PREMIÈRE PARTIE

Transplantation de pattes de Crapaud sur larves de Salamandre.

Je distinguerai pour cette expérience deux séries, suivant que les pattes ont été prélevées sur des têtards arrivés à la période critique — c'est-à-dire au moment où ils viennent de perdre le pouvoir de régénérer leurs membres — ou qu‘elles sont empruntées à de jeunes Crapauds venant de se métamorphoser.

i re Série. Transplantation de pattes postérieures de têtards arrivés à la période critique.

Sur une trentaine de greffes, ayant commencé à reprendre, huit seulement ont pu être conservées assez longtemps, les autres s'étant détachées ou ayant été détruites par des infections secondaires. J’indiquerai d’abord, dans un tableau, les époques auxquelles les amputations et les prélèvements ont été effectués.

Date de la greffe

Amputation

Prélèvement

après

amputation

après

greffe

26 jours

27 jours

53 jours

8 il

Je dirai tout de suite que, dans tous les cas, les larves de Salamandre ont parfaitement régénéré la patte qui leur avait été amputée à titre de contrôle. Inversement, aucun des têtards ayant fourni les pattes transplantées n'a régénéré les membres enlevés. Les moignons se sont simplement cicatrisés, présentant tout au plus,

E. GUYÉNOT

dans quelques cas, une petite saillie axiale qui n’a pas évolué dans la suite. Je passerai maintenant à la description de chaque cas particulier.

Z 2. Greffe effectuée le 24 avril 1925; la patte présente une individualisation nette des cinq doigts. Deux jours après, la base du greffon se montre gonflée par b afflux de liquide (fig. I). Au bout de 12 jours, cet œdème local a régressé; les dessins à la chambre claire montrent que la patte a subi un léger accroissement. Le 20 mai, 26 jours après l’implantation, la patte est amputée à la base du tarse. L'examen au binoculaire montre, à ce moment, sur la surface

Fig. 1.

Croquis effectué à un moine grossissement et à la chambre claire montrant diverses étapes des pattes greffées Z 2 et Z 3. En haut, la greffe Z 2: i, le lendemain de la transplantation; 2, au bout de 8 jours, gonflement de la base; 3, dix jours après l’amputation; 4, vingt trois jours après l’amputation. En bas, la greffe Z 8: 1 le lendemain de là transplantation; 2, treize jours plus tard, base gonflée; 3 , deux jours après l'amputation; 4 , trente et un jours après l’amputation.

HÉTÉROGREFFES

de section, la présence d'une minime gouttelette de sang, ce qui indique que la greffe est bien vascularisée. Le lendemain, la plaie

Fig. ÏI.

Coupe à travers la greffe Z 2 : point de soudure des deux épidermes ; p, péroné; f, tibia; /, portion distale du fémur; /?. trainées de pigment jalonnant la zone primitive de contact (x 56).

est cicatrisée, l’épiderme nouveau présentant, comme celui du reste de la patte, la teinte gris noirâtre qui distingue nettement la peau de Crapaud de la peau jaune d'or de la larve de Salamandre. Au centre de la cicatricê se forme une petite saillie plus claire qui ne

E. GUYÉNUT

disparait pas dans la suite, mais ne présente non plus aucune croissance ni différenciation ultérieures. Cet aspect est très comparable à celui que Ton observe parfois sur les pattes cicatrisées des têtards. Le 13 juin, la larve de Salamandre subit une mue et entre en métamorphose. Le moignon de patte a un peu grandi, a pris une forme pyramidale; la petite saillie s’est légèrement aplatie.

Le 16 juin, 53 jours après l'implantation et 27 jours après l'amputation, la larve de Salamandre est fixée avec son greffon en vue d'une étude histologique.

Sur les coupes (fig. Il), on reconnaît que l’épiderme de Crapaud a persisté sur toute la patte en conservant ses caractéristiques; il se distingue nettement de celui de la Salamandre par sa moindre épaisseur, par l’absence des cellules de Leydig, par la taille moindre des cellules et de leurs noyaux (fig. 111). Les chromatophores sous-jacents sont plus serrés et moins volumineux que ceux du porte-greffe.

Vu, III.

Dessins montrant la différence la plus habituelle entre la dimension des éléments dans l’épiderme de Crapaud (B) et de Salamandre f l) et dans les cartilages de Salamandre (C) et de Crapaud (!) (x 500).

Au point d’accolement des deux épidermes, on voit ceux-ci s’enfoncer en coin dans les tissus et être prolongés par des traînées de pigment, jalonnant la surface primitive de contact.

