A. PROTOZOAIRES

Amibes. — L'observation directe, à l'état vivant, permet d'observer le protoplasma granuleux et vacuolaire, ainsi que l'émission des pseudopodes.

Si l'on n'a pas réussi à distinguer le noyau, il suffit de faire pénétrer lentement une trace d'acide acétique entre la lame et la lamelle mince ou couvre-objet : les pseudopodes se contractent, les vacuoles s'atténuent ou

S'effacent, tandis que le noyau apparaît et s'affirme avec une grande netteté.

On arrive à fixer assez bien les Amibes en les traitant pendant un temps très court (deux à quatre minutes) par l'acide chromique.

FoRAMiNiFÈREs. — Il est difficile d'étudier complètement les animaux vivants, plus difficile encore de les fixer et de les conserver avec leur aspect normal , leurs pseudopodes étalés.

On pratiquera l'observation directe dans un mélange composé de :

Glycérine 1

Eau 6

Comme méthodes de colorations, on peut employer le carmin et monter la préparation au baume de Canada,

Presque toujours on doit se borner à l'examen et à la conservation des coquilles.

, Il faut les laver dans de l'alcool à 90 Vo > P^îs les immerger dans l'essence de girofle et monter au baume.

Héliozo AIRES. — L'observation des Héliozoaires (Actinosphéries, etc.), est également très délicate.

On obtient des résultats assez satisfaisants en les fixant par une goutte d'acide osmique à 1/100« puis en les portant successivement dans l'eau, l'alcool à 70» et l'alcool à 90*. On peut colorer au picrocarmin, laver par les alcools à 70"*, 90<> et absolu ; la préparation est éclaircie par l'essence de girofles et montée dans le baume.

Infusoires. — En examinant les Infusoires dans l'eau et en ayant soin d'éviter une compression trop marquée, on peut déjà acquérir une idée générale de leur constitution.

En faisant pénétrer sous la lamelle mince une goutte de solution de borax ou de potasse, on distingue l'origine des cils vibratiles, l'aspect grenu et strié de la cuticule, etc.

La solution aqueuse de vert de méthyle, additionnée d'acide acétique, met en évidence Yendoplaste et Yendoplastule. On constate que ces parties, si importantes au point de vue de la reproduction, offrent les réactions des noyaux cellulaires et peuvent être regardées comme représentant un appareil nucléaire dédoublé.

Nous savons, depuis les recherches simultanées de MM. Henneguy, Certes et Brandt, que les Infusoires vivants se colorent, continuant même à vivre durant un certain temps, dans les solutions faibles de plusieurs couleurs d'aniline (cyanîne, brun Bismarck, violet dahlia, nigrosine, bleu de méthylène, etc.)

Le titre toujours très faible de ces solutions varie entre 1/10,000* et 1/100,000«.

On peut obtenir la double coloration des noyaux en vert et du protoplasma en violet par l'emploi simultané du violet dahlia et du malachit-grun.

Mais, d'autre part, il faut être prévenu que les noyaux se comportent très différemment suivant les espèces mises en expérience.

t6$ ÉTUDE PRATIQUE DE LA CELLULE ANIMALE

En général, il est nécessaire pour étudier l'organisation des Infusoires, de les fixer préalablement.

1. Une méthode très simple consiste à instiller une goutte d'alcool entre la lame porte-objet et la lamelle mince. On fait ensuite passer de l'eau, puis de la glycitère et de l'acide acétique. On peut ainsi observer pàrÊtitement les noyaux.

2. Le procédé suivant est plus compliqué, mais plus constant dans ses résultats.

Ayant placé l'Infusoire oii les Infusoires dans une goutte d'eau, sur une lame porte-objet, on renverse celle-ci au-dessus d'une capsule ou d'un flacon à large ouverture contenant une solution d'acide osmique à 2/100.

On laisse agir quelques minutes ; les Infusoires sont tués ôt fixés. On recouvre d'une lamelle mince et on dépose sur ses bords une goutte de la solution suivante :

Eau . 1

Glycérine 1

Solution de picrocarmin à 1/100® .... 1

On abandonne la préparation durant un ou deux jours, jusqu'au moment où l'on juge la coloration suffisante. On substitue, au moyen d'un lambeau de papier à filtrer, à la glycérine colorée, de la glycérine étendue d'un quart d'eau, puis on ferme la préparation.

Cette méthode est très sûre; il faut seulement éviter de prolonger trop longtemps le contact des va peurs osmiques.

b. métazoaires

Cellules libres ou flottant dans un liquide. — Nous avons déjà eu Toccasion d'insister, à maintes reprises, sur la constitution des liquides dits organiques, interstitiels, etc., qui représentent le milieu intérieur des Métazoaires ou animaux pluricellulaires.

Ces humeurs {lymphe, liquide cavitaire, sang, etc.) sont essentiellement formées d'un liquide ou plasma, souvent comparé à . une substance intercellulaire dans laquelle flottent des éléments généralement amiboïdes (leucocytes, globules lymphatiques, etc.), plus rarement à forme définie (hématies).

Par leurs caractères, leurs propriétés, leur genre de vie, ces globules se rapprochent donc étroitement des Protozoaires.

De même que ceux-ci vivent dans l'eau, les globules vivent dans le milieu intérieur de l'organisme dont ils font partie ; les uiis et les autres témoignent des mêmes propriétés et doivent être observés à l'aide de méthodes peu différentes (1).

Leucocytes, globules lymphatiques, etc. — En ponctionnant, dans l'intervalle de deux anneaux, l'abdomen d'une Écrevisse et en examinant une goutte du liquide

(1) Voy. Sappey, Les éléments figurés du sang dans la séné animaie, 1881. >

cavitaire ainsi obtenu, on y découvre de nombreux corpuscules qui se comportent comme des Amibes.

Ils émettent des pseudopodes et leur forme change constamment. Leur protoplasma est granuleux ; quant au noyau, il n'apparaît que vaguement, avec un contour ovale. Mais si l'on fait agir l'acide acétique, le corpuscule s'arrondit par rétraction des pseudopodes et le noyau devient aussi apparent que le noyau de l'Amibe traité par ce réactif. De même, le noyau se colore fortement dans les solutions carminées. Inutile d'ajouter que l'acide osmique permet de fixer ces corpuscules ou globules de l'Écrevisse.

Le sang de l'Escargot se prête à des observations analogues ; Jes globules y revêtent successivement les aspects les plus bizarres. Rien de plus démonstratif qu'un dessin de ces éléments exécuté après leur fixation par l'acide osmique ; c'est alors qu'on juge de leur incroyable diversité d'aspect.

