Coupes en série

Pour la préparation des coupes en série, surtout de petits fragments de tissus: limaçons, canaux demi-circulaires, coupes transversales du tympan, articulation malléo-incudéenne, système cavitaire entre le marteau et l'enclume et la paroi externe de la caisse tympanique, la muqueuse de la caisse etc., où il s'agit de reconstituer la topographie de la partie en question, par la succession des coupes, il faut recommander la méthode suivante, employée dans les stations zoologiques pour l'étude des petits animaux et dont je suis redevable à M. le docteur Koller .

Coloration in toto : 1° dans la solution au picro-carmin de Ranvier ; 2° dans la solution alcoolique d'hématoxyline ou 3° dans le carmin boracique.

Le fragment de tissu est porté de l'alcool directement dans le liquide colorant et y reste deux à quatre jours d'après sa grandeur, le moins longtemps (1-2 jours) dans le carmin boracique. Ensuite la préparation est lavée (décolorée) dans l'alcool à 70 % (dans l'alcool acidifié lorsqu'on emploie le carmin boracique). Durée de la décoloration '/« à '/s-l heure.

Alors la pièce est placée pendant plusieurs heures dans l'alcool absolu pour la déshydratation. De l'alcool elle est plongée pendant plusieurs heures dans la térébenthine , puis placée dans un mélange de térébenthine et de paraffine (sur le bain d'eau de 60°) , y reste pendant plusieurs heures , puis est placée pendant plusieurs heures dans la paraffine pure ( dure ).

Après le montage, la paraffine fondue est rapidement solidifiée en plongeant la pièce dans l'eau froide, de manière qu'elle se solidifie en prenant un aspect vitreux homogène et ne devienne pas d'un blanc de neige.

Le verre porte-objet est enduit d'une couche aussi mince que possible, à peine visible , de collodion et d'huile d'œillet (à parties égales) ; les coupes sont placées sur cette couche et exposées , pendant 10 à 15 minutes , à une température de 60° , de sorte que la paraffine fond et que l'huile de girofle s'évapore. Par ce procédé , la coupe est solidement collée au verre et l'on peut placer celui-ci dans un récipient rempli de térébenthine pour extraire la paraffine. Le montage dans le baume de Canada ou le vernis de Damar est le même que dans les autres méthodes.

Pour la préparation de coupes en série de parties isolées de l'organe auditif, il faut recommander une méthode publiée (1) par le Dr Ignazio Dionsio de Turin; nous allons la décrire ici brièvement. Les pièces microscopiques sont placées l'une à côté de l'autre sur le porte-objet , dans l'ordre de leur succession et recouvertes d'un réseau délicat métallique, spécialement construit dans ce but. Ce réseau est fixé par une disposition spéciale à l'aide de deux crochets , aux extrémités du porteobjet, de manière que toutes les coupes sont également maintenues sans cependant

(1) Travail du laboratoire du professeur Schenk à Vienne.

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être trop fortement pressées. Toutes les coupes ensemble peuvent être soumises aux manipulations habituelles du traitement des coupes microscopiques , en plongeant le porte-objet fixé dans l'appareil , dans la solution colorante , l'alcool et en dernier lieu dans l'essence de girofle ou l'huile d'origan. Lorsque les coupes sont suffisamment éclaircies dans l'une des huiles désignées, l'huile en excès est aspirée en appuyant légèrement du papier buvard sur le réseau , puis on enlève celui-ci et l'on monte les coupes dans le baume de Canada ou le vernis de Damar.

L'avantage de ce procédé consiste en ceci : les coupes , même les plus fines , traitées par divers liquides , ne s'enroulent pas et la durée de la plupart de ces manipulations de coloration et d'éclaircissement qui prennent beaucoup de temps , se trouve notablement réduite.

Quelques méthodes spéciales de la technique microscopique , surtout celle pour l'examen de l'organe de Corti et du trajet central du nerf auditif, seront exposées dans le chapitre suivant , au cours de la description de l'examen histologique des diverses parties de l'organe.