'eau, on peut faire bouillir dans ce liquide, puis filtrer après un jour ou deux. — Souvent on obtient de bons résultats en faisant dissoudre dans :

Alcool à 90o 10

Eau distillée 90

Le violet de métfiylanilîne, le safranine^ Yéosine^ le bleu de quinoléine donnent de très belles colorations qui ne peuvent être que rappelées ici.

Iode. — On ne saurait clore la liste des réactifs chimiques sans y ajouter l'iode qui est indispensable, non seulement en raison de ses réactions spéciales, mais pour la préparation du sérum iodé^ si utile en maintes circonstances.

Voilà l'observateur complètement armé, muni des instruments et réactifs nécessaires ; comment devra-t-il procéder pour étudier la cellule animale?

Nous ne tarderons pas à lui indiquer les règles spéciales qu'il aura à suivre dans l'examen de tel type cellulaire donné, mais nous voudrions tout d'abord lui conseiller quelques exercices préliminaires, susceptibles d^ lui faire connaître la cellule en général , sans nécessiter l'intervention d'une technique compliquée.

Nombre de cellules peuvent être étudiées à l'état frais, souvent même à l'état vivant.

Les Protozoaires , les leucocytes , les hématies , les jeunes ovules, seront ainsi observés dansTeau, dans Teau salée, dans le liquide cavitaire de TÉcrevisse, dans un sérum artificiel, etc. On apprendra à se familiariser avec les différents aspects de la cellule; on cherchera à distinguer son noyau.

Certaines cellules agrégées en tissus pourront être examinées dans des conditions peu différentes. On enlève le tube digestif d'un Crustacé Isopode, etc.; on le fend avec un scalpel fin ; puis , après avoir lavé à la pipette la muqueuse mise à nu, on la racle doucement avec une aiguille à cataracte : les cellules se détachent, flottent dans le liquide de la préparation et peuvent dès lors être étudiées isolément.

Des préparations analogues seront effectuées avec les tubes testiculaires ou ovariens des Insectes.

Lorsqu'on fera intervenir les réactifs, le premier sera l'alcool au tiers (Ranvier) : on prend des fragments de muqueuse intestinale de Lapin, de 6 à 10 millimètres de côté ; on les plonge dans 12 centimètres cubes d'alcool au tiers.

Après un séjour de six heures en moyenne, on trouve des lamibeaux d'épithélium flottant dans le liquide ; on les enlève avec une aiguille pour les placer avec une goutte de glycérine sur une lame ; en s'aidant de deux aiguilles, on dissocie lentement le lambeau dans la glycérine, puis on recouvre d'une lamelle mince: les cellules apparaissent isolées et faciles à étudier.

L'application des réactifs colorants peut venir immé-

diàtemènt s'associer aux opératiôus précédentes, complétant et précisant leurs résultats,

Après avoir retiré les fragments de Talcool au tiers, on lés place dans 7 centimètres cubes de picrocarmin.

Ils y séjournent de deux à quatre heures jusqu'à ce que la coloration semble suffisante ; on les immerge avec préleaution dans 12 centimètres cubes d'eau distillée. On les y laisse de cinq à sept minutes, pour les porter enfin sur la lame porte-objet, où l'on a préalablement déposé une goutte de glycérine étendue d'eau (1/5® environ). La préparation est recouverte d'une lamelle qu'on borde à la paraffine.

De telles préparations doivent être répétées sur les différents tissus empruntés aux types zoologiques les plus variés. C'est seulement en suivant cette méthode qu'on parviendra à se faire une idée exacte de la cellule animale considérée dans sa texture générale et dans ses principales modifications.

Les animaux inférieurs fournissent à cet égard des sujets d'étude aussi précieux que les Mammifères et aussi faciles à mettre en œuvre.

Les Spongiaires doivent même être particulièrement recommandés. La Spongilie d'eau douce, si fréquente sur les estacades, les arches des ponts, les pontons, etc.» de nos rivières, se prête à des observations semblables à celles qui viennent d'être décrites.

On fend le Spougiaire longitudinalement et on enlève un fragment de tissu mésodermique. Ce fragment est

divisé en petits segments de même volume que ceux dont il a été question plus haut pour la muqueuse in^ testînale. Ils sont également placés dans l'alcool au tiers.

On les porte ensuite soit dans le picrocarmin, soit dans le vert de méthyle, et Ton peut aisément distinguer, d'une part^le protoplasma somatique de la cellule et, d'autre part, le noyau de celle-ci. On examine ensuite un certain nombre d'éléments et l'on constate de nombreuses variations dans la forme et les dimensions du noyau, etc.

Si ces diverses observations ont été convenablement multipliées, si l'on a eu le soin de dessiner à la chambré claire les détails ainsi reconnus, on possédera déjà des notions étendues sur la constitution générale de la cellule et l'on pourra aborder utilement son étude spéciale.