L'emploi d'un objectif à immersion est souvent nécessaire pour l'examen de leurs pseudopodes.

L'observation des leucocytes, ou cellules lymphatiques, etc., est également très intéressante chez les Echinodermes, en raison du pigment qui se forme dans leur protoplasma, et s'y développe parfois au point de masquer le noyau (1).

On voit souvent ces cellules se rapprocher et se

(1) Voy. pages 111 et U2 ; fîg. 61.

ÉTUDE SPÉCIALE DE LA CELLULE i7i

grouper pour former des plasmodies plus ou moins étendues.

Les cellules lympathiques des Insectes peuvent présenter le même phénomène.

La lymphe des Vertébrés offre des corpuscules figurés dont l'étude n'est pas moins instructive.

II convient de s'adresser de préférence aux Vertébrés à température variable, leur lymphe s'altérant moins rapidement, se montrant plus c résistante i que celle des Mammifères et des Oiseaux.

La Grenouille est un excellent type d'expérimentation. On doit la placer dans un bocal aux trois- quarts plein d'eau durant vingt-quatre heures, procédé qui augmente la quantité de lymphe contenue dans les sacs sous-cutanés.

Pour extraire la lymphe, on fait une petite incision entre les yeux, puis on y introduit une pipette en verre à tige fine. En aspirant légèrement, on obtient quelques gouttes de liquide.

On se hâte de faire des préparations de lymphe fraîche, en les bordant immédiatement à la paraffine ; il faut, en effet, prévenir de suite toute évaporation, toute altération.

De telles préparations permettent de recueillir de précieuses indications sur les leucocytes vivants.

Ces éléments se montrent d'abord contractés, à la suite des manipulations qui viennent de se succéder ; au bout de quelques instants , ils commencent leurs mouvements.

; Ceux-ci s'esquissent lentement, puis ne tardent pas à s'accélérer.

Les pseudopodes apparaissent en nombre variable et sur des points différents, imprimant à l'élément des aspects aussi changeants que ceux dont on était témoin en suivant les évolutions des leucocytes de l'Écrevisse. Un dessin exécuté à la chambre claire, de deux minutes en deux minutes, l'établit avec la plus grande netteté.

On peut alors, parfois plus facilement que sur les Amibes proprement dits, mettre en évidence les attributs du protoplasma et ses propriétés vitales.

La motricité vient de se manifester clairement par rémission des pseudopodes. De même la sensibilité : il suffit de chauffer délicatement pour voir les mouvements diminuer vers 38^ ; si l'on chauffait à 48®, ils ne tarderaient pas à s'arrêter.

Nous avons dit que l'Amibe et le leucocyte avaient des propriétés respiratoires identiques. On peut maintenant s'en convaincre aisément : quand l'on maintient les cellules lymphatiques durant plusieurs heures dans une préparation hermétiquement bordée, elles cessent de présenter aucun mouvement.

Mais, pour les faire revenir à la vie, il suffit de glisser la pointe d'un petit scalpel entre la lame et la lamelle : si l'expérience n'a pas été trop longtemps prolongée, le contact de l'air ranimera immédiatement les leucor cytes.

On peut procéder autrement : en déposant la lamelle

mince sur une goutte de lymphe fraîche, on emprisonne quelques bulles d'air ; puis on borde à la paraffine ; au bout de deux ou trois heures, tous les leucocytes attirés par l'oxygène, se trouveront groupés autour des bulles d'air.

Quant à la préhension des corps étrangers, elle est facile à observer. On mêle à la lymphe de fines granulations de vermillon délayées dans de l'eau salée ; bientôt des pseudopodes s'avancent vers les granules colorés^ les attirant dans la masse protoplasmique au . sein de laquelle on peut suivre leurs déplacements. Il est bon, pour ces dernières observations, de faire jouer le miroir du microscope et d'atténuer l'éclairage.

L'étude directe, telle qu'elle vient d'être décrite, permet difficilement d'observer le noyau. Cependant, sa situation se trouve indiquée, dans l'expérience avec les grains de vermillon, par le fait que ces granules ne^ pénètrent pas dans la masse nucléaire, se déplaçant seulement dans le protoplasma somatique.

Pour mettre hors de doute l'existence du noyau, on fera agir l'acide acétique dont l'intervention donnera ici les mêmes résultats que sur l'Amibe : le noyau apparaît avec un contour absolument tranché et s'affirme nettement.

Toutefois, l'importance du noyau des leucocytes est telle, au double point de vue de ses variations morphographiques et de ses phénomènes de gemmation, qu'on ne saurait se borner à en constater la présence au moyen de l'acide acétique.

Ghatin. La cellule animale, 18

, U est indispensable d'appliquer la technique indiquée par M. le professeur Ranvier ( 1) : à une goutte de lymphe déposée sur la lame porte-objet, on ajoute une goutte d'âlcdol au tiers, puis une goutte d'une solution de sulfate de rosaniline dans l'alcool dilué. Le tout est mélangé avec la pointe d'une aiguille ; on borde ensuite èif la paraffine.

Le noyau se montre alors sous les aspects les plus .différents : cylindrique, pelotonné, enroulé sur luimême, allongé en bissac ou en boulet ramé , . moniliforme, etc. Il n'y a guère que les Spongiaires qui puissent, dans la série des Métazoaires, offrir une telle variété de formes nucléaires (2).

Les' observations précédentes nous avaient montré comment se trouvent assurées pour le leucocyte les fonctions de relation (motricité, sensibilité) et de nutrir tion (préhension, circulation des aliments); comment s'accomplira sa reproduction ?

C'est par l'examen des préparations exécutées suivant la méthode de M. Ranvier qu'on peut répondre à cette question et combler la dernière lacune existant pour nous dans la biologie de la cellule lymphatique.

En examinant un certain nombre de leucocytes colorés comme il vient d'être dit, on arrive à y découvrir des noyaux en voie de bourgeonnement et de division ; si l'on corrobore cette observation par l'examen

(1) Ranvier, Traité d'Histologie, 2« éd., 1889, p. 135 et suiv.

(2) Joannes Ghatin , ContiHbution ^à Vétude du noyau chez les Spongiaires (Comptes rendus de l* Académie des Sciences , i890).

des celliries étudiées fraîches et vivantes, on constate que la division de l'élément suit celle de son noyau et l'on assiste à toutes les phases d'une multiplication cellulaire. — Pour de telles recherches, la lymphe de l'Axolotl doit être préférée à celle de la Grenouille.