HÉTÉROGREFFES

Le greffon est implanté latéralement par rapport à la colonne vertébrale. Il renferme trois pièces squelettiques, dont la plus profonde représente l'extrémité distale du fémur, les deux autres, parallèles, le tibia et le péroné. Ces parties sont encore cartilagineuses, mais ont subi, dans leurs diaphyses, un début d’ossification. Les cellules cartilagineuses sont tout à fait normales; on y observe çà et là quelques caryocinèses ; elles se distinguent des cellules cartilagineuses de la Salamandre — celles des neurapophyses par exemple — par leur moindre dimension, ainsi que par l'exiguïté des loges qui les renferment (fig. III). Il y a là un précieux élément de comparaison que j’utiliserai plus loin.

Sur les flancs des pièces squelettiques, et surtout dans les coupes moins axiales que celle ayant servi au dessin de la figure II, on observe des fibres musculaires, en voie de différenciation; celles-ci sont cependant peu nombreuses, quelques-unes paraissent en dégénérescence; on rencontre surtout des éléments ayant l’aspect de myoblastes. Tout autour des ébauches squelettiques, le tissu conjonctif de Crapaud (bien reconnaissable à la plus faible dimension de ses éléments), formé principalement de fibroblastes, s’est disposé en couches concentriques; c'est là le premier stade d'une évolution particulière du conjonctif — sa transformation en cartilage de néoformation — que nous rencontrerons dans d'autres cas. Vers l’extrémité terminale du greffon, on observe une agglomération d’éléments conjonctifs, de fibroblastes, de fibres musculaires en différenciation, qui correspond à la saillie axiale que l'on voyait à la surface de la cicatrice.

La structure des éléments cellulaires, la présence de caryocinèses, montrent que le greffon, après 53 jours d’implantation, a conservé un état remarquable de vitalité. Il faut cependant noter que la différenciation n’a que fort peu progressé par rapport à ce qu’elle devait être au moment de la transplantation. Tout au plus pourrait-on considérer comme telle la formation d’un manchon diaphvsaire osseux. Les fibres musculaires sont restées incomplètement différenciées; la plupart paraissent avoir été résorbées. Je n’ai aperçu aucune figure de phagocytose.

Du côté du porte-greffe, il y a peu de choses à noter si ce n’est un afflux de cellules conjonctives vers le greffon et une croissance hypertrophique anormale de la neurépine. Il est possible que cette dernière modification soit due à une blessure des ébauches verté-

E. GUYENOT

braies au moment de l'implantation. Les aspects que je décrirai plus loin porteraient plutôt à y voir le résultat d’une croissance orientée dans le sens du greffon, mais contrariée par la résistance des plans musculaires, en raison de la situation très latérale de la greffe.

Z 3. Greffe effectuée le 28 avril. Evolution habituelle; le gonflement cesse vers le 15 mai et la patte est amputée le 20 (22 jours après l’implantation) Le lendemain, la plaie est cicatrisée. Dans la suite, la greffe change un peu de forme, mais il n’y a aucun indice de régénération (fig. I) jusqu’au 26 juin (37 jours après l’amputation, 59 jours après la greffe), date à laquelle la pièce est fixée.

On voit sur les coupes (fig. IV) que le greffon est implanté assez latéralement par rapport au plan sagittal de la Salamandre. Ce qui frappe en premier lieu, dans les rapports entre le porte-greffe et le greffon, ce sont les déformations considérables que présentent les neurapophyses du premier. Le plan sagittal de la larve est jalonné par remplacement de la chorde dorsale et de la moelle épinière — celle-ci assez fortement déviée d’un côté — et l’on voit que ce plan vient couper la peau un peu en dehors de la limite interne du greffon. Par rapport à ce plan, les neurapophyses présentent un changement très net d’orientation, l’une d’elles s’étant couchée transversalement, l’autre obliquement, de manière que toutes deux convergent vers une neurépine (visible sur d’autres coupes) qui est venue se placer juste au-dessous de la base du greffon. Corrélativement, la moelle épinière et la chorde ont subi des déformations secondaires. Il y a là un phénomène que nous retrouverons chaque fois que la larve était assez jeune, au moment où elle a reçu la greffe, pour que ses parties vertébrales en voie de différenciation aient pu être influencées par la présence du greffon. On note alors soit une déviation, soit une hypertrophie des arcs neuraux, toujours orientés vers le greffon, comme si celui-ci exerçait une sorte d’attraclion sur les éléments squelettogènes de son hôte.

