CHAPITRE I

Technique,

Comme liquides fixateurs, nous avons eu recours à l’alcool, au liquide de Müller et à l'acide osmique à 1 pour 100.

Pour l'inclusion, nous avons employé la méthode xylol-paraffine et toutes nos pièces ont été coupées au microtome Minot. Nos coupes ont été généralement faites au 1/100 de millimètre. |

Comme colorants, l’hématoxyline alunée et une solution formée d’un mélange d’éosine, de fuchsine acide et d'orange

EOSinesR MEN EE bec, solution aqueuse à 1 pour 100. ?

Fuchsine acide. . . . 5cc, solution alcoolique saturée. ?

Orange. , . . . . 10€, solution aqueuse saturée.”

nous ont donné de bonnes préparations. La fuchsine acide colore en effet très fortement les-bandes fibreuses tandis que l’éosine colore bien le protoplasma cellulaire. L’orange colore les globules sanguins.

Pour la recherche des bacilles dans nos coupes, nous avons légèrement modifié la méthode d’Erlich.

On prépare une solution alcoolique saturée de fuchsine basique. À 100 centimétres cubes de cette solution, on ajoute 10 centimètres cubes d’aniline.

La solution ainsi faite se conserve bien et est toujours

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prête à servir. Il suffit d’en prendre une certaine quanlité et d'y ajouter une égale quantité d’eau. Le bain colorant contenant les coupes est mis à l’étuve à 50° pendant une demi-heure. Un procédé rapide quand les coupes sont collées sur la lame consiste à mettre quelques gouttes de la solution et quelques gouttes d’eau, puis à cha uffer légèrement jusqu'à production de vapeur.

Les coupes sont ensuile, après lavage, décolorées par le chlorhydrate d’aniline et l'alcool absolu suivant la méthode de Borrel. |

Le bleu de méthylène est certainement la couleur préférable pour recolorer le fond. Mais les préparations ainsi traitées se décolorent malheureusement vite.

On obtient de bonnes préparations par la coloration double à l’hématoxyline et à l'orange.

Pour la recherche de la graisse, on met un très petit morceau de l'organe dans une solution d'acide osmique à 1 pour 100. Quand il est bien imprégné, on le lave à grande eau et on le déshydrate par la méthode de l’alcool. Après un séjour de 2 heures dans l'alcool absolu, on le plonge dans le chloroforme ; le morceau surnage d’abord, puis s’imprégnant petit à petit de chloroforme tombe au fond du flacon. On le met alors dans un mélange à parties égales de chloroforme et de paraffine à l’étuve à 38°, de là à l’étuve à 50°; pas plus d’une heure dans chaque étuve et on le place enfin dans la paraffine pure.

Pour éclairair les préparations, au lieu d'employer le xylol, on emploie le chloroforme. La combinaison de l'acide osmique et de la graisse est insoluble ou tout au moins très faiblement soluble dans le chloroforme.