Lès leucocytes renferment souvent des granulations glycogénlques ; elles seront décelées par la solution aqueuse d'iode.

Enfin l'acide osmique permet de fixer instantanément les leucocytes avec leurs pseudopodes et leurs aspects souvent si bizarres. Rien de plus instructif qu'une série de préparations ainsi obtenues sur des leucocytes empruntés à divers types d'Invertébrés et de Vertébrés.

Hématies. — On désigne sous ce nom des cellules vivant dans des conditions analogues à celles des éléments précédents, mais possédant une forme définie et généralement une coloration spéciale.

Les hématies ' s'observent essentiellement chez les Vertébrés. On les a signalées chez divers Invertébrés, soit d'une façon constante (Sipunculiens, Pycnogo^ nides), soit d'une façon accidentelle (divers Mollusques, Ascidies, Annélides, Echinodermes, etc.). A cet égard, une grande circonspection s'impose : des leucocytes plus ou moins colorés ont été fréquemment décrits comme des hématies et, parmi les éléments qui ont reçu cette dernière dénomination, il en est qui émettent visiblement des pseudopodes. C'est donc chez lés Vertébrés qu'il convient d'étudier ce type histique.

Il s'y montre sous deux lormes principales : discoïde comme chez l'Homme, elliptique comme chez la Grenouille.

Les hématies s'altêrant très promptement, on doit avoir une lame prête à recevoir la goutte de sang au moment où elle est extraite du corps de l'animal . On applique aussitôt la lamelle mince par-dessus.

Sur ces préparations, on étudiera la forme des hématies, leur coloration qui est jaunâtre et non pas rouge ; une légère pression mettra en évidence leur élasticité.

L'acide acétique décolore les hématies, décelant leur noyau quand il existe. — Le picrocarmin teinte ce noyau en rose.

Les hématies présentant une grande altérabilité, peuvent ainsi subir des modifications considérables dont il faut être prévenu. Elles induiraient en erreur le micrographe qui ne serait pas familiarisé au moins avec les principales d'entre elles.

Si l'on abandonne la préparation à elle-même,^ les globules se plissent et prennent un contour dentelé ou onduleux.

Sous l'action de la chaleur, ils semblent émettre des prolongements qui s'en séparent peu à peu.

Une solution concentrée de chlorure de sodium amène leur rétraction, tandis qu'ils se gonflent en présence d'une solution faible.

Lorsque l'hématie possède un noyau, comme chez les Vertébrés ovipares, on constate souvent qu'il oflfre une résistance toute spéciale. Le fait s'observe chez

ÉTUDE SPÉQALE DE LÀ CELLULE m

les Oiseaux et chez divers Poissons : le sang desséché ne présente plus que des noyaux faciles à reconnaître, mais déformés si la dessication a été longtemps prolongée.

L'extrême altérabilité des hématies ne permet que difficilement de les examiner complètement, aussi a-t-on proposé plusieurs méthodes en vue d'y remédier. L'une des plus simples est due à Bizzorero et Torre : on fait dissoudre un peu de violet de méthyle dans une solution de sel marin à 0,75 0/0 et Ton s'en sert comme liquide additionnel. La forme des éléments est conservée et leurs noyaux se colorent avec intensité.

Cellules épithéliales. — Les épithéliums sont particulièrement intéressants pour l'étude de la cellule animale.

Rarement elle apparaîtra mieux sous l'aspect d'un élément défini dans sa forme, et pourtant susceptible de s'adapter aux rôles les plus divers.

Son évolution, l'on pourrait dire ses métamorphoses, sont ici des plus instructives, qu'on l'examine dans sa constitution, dans son fonctionnement général ou dans sa vie propre.

Sous le premier point de vue, on la voit tantôt nue et susceptible de passer à l'état amiboïde, tantôt limitée par un ectosarque ou par une vraie cuticule d'où peuvent dériver des plateaux, des crénelures, des ponts intercellulaires, des soies, etc. Le protoplasma se prolonge souvent au dehors sous l'aspect de cils vibratiles, tandis

qu'il peut former dans son intérieur des pigments^ de la graisse, etc. ,

Le fonctionnement de l'élément semble impliquer parfois un apprentissage plus ou moins long,- après lequel la cellule s'affirme suivant les cas, comme élément protecteur, défensif, sensoriel, glandulaire; la liste de ses adaptations ne connaît plus d'autres limites que celles des exigences organiques.

Enfin, jamais on ne sera mieux placé pour étudier ce que l'on peut appeler la biographie cellulaire. Prenant l'élément à sa naissance, on le voit atteindre sa période de maturité caractérisée par le maximum de son activité fonctionnelle, puis la vieillesse arrive et enfin la mort. Inutile d'ajouter que la durée de la vie se montre des plus inégales : tel élément épithélial est éphémère,tel autre est des plus durables.

Oncomprend qu'un telpolymorphisme doive soustraire les épithéliums à une classification rigoureuse ; tous les cadres dans lesquels on s'efforce de les faire rentrer sont plus ou moins systématiques. Rien ne le démontre mieux que l'histologie zoologique : sur telle région, comme le manteau des Mollusques, elle observe les types épithéliaux les plus disparates.

En divisant ici les épithéliums en lamellaires, pavîmenteux, cylindriques, prismatiques, etc., nous ne tentons pas de les répartir suivant un ordre réellement méthodique, nous cherchons surtout à apporter quelque clarté dans un . exposé très chargé de détails.

Épithéliums lamellaires, — Cette forme d'épithéliums est souvent désignée sous le nova à' endotliéliums^ terme qui demanderait à être rigoureusement défini (1) et qui perdrait toute signification si on lui maintenait les diverses acceptions qu'il a reçues durant ces dernières années : dans certain traité d'anatomie comparée il est appliqué à Tépithélium des glandes en grappe I

L'épithélium lamellaire est formé de cellules extrêmement minces, tantôt rectilignes, tantôt sinueuses^

Naguère encore on attachait une grande importance à

la constatation de ces deux états et on en croyait pouvoir tirer d'importantes déductions. Les recherches de M. Ranvier sur la membrane lymphatique du sac œsophagien de la Grenouille ont ramené ce dimorphismf^ à son exacte valeur.

Les cellules lamellaires s'observent sur les séreuses, le cœur, les vaisseaux sanguins et lymphatiques des Vertébrés; chez les Invertébrés, surtout chez les Mollusques, leur étude est particulièrement intéressante pour l'interprétation de certaines questions longtemps controversées (capillaires et lacunes).