Le greffon lui-même est revêtu par son propre épiderme, nettement séparé de h épiderme de Salamandre. Les parties molles sont constituées surtout par des éléments conjonctifs, disposés d'une façon plus lâche à l’extrémité distale, réunis en amas denses dans la partie centrale. On rencontre quelques faisceaux musculaires en médiocre état el d’assez nombreux myoblastes. 11 semble qu’ici encore ce soient les éléments contractiles qui aient le plus été modi-

HETEROGREFFES

fiés; ceci est peut-être en rapport avec le fait que les fibres ont, pour la plupart, été doublement sectionnées, une première fois au moment de la transplantation, une deuxième fois lors de l’amputation du greffon.

G est l’évolution des pièces squelettiques de la greffe et du tissu conjonctif qui les entoure qui présente ici les particularités les plus

Fig. IV.

Coupe à travers la greffe Z 3: i , épiphyse du tibia; e et ", cartilages secondaires à cellules de Salamandre; j, neurapophyse fortement déviée (x 56).

remarquables. La coupe, représentée fig. IV, passe au niveau des extrémités épiphysaires du tibia et du péroné: ce sont des masses cartilagineuses dont les éléments sont beaucoup plus petits que ceux des cartilages voisins de la Salamandre. Autour de ces carti-

E. GUYÉNOT

lages, se trouve un tissu fibro-cartilagineux, dont les cellules, de petite taille, appartiennent en propre à la patte de Crapaud. Les deux épiphyses sont coiffées de deux plaques cartilagineuses de néoformation; on retrouve une masse cartilagineuse analogue à la base du greffon. Ces cartilages sont indépendants des ébauches du tibia et du péroné et se sont différenciés in situ , dans l’épaisseur de la gangue conjonctive.

Cette disposition est encore plus nette si Ton étudie une coupe intéressant les diaphyses des pièces zeugopodiques (fig. V). On reconnaît, sur la coupe, orientée obliquement par rapport à l’axe du greffon, deux noyaux cartilagineux correspondant aux ébauches primitives du tibia et du péroné et dont la périphérie présente un début d'ostéogenèse. A l’intérieur de l’osséine, se trouvent emprisonnés quelques ostéoblastes et la substance fondamentale se prolonge à la périphérie sous forme de filaments plus ou moins anastomosés, diffusant dans le tissu périphérique.

Autour de ces diaphyses se trouve un anneau d’un tissu miconjonctif, mi-cartilagineux, dans lequel on peut suivre toutes les étapes de la transformation, en cartilage de Crapaud, de la gaine conjonctive encore si nette dans la zone des épiphyses. On y observe des îlots, des plaques de cartilage néoformé, dont les cellules sont de vrais chondroblastes et dont la substance fondamentale retient fortement l’hématéine. Le reste est formé par une substance hyaline, ne se colorant pas encore à la façon du cartilage, renfermant quelques fibroblastes libres et d’autres qui, tout en ayant gardé leur forme allongée caractéristique, sont emprisonnés dans des loges creusées dans la substance fondamentale; d’autres cellules enfin sont déjà des chondroblastes typiques. Cette zone en voie de chondrification est, à son tour, enveloppée par une deuxième gaine fibreuse, très mince par endroits.

Enfin, autour de cet ensemble, constitué par des éléments appartenant en propre au greffon, on rencontre à nouveau des cellules conjonctives, principalement des fibroblastes. Les dimensions des éléments montrent qu’il s’agit là de cellules de Salamandre, qui ont émigré en suivant l’arc neural jusque dans le greffon lui-même. Dans cette deuxième zone, on observe à nouveau des phénomènes de chondrification avec- tous les passages entre des cellules libres, des éléments emprisonnés dans une substance fondamentale incomplètement transformée et de véritables plaques cartilagineuses. Les

HÉTÉROGREFFES

dimensions des ehondroblastes et celles de leurs loges indiquent que l’on a bien affaire à un cartilage de Salamandre, en tout semblable à celui des neurapophvses. On voit, sur le dessin, une de ces plaques

Fig. Y.

Coupe à travers le zeugopode du greffon Z 3. On voit, les cartilages du tibia et du péroné, entourés d’un anneau diaphysaire osseux, puis d’une couche de cartilage de Crapaud en voie de différenciation. En haut, sous l’épiderme, et en bas, entre les faisceaux de muscles, des ilôts de cartilage à cellules de Salamandre (x 170).

Rev. Suisse de Zool. T. 3'i. 1927.

E. GUYÉXOT

cartilagineuses à la base de la figure et le début d’une autre à l'extrémité opposée, tout près de l’épiderme.