L'examen de ce type épithélial doit être poursuivi à l'aide de la méthode des imprégnations. On désigne ainsi des colorations déterminée? non plus comme dans la méthode des teintures, par l'absorption d'une matière colorante préexistant dans le réactif; mais par la formation sur place, dans le tissu, d'un dépôt coloré.

(1) Voy. Malassez, Comptes rendus de la Société de Biologie, 1892.

Ces dépôts sont presque toujours des métaux réduits de leurs sels solubles ; dans le cas actuel, c'est l'argent qui doit être employé.

Les imprégnations ainsi obtenues donnent des colorations très curieuses en raison de leur électivité : elles n'exercent leur action que sur les substances intercellulaires, respectant les cellules. Aussi a-t-on pu dire justement qu'elles étaient le contre-pied des teintures.

Le nitrate d'argent est le sel le plus usité. On remploie en solution à 1/100® ou 2/100®. On tend la membrane à imprégner sur un petit baquet de porcelaine ; on la lave avec une pipette remplie d'eau distillée, puis on l'arrose avec la solution de nitrate d'argent.

Pour obtenir des imprégnations très nettes, l'opération doit se faire au soleil ou à une lumière éclatante. Dès que le tissu blanchit et passe au gris noirâtre, on détache la membrane, on la lave à l'eau distillée et on la place sur la lame de verre. Elle est ensuite montée, d'après les procédés ordinaires, en préparation définitive.

Épithéliums pavimenteux. — Dans les épithéliums pavimenteux, les cellules sont encore aplaties, mais elles offrent une épaisseur fort appréciable, une forme sensiblement parallélipipédique , d'où leur comparaison avec des pavés microscopiques et le nom donné à cet épithélium.

Il peut être simple ou œmposé, c'est-à-dire compre-

nant une ou plusieurs assises de cellules ; sous Tun ou l'autre de ces aspects, répithélium pavimenteux est très répandu dans la série animale. La peau des Vertebrés> leur muqueuse buccale, le revêtement du disque des Méduses, etc., offrent d'excellents exemples, faciles à étudier. Il peut se modifier en vue d'adaptations spéciales, devenant cilié, sensoriel, etc.

La peau de la Grenouille fournit un bon sujet d'observation.

On se procure des lambeaux d'épithélium cutané, soit en frottant légèrement la peau du Batracien avec le dos d'un scalpel, soit en recueillant les petites pellicules cutanées qui flottent dans l'eau du bocal où vit l'animal. T3ans les deux cas, il faut immédiatement laver les lambeaux en les plaçant sur un verre de montre avec de l'eau distillée.

Les éléments peuvent être examinés directement dans l'eau, l'eau salée ou la glycérine ; il est préférable de les colorer par le picrocarmin, en les plaçant dans un verre de montre avec une goutte de ce liquide qui agit comme fixateur et comme colorant. ,

Ces diverses préparations permettent de reconnaître que les cellules sont aplaties et polygonales, avec un noyau qui absorbe fortement le carmin. Elles se montrent régulièrement superposées, ce qui indique qu'elles appartiennent à un épithélium composé ou stratifié. Ça et là, le tissu cellulaire ainsi constitué se trouve interrompu par des pertuis foncés répondant aux orifices des glandes cutanées.

De préférence , on s'adresse à des larves ou à de

jeunes Grenouilles. Chez les adultes, Tépiderme est chargé de granules pigmentaires ou même de chromatophores qui en masquent souvent la réelle structure. L'imprégnation au nitrate d'argent permet de délimiter nettement le contour des cellules. Quant à leur stratification, c*Qst surtout par la méthode des coupes qu'on peut exactement l'apprécier.

Épithéliums cylindriques ou prismatiques. '—Yormé par Taccolement de longues cellules s'élevant perpendiculairement au-dessus du tissu sous-jacent, comme les pieux d'une palissade, cet épithélium est extrêmement fréquent. Il se montre souvent associé au précédent, rappelant ainsi l'intime parenté qui unit tous les types épithéliaux.

L'épiderme ou épithélium cutané des Vertébrés, suffirait déjà à le démontrer, car, tandis que ses strates moyennes sont formées de cellules globuleuses ou pavimenteuses passant même supérieurement à la forme lamellaire, ses cellules basilaires sont presque toujours cylindriques ou prismatiques.

Chez certaines espèces, l'épiderme peut même revêtir l'aspect d'un épithélium véritablement polymorphe.

Le fait est très facile à constater chez la Lamproie : la couche basilaire, appliquée sur le derme, est cylindrique; puis viennent plusieurs assises de cellules polyédriques dont les formes varient dans de larges limites ; enfin la couche superficielle est formée de cellules courtes, cubiques/ massives et à plateau strié.

C'est principalement sur la tête ou t museau » de la

Lamproie qu'il faut observer cet épiderme pour Tétudier aisément ; ailleurs, ses cellules se trouvent mêlées de glandes et de diverses formations qui rendraient plus difficile leur exacte interprétation.

Pour ce qui est des épithéliums prismatiques ou cylindriques proprement dits, Thistologie zoologique fournit d'innombrables sujets d'étude.

La muqueuse digestive de l'Escargot en est un très bon exemple, Si on l'examine à la hauteur du pharynx on la voit formée de cellules. nettement prismatiques, allongées, avec un noyau ovalaire, situé vers le tiers supérieur de l'élément. Celui-ci peut être observé soit sur le frais, soit sur des fragments colorés directement par le picrocarmiii, ou après fixation dans l'acide osmique (à 1/1,000«) et macération dans l'alcool.

Pour juger des rapports des cellules et de l'aspect général de l'épithélium, il est indispensable de pratiquer des coupes. Pour les exécuter, on fait d'abord durcir le tube digestif dans une solution d'acide chrômique puis, après l'avoir inclus dans la paraffine, on pratique les coupes au microtome.

Régulièrement prismatiques sur la région pharyngienne, les cellules deviennent cylindriques ou fusiformes sur l'œsophage, puis assez irrégulières au niveau de l'estomac.

L'intestin des Vertébrés se prête également bien à l'examen de ce type épithélial.

On dissèque un intestin de Grenouille ; on racle son revêtement interne et on le dilacère dans le picrocarmin ou le carmin aluné ; on reconnaît alors nettement la forme allongée des cellules et de leurs noyaux.

Le polymorphisme des éléments s'affirme aussi visiblement que chez le Mollusque.

L'épithélium cylindrique ou prismatique est susceptible de recevoir les mêmes adaptations que l'épithélium pavimenteux. Il se montre même encore plus fréquemment cilié, sensoriel, etc.

Pour s'en convaincre, il suffit d'étudier le revêtement épithélial du manteau des Gastéropodes ou la gouttière bypobranchiale des Ascidiens«

Quel que soit le procédé employé (raclage, macération naturelle, macération dans l'alcool au tiers, fixation par l'acide osmique, méthode des coupes, etc.), on sera frappé de la diversité des formes épithéliales et des différences fonctionnelles qu'elles expriment : cellules protectrices, cellules glandulaires, cellules ciliées, cellules sensorielles peuvent être ainsi successivement étudiées dans le revêtement palléal des Gastéropodes.

Sur la gouttière des Ascidiens, ces divers types histiques se trouvent sériés par groupes : à une région épithéliale ciliée, fait suite une région épithéliale cylindrique ; l'épithélium devient ensuite glandulaire, pour revêtir de nouveau la forme ciliée. L'épithélium glandulaire et l'épithélium cilié se succèdent alors régulièrement jusqu'à la terminaison delà gouttière où lader-

nîère zone ciliée se modifie pour revêtir l'aspect flabellé : au lieu de porter une toison de cils vibratiles courts, lés cellules épithéliales ne portent plus qu'un long fiagellum.

Épithéliums spéciaux. — Les faits précédents permettent d'apprécier l'exacte valeur de la classe parfois admise sous le nom à! Épithéliums spéciaux^ c'est-àdire caractérisés par une fonction spéciale (sensorielle, glandulaire, sexuelle, etc.) En réalité tous les épithéliums peuvent se prêter à de semblables adaptations ; mais, au point de vue pratique, il est nécessaire de savoir comment préparer rapidement ces épithéliums^ aussi leur consacrerons-nous quelques lignes.

Comme épithélium sensoriel, on peut étudier celui qui couronne le sommet du tentacule chez les Gastéropodes.

On procède d'abord par dissociation : la calotte apicilaire du tentacule ayant macéré pendant vingt-quatre heures dans le sérum iodé, on colore son revêtement épithélial par le picrocarmin ; on dilacère lentement, avec deux aiguilles, et l'on monte la préparation dans la glycérine.

On distingue alors deux sortes d'éléments : 1» des cellules protectrices, cylindriques ou prismatiques dans leur partie supérieure qui renferme le noyau, effilées et irrégulières dans leur partie inférieure ; ces cellules sont souvent pigmentées et brunâtres; 2** des cellules sensorielles ou excitables, répondant au type dit

I bacillaire » : rélément présente une région moyenne ou somatique, de forme ovoïde, renfermant le noyau ; puis, aux deux pôles de Tovoïde, émerge un filament grêle et parfois variqueux. Le filament qui gagne le niveau libre de Tépiderme porte le nom de filament périphérique et reçoit l'excitation ; celle-ci est transniise par le filament opposé, ou filament central, à la fibre nerveuse qui vient se mettre^ en rapport avec l'élément sensoriel.

Pour juger des relations de ce dernier avec les éléments ambiants, on pratiquera de minces coupes longitudinales du tentacule après traitement par le chloî:ure d'or employé seul ou combiné avec l'action du jus de citron.

Il est intéressant de rapprocher les résultats obtenus dans une semblable série d'observations poursuiviess comparativement chez quelques types vulgaires comme l'Escargot, la Limace, la Testacelle, le Cyclostome, etc. On peut alors fort bien juger des variations secondaires des éléments épithéliaux, soit protecteurs, soit sensoriels,

A propos de ces derniers, on ne doit pas oublier que s'ils offrent généralement une forme bacillaire ou bipolaire, celle-ci ne saurait aucunement les caractériser. Elle s'observa, en effet, sur des éléments tout différents et qui n'ont rien de sensoriel, par exemple sur certaines cellules intestinales des Myriapodes, ainsi que M; Balbiani l'a parfaitement montré.

Les EpitUéliums glandulaires s'étudient aisément,.

révélant un polymorphisme des plus étendus dans leurs cellules qui peuvent être cubiques, pavimenteuses , cylindriques ou prismatiques, parfois ciliées.

Lorsqu'il s'adresse à des glandes conglomérées et volumineuses, ou simplement même multicellulaires, le débutant éprouve d'assez grandes difficultés pour étudier la cellule glandulaire prise isolément. La rapidité avec laquelle s'y forme le produit de sécrétion, l'activité générale de l'organe, la présence de divers éléments accessoires (conjonctifs, musculaires, nerveux, vasculaires). compliquent singulièrement l'observation.

Au contraire, celle-ci devient des plus simples lorsque l'on examine des glandes monocellulaires, surtout quand on les emprunte à des Invertébrés.

Il existe ainsi chez la Sangsue^ sur la muqueuse pharyngienne, de petits amas blanchâtres décrits depuis longtemps comme des organes secrétoires. Ces formations sont composées de glandes monocellulaires faciles à observer par dissociation, soit immédiatement, soit après coloration au picrocarmin.

Chaque glande apparaît sous l'aspect d'une cellule ovoïde avec un long canal excréteur. Quelquefois le même canal est commun à deux ou trois cellules ; on assiste alors au passage de la glande monocellulaire à la glande pluricellulaire.

Ij'Epithélium génital ou sexuel n'est qu'une forme fonctionnelle de l'épithélium glandulaire considéré en général. L'histologie zoologique en oiOfre de nombreux témoignages; pour s'en convaincre, il suffit d'exami-

ner un Mollusque Lamellibranche des plus vulgaires, TAnodonte.

Chez ce type, les sexes sont séparés, mais le testicule et Tovaire se ressemblent étroitement. Tous deux apparaissent sur les coupes, comme de véritables glandes en grappes. Chaque lobule se montre formé par de petites cellules épithéliales à contour irrégulier et à noyau assez volumineux. Puis, lorsque la période d'activité commence pour l'organe, certains de ces éléments croissent rapidement et subissent une différenciation spéciale pour devenir soit des ovules, soit des cellules spermatiques.

Cellules conjonctives, adipeuses, cartilagineuses, OSSEUSES, ETC. — Les cellules qui se trouvent réunies ici présentent ce caractère commun de se trouver, en général assez promptement, séparées par une substance intercellulaire (fort inexactement désignée parfois sous le nom de substance fondamentale)^ substance qui se montre susceptible de subir les différenciations, imprégnations ou incrustations les plus diverses.

Il en résulte la formation de tissus qui^ observés à leur état de complet développement, semblent très différents, tandis qu'ils se trouvent unis par une étroite parenté originelle. L'histologie a donc pu justement rapprocher dans un même groupe le tissu gélatineux de l'ombrelle des Méduses, le tissu élastique des disques intervertébraux, le tissu cartilagineux, le tissu osseux, etc.

C'est surtout par l'examen de leurs éléments constitutifs que se révèlent leurs intimes affinités; aussi l'étude pratique de la cellule animale ouvre-t-elle ici des horizons qu'on ne soupçonnerait guère si l'on se bornait à lire l'aride description des tissus qui viennent d'être énumérés.

Cellules conjonctives. — Pour apprendre à bien connaître la cellule conjonctive proprement dite, point de départ et lien commun de tous les éléments qui seront étudiés à sa suite, il faut d'abord l'examiner dans cette forme tissulaire décrite sous le nom de < tissu gélatineux i et, parfois aussi, sous la dénomiuation fort impropre de t tissu muqueux i.

Jamais le critère fondamental de tous les tissus dits de la substance conjonctive, ne s'affirme plus nettement que dans ce tissu formé de cellules rondes, rameuses ou étoilées qui se montrent éparses ou reliées par de fins prolongements, au sein d'une abondante matière intercellulaire. Tantôt cette matière est amorphe et gorgée d'eau, tantôt elle tend à s'indurer et à devenir localement fibreuse, premier indice des différenciations dont elle sera le siège dans d'autres tissus qu'elle modi fiera profondément.

Où chercher une telle forme histique? Bien qu'elle ne soit pas des plus répandues, on l'observe cependant aux deux pôles de la série des Métazoaires, si tant est qu'on puisse se servir d'une telle expression : l'ombrelle des Méduses et le cordon placentaire (gelée

Ghatist. La cellule animale. 19

de Wharton) des Mammifères se prêtent également bien à son étude.

On réussit à entrevoir la forme des éléments , épars dans la substance fondamentale ou conjonctive, en dilacérant de petits lambeaux tissulaires dans la solution de chlorure de sodium ; mais pour les bien distinguer, il faut les colorer par le picrocarmin ou le vert de méthyle ; en ajoutant une trace d'acide acétique, les noyaux des éléments apparaissent aussitôt.

Quant aux prolongements anastomotiques par lesquels les cellules se trouvent souvent reliées entre elles, leur constatation est plus délicate. ^

Pour les distinguer et les suivre, il faut pratiquer une injection interstitielle d'acide osmique en solution faible. Non seulement on peut alors observer les prolongements des cellules, mais on arrive à reconnaître entre ces dernières une remarquable diversité de formes : cellules rondes, cellules polygonales, cellules ramifiées, etc.

Les pièces qui ont subi l'injection d'acide osmique sont ensuite montées dans la glycérine picrocarminée ; elles permettent alors d'apprécier complètement la constitution des éléments.

Ceux-ci sont moins faciles à observer dans le t tissu conjonctif » proprement dit des Métazoaires. La cause en est aux différenciations subies par la substance intercellulaire et caractérisant les tissus c fibreux, réticulés, élastiques, etc. »

Pour y distinguer les cellules , il faut s'adresser de préférence à une forme tissulaire peu dense, telle que le tissu conjonctif sous-cutané et pratiquer une injection interstitielle de nitrate d'argent à 1 pour 1,000. Une coupe de l'œdème ainsi produit est portée sur la lame de verre avec une goutte de picrocarmin : on recouvre d'une lamelle et Ton place la préparation dans la chambre humide pendant vingt-quatre heures. Au bout de ce temps une goutte de glycérine est déposée sur le bord de la lamelle et se mêle au picrocarmin.

En outre des faisceaux et des fibres, on y voit, sous forme de plaques rouges, des cellules conjonctives avec leurs prolongements anastomotiques. Elles sont si minces que l'intervention du réactif colorant est indispensable, sinon les éléments échapperaient à l'observateur.

Cellules adipeuses. — Il est un cas dans lequel la cellule conjonctive peut aisément se distinguer, c'est lorsqu'elle est chargée de graisse. Telle est la fréquence de cette modification qu'elle caractérise un tissu des plus répandus, le tissu adipeux, ainsi formé de cellules gorgées de graisse et séparées par une substance intercellulaire d'abondance variable.

Rien de plus facile que de se procurer du tissu adi peux ; toutefois l'étude particulière de ses cellules est rendue délicate par ce fait qu'on se trouve sans cesse exposé à confondre les éléments avec les gouttelettes graisseuses que leur rupture met en liberté.

L'acide osmique fournit à cet égard des préparations très démonstratives, mais il entraîne l'application d'une technique assez compliquée. On peut lui substituer la suivante qui est beaucoup plus simple.

Un fragment de tissu adipeux est placé dans un petit cristallisoir avec du picrocarmin concentré. Après cette macération, qui peut durer quatre heures en moyenne, on lave à plusieurs reprises le fragment avec de l'eau distillée. On le porte ensuite sur une lame de verre où l'on a, préalablement, déposé ^ne goutte de glycérine acidifiée avec une trace d'acide acétique ; puis on dilacère lentement avec deux aiguilles. On distingue alors le contour des cellules et leur noyau. Ce dernier se trouve sur l'un des côtés de l'élément, comme refoulé par la graisse qui distend la cellule.

En outre, cette dernière possède une membrane d'enveloppe dont on peut démontrer l'existence par un procédé des plus rapides : on plonge dans l'éther un très petit fragment de tissu adipeux et on l'y laisse pendant vingt-quatre heures ; la graisse est alors dissoute et l'on distingue la membrane cellulaire revenue sur elle-même et formant des plis.

• Une excellente méthode, due à M. Ranvier, permet d'opérer la synthèse des observations précédentes, montrant tout ce qui constitue la cellule adipeuse.

Sur un animal que l'on vient de tuer, un chien, par exemple, on détache un fragment de peau muni du tissu cellulo-adipeux, et tandis qu'il est encore chaud, on y pratique une injection interstitielle avec une solu-

tion de nitrate d'argent à 1 pour 1,000. Une mince tranche de la boule d'oedème, enlevée avec des ciseaux courbes, portée sur la lame de verre et recouverte de la lamelle, montre les cellules adipeuses sous l'aspect suivant :

Leur forme est celle d'un utricule limité par une membrane à double contour.

La graisse, reconnaissable à sa réfringence, n'occupe qu'une portion de la cavité ; le reste est rempli d'un liquide séreux ; en un point se trouve le noyau vésiculaire.

On peut dès lors interpréter exactement la constitution de la cellule adipeuse : le protoplasma forme une lame plus ou moins mince, doublant intérieurement la membrane d'enveloppe et contenant d'autre part le noyau. Quant au milieu de la cellule, il est occupé par la graisse qu'une zone liquide sépare du protoplasma.

Si nous avons insisté avec des développements spéciaux sur la cellule adipeuse, c'est qu'elle offre un double intérêt pour le débutant : il est exposé à la rencontrer fort souvent et doit la bien connaître ; d'autre part, il trouve en elle un excellent type de cellule complète, telle que l'admettaient les premiers histologistes. Membrane, corps, noyau, produits, rien n'y manque.

Cellules cartilagineuses. — S'il s'agissait d'étudier au point de vue de leur structure comparative les tissus dits de la substance conjonctive, rien ne serait plus facile que d'établir l'intime parenté qui unit le

tissu cartilagineux aux tissus conjonctifs qui viennent d'être mentionnés ; mais tel n'est pas le but que nous poursuivons ici. Nous devons simplement indiquer comment on peut y déceler l'existence des éléments cellulaires.

Il est un type de cartilage qui offre à cet égard un intérêt tout spécial, c'est le cartilage qui forme la capsule crânienne des Céphalopodes.

On pratique dans ce cartilage des coupes au rasoir et on les place pendant une heure ou deux dans le picrocarminate à 1 pour 100 ; on monte ensuite dans la glycérine la préparation qui montre de magnifiques cellules ramifiées, s'anastomosant entre elles, de manière à constituer un vrai réseau (1). Il suffit de considérer ces éléments, pour voir immédiatement se révéler une évidente parenté entre le tissu gélatineux et le tissu cartilagineux d'une part, le tissu osseux et le tissu cartilagineux d'un autre côté. On peut présenter ce type de cellules cartilagineuses ramifiées comme fournissant la plus éclatante démonstration des liens qui rapprochent ces différentes espèces de tissus.

Pour les cartilages des Vertébrés et spécialement pour les cartilages « hyalins », l'observation des cellules est facile, même sans réactifs. Une coupe de cartilage, opérée au rasoir, est rapidement portée sur la lame, recouverte de la lamelle et scellée à la paraffine. Le cartilage, ainsi plongé dans son propre plasma,

(1) Ranvier, Traité technique d'histologie, 2* éd., p. 242, 1889.

montre alors ses cellules au moins sur certains points de la préparation. Ces cellules sont formées par une masse de protoplasma et un noyau; chacune d'elles remplit la capsule qui la contient.

Cellules osseuses. — Il est assez difficile d'étudier les véritables Cellules osseuses^ qu'on ne doit pas confondre avec les formations décrites sous ce nom par Virchow, et qui ne représentaient, en réalité, que les I corpuscules osseux ».

C'est dans l'intérieur de ceux-ci que se trouvent les cellules osseuses proprement dites. Pour les y découvrir, il faut décalcifier les os frais par les acides et y pratiquer des coupes avec le rasoir.

Plusieurs acides peuvent être employés. Un mélange d'acide chlorhydrique et d'eau, à parties égales, opère rapidement, souvent même avec une intensité trop vive. L'acide chromique est préférable, il agit lentement, mais efficacement, à condition de ne prendre que des fragments osseux de quatre millimètres environ de côté.

* C'est également sur de très petites pièces qu'il faut expérimenter avec l'acide picrique concentré dont les effets sont d'ailleurs assez inconstants.

On reconnaît que la décalcification est complète lorsque les fragments osseux sont flexibles et ne résistent plus au scalpel.

Ils sont montés dans la moelle de sureau, puis débités en coupes très minces.

Celles-ci sont placées dans l'eau ; ensuite, on les colore soit dans une solution de carmin neutre ou de picrocarmin, soit dans une solution d'acétate de rosaniline dans l'acide acétique, ou mieux encore, par l'hématoxy- Une et la purpurine. Enfin, les pièces sont lavées à l'eau distillée et montées définitivement.

Sur les préparations ainsi exécutées on distingue^ au milieu des figures anguleuses qui réponden t aux corpuscules osseux, des noyaux ovalaires et fortement colorés. Ces noyaux ne sont pas libres dans le corpuscule ; ils sont entourés d'une couche de protoplasma, moulée sur la paroi du corpuscule et représentant Iç corps de la cellule.

D'après les recherches récentes de M. Zachariadès, les cellules osseuses posséderaient une membrane. En outre, elles émettraient des prolongements s'anastomosant entre eux et avec les prolongements d'autres cellules voisines ou même très éloignées, le tout formant un réseau de nature protoplasmique (1).

Ces résultats sont fort intéressants et Ton ne peut s'empêcher d'être frappé de la remarquable similitude qui se manifeste entre les éléments osseux ainsi constitués et les cellules ramifiées du cartilage des Céphalopodes ou du tissu gélatineux des Méduses. La parenté des divers tissus de la substance conjonctive, s'affirme donc de la façon la plus éclatante.

(1) Zachariadès, Comptes rendus de la Société de Biologie, pp 245 et 247, 1889.

CelluiIeô musculaires. — Notre but étant simplement de rechercher comment on doit examiner la cellule musculaire, nous nous bornerons à considérer les éléments contractiles qui s'éloignent relativement le moins de la forme cellulaire initiale, c'est-à-dire les ûbres lisses. Les fibres striées sont également d'origine cellulaire, mais elles dérivent de modifications pro-^ fondes, qui ne sont pas toujours identiques et dont l'exposé ne saurait trouver place ici.

C'est chez les Nématodes de petite taille, spécialement chez les Anguillules, comme VHeterodera SchachtiU que les éléments musculaires lisses se montrent sous la forme la plus simple (1). En outre, ils ne sont pas aussi étroitement unis que dans la plupart des autres types zoologiques et l'on peut les isoler, soit au moyen de solutions alcalines faibles, soit en chauffant légèrement la préparation.

Ils apparaissent alors comme des cellules fusiformes à contenu finement granuleux et à noyau très vi^ sible.

Les Nématodes de grande taille, comme les Ascarides, sont moins favorables à ces recherches : les éléments musculaires y sont plus volumineux, mais de forme . irrégulière et fortement soudés entre eux ou étroitement unis au tégument.

On peut facilement étudier les éléments musculaires sur les Etoiles de Mer où ils se montrent sous

(1) Vby. Fig. 30, p. 62.

une forme assez simple. La cellule musculaire représente une cellule embryonnaire très allongée, fusiforme, avec un gros noyau et de rares granulations. La macération suffit souvent à Tisoler. En fixant la préparation par l'acide picrique, la fibre musculaire prend bientôt une teinte jaune qui permet de la distinguer nettement.

Chez les Gastéropodes, comme TEscargot, les éléments musculaires sont encore fusiformes et allongés. Leur noyau est de dimensions variables. Pour les isoler, il faut faire macérer des fragments de muscle, pendant plusieurs jours, dans une solution d'acide chrômique à lAOOO».

Les muscles lisses des Vertébrés pourront être utilelement étudiés, lorsqu'on aura ainsi appris à connaître rélément sous sa forme la plus simple. Lintestin et l'estomac de la Grenouille fournissent d'excellents matériaux d'observation.

Les éléments musculaires se trouvant intimement unis par une substance cimentante, il faut les traiter par des réactifs qui puissent les isoler sans les déformer. Les solutions de bichromate de potassse ou d'ammoniaque à 1 pour 1,000 permettent assez bien d'at teindre ce but et l'on peut alors constater des détails qui se trouvaient déjà ébauchés dans les cellules musculaires de l'Escargot, mais qui s'accentuent notablement chez le Vertébré.

Considérées à l'extérieur, les cellules musculaires se

montrent renlBées en leur milieu, effilées à leurs extrémités; elles sont donc fusiformes. Cet aspect n'est toutefois pas constant : certains, éléments sont aplatis et rubanés ; souvent l'une des extrémités et même les deux sont bifurquées.

Au point de vue de leur constitution, les cellules musculaires sont composées d'une substance réfringente qui paraît homogène ; mais l'action de Tacide azotique, de l'alcool, etc., y décèle une structure nettement fibrillaire.

C'est généralement vers le milieu de l'élément que se voit le noyau, ovoïde et allongé. Une zone de protoplasma granuleux le sépare de la substance contractile représentée par les fibrilles.

L'a cellule musculaire semble limitée par sa propre substance, sans posséder de membrane d'enveloppe. Les divers réactifs sont impuissants à en faire apparaître la moindre trace.

Cellules nerveuses. — Pour prendre une idée générale de la cellule nerveuse, on peut d'abord l'examiner «hez TEcre visse.

On enlève un ganglion de la chaîne nerveuse ; on la dilacère dans le picrocarmin, puis on monte dans la glycérine la préparation.

Elle montre les cellules constituées par un corps protoplasmique d'où émanent des prolongements et qui renferme un noyau toujours apparent. Souvent môme ce noyau acquiert de grandes dimensions et semble

vouloir envahir tout rélément qui passe ainsi à la forme myélocyte. Tous les états intermédiaires s'observent entre ce type et la cellule nerveuse normale, telle qu'elle vient d'être décrite (1).

Si l'on veut étudier de même les cellules nerveuses des Vertébrés, la méthode suivante permet de les isoler facilement.

Avec des ciseaux courbes, on enlève, sur un cerveau frais de Lapin ou de Mouton , de petits fragments de substance grise qu'on laisse macérer durant vingt ou trente heures dans un mélange composé de :

Eau distillée 200 gr.

Alcool à 90*» 95

Au bout de ce temps, on place les fragments dans un flacon à large ouverture rempli aux trois quarts d'eau distillée ; on agite assez fortement, puis on porte les pièces dans du carmin ammoniacal étendu d'un cinquième d'eau. On laisse macérer un quart d'heure ou ime demi -heure; on dilacère après avoir ajouté quelques gouttes d'acide acétique et l'on monte dans la glycérine. — Cette méthode met les noyaux en évidence et se prête particulièrement à l'étude générale de la cellule nerveuse.

Toutefois, pour apprécier exactement les caractères

(1) Joannes Chatin , Sur les myélocytes des Invertébrés {Comptes 'pendus de V Académie des Sciences, 1888),

de cet élément, on doit recourir à des procédés plus précis.

Il en est un qui donne d'excellents résultats pour récorce grise du cerveau des Mammifères. Nous le devons à Golgi.

On durcit l'écorce cérébrale dans le liquide de Muller ou dans une solution de bichromate de potasse dont on augmente graduellement la concentration de 1 pour 100 à 2,5 pour 100 ; il faut pour cela quinze à vingt jours, mais il vaut mieux prolonger le traitement jusqu'à vingt ou trente jours. Mettre les pièces durcies directement dans une solution de sublimé corrosif de 0,25 à 50 pour 100 ; renouveler cette solution tous les jours pendant huit à dix jours. Faire des coupes et bien laver à l'eau avant de monter au baume. Il n'est pas nécessaire de colorer, les tissus étant imprégnés par le mercure ; ils paraissent blancs à la lumière réfléchie, noirs à la lumière transmise. Les éléments mis en évidence par ce procédé sont :

10 Les cellules nerveuses et leurs prolongements qui s'affirment nettement ;

2® Les cellules du tissu conjonctif avec leurs prolongements rayonnants ;

Z^ Les vaisseaux.

Pour les cellules ganglionnaires des Vertébrés, le procédé de M. Ranvier est depuis longtemps classique et permet d'étudier non seulement la structure de la cellule, mais ses rapports avec les fibres nerveuses, rapports si importants.

302 ÉtUDE PRATIQUE DE LA CELLULE ANIMALE

Sur une Raie vivante ou qui vient d'être sacrifiée, on dégage quelques ganglions spinaux et l'on y fait une injection interstitielle d'acide osmique à 1 pour 100. Les ganglions ainsi injectés sont enlevés et placés dans du sérum iodé. C'est dans ce dernier réactif que l'on poursuit la dissociation au moyen des aiguilles et que l'examen doit être pratiqué.

Nous conseillons au débutant de s'attacher à ces méthodes et de s'habituer immédiatement à suivre une technique rigoureuse. Nous l'engageons également à étudier avec soin la cellule nerveuse en la comparant chez divers animaux. Il est peu de formes histiques dont l'examen, ainsi poursuivi, fournisse plus de notions importantes.

C'est en observant les cellules ganglionnaires de l'Ecrevisse que Remak a entrevu la réelle structure de l'élément nerveux ; c'est par l'étude des Mollusques et des Poissons que M. Ranvier a pu définitivement fixer la science sur ces questions si longtemps controversées. Il serait impossible de choisir un meilleur exemple pour conclure et montrer la haute valeur des faits révélés par l'histologie zoologique.