On peut donc relever ici l’existence de deux processus remarquables: d’une part, une migration des éléments conjonctifs et une déviation des ébauches vertébrales du porte-greffe, qui se font dans la direction du greffon qui paraît exercer sur eux une action attractive; d'autre part, la transformation de proche en proche des tissus conjonctifs du greffon d'abord, du porte-greffe ensuite, tissus dont la substance fondamentale acquiert peu à peu les caractères du cartilage, tandis que les fibroblastes enfermés à son intérieur prennent finalement l’aspect de chondroblastes.

Z. 21. Greffe effectuée le 7 mai (PI. 1, fig. 4). L'afflux de la lymphe dans la base du greffon détermine le gonflement de cette partie, état qui persiste jusque vers le 25 mai. Le 2 juin (26 jours après l’implantation) la patte a repris ses dimensions normales et est amputée un peu au-dessous du tarse. La plaie est cicatrisée le lendemain. Dans la suite, le moignon garde le même aspect, sans présenter trace de régénération jusqu’au 28 juin (26 jours après l’amputation, 52 jours après l’implantation), date à laquelle la pièce est fixée.

Je décrirai d'abord, à titre d'exemple, l'état du pied enlevé par l'amputation le 2 juin (fig. VI), ce qui nous renseignera sur le degré de conservation des tissus après 26 jours de transplantation. Les doigts qui ont un peu grandi ont un squelette cartilagineux bien différencié. La peau de Crapaud est normale; sur les flancs des parties squelettiques se trouvent des fibroblastes nombreux, des faisceaux de myoblastes et de fibres musculaires en voie de différenciation. Par rapport à ce que l'on observe dans les moignons prélevés plus tard, les éléments contractiles se montrent en parfait état et ne présentent pas trace de dégénérescence. Tous les tissus sont d’ailleurs tout à fait normaux, bien vivants; les éléments de toutes sortes présentent d’assez nombreuses caryocinèses. 11 n’y a pas de doute qu'au moment où le grelfon a été amputé, il se trouvait en excellent état de conservation et ce n’est pas dans une diminution de la vitalité de ses parties, ni dans une désorganisation de l'ensemble qu'il faut chercher la cause de la non-régénération consécutive.

L’examen du moignon fixé 26 jouis plus tard montre la présence

HÉTÉROGREFFES

de l’extrémité distale du fémur, du tibia et du péroné; ces ébauches cartilagineuses ont subi, par endroits, dans leurs portions diaphy-

Goupe à travers le pied du greffon Z 21, au moment où il est enlevé par l’amputation ( x 70).

saires, un début d’ossification. La coupe, représentée fig. Vil, est intéressante, en ce qu'elle montre les deux extrémités coupées carrément des pièces du zeugopode qui n’ont été Lobjet d’aucun complètement par régénération. L'épiderme de Crapaud est normal; le tissu conjonctif tend à se condenser autour des ébauches squelettiques, mais n’a pas encore subi de chondrification. Les éléments musculaires sont rares, souvent dégénérés; par comparaison avec l’état des éléments contractiles 26 jours plus tôt, on se rend compte que la plupart d'entre eux ont dû être résorbés.

Du côté du porte-greffe, on ne note qu’une légère déviation des neurapophvses, la greffe ayant d’ailleurs été insérée très près de la crête dorsale. Il y a cependant eu migration des cellules conjonctives de Salamandre qui sont venues entourer la base du greffon. Ici encore, ces cellules se trouvent, par places, englobées dans des aires

E. GUYENOT

de substance fondamentale prenant peu à peu les caractères du cartilage. Toutefois, cette transformation est beaucoup moins accusée que dans le cas de la greffe précédente.

Z. 25. Greffe effectuée le 10 mai. La base, d'abord gonflée par l'afflux de la lymphe, reprend ses dimensions normales vers le

Fig. VII.

Coupe à travers la greffe Z 21 : c, neurapophyse légèrement déviée; /. fémur; b , péroné; ci tibia; a , cartilage secondaire à cellules de Salamandre (x 56b

13 juin. L’amputation du pied est pratiquée le 16 juin seulement, 37 jours après l'implantation. Ce retard est dû à ce que j’avais pris pour règle de ne jamais amputer le greffon avant que l’œdème de la

HETEROGREFFES

base ait complètement disparu. L’expérience m'avait, en effet, montré que si l’amputation est pratiquée plus tôt, presque toujours la greffe cicatrise mal sa plaie et entre rapidement en dégénérescence. Je pense que le moment ou la base cesse d’être gonflée correspond à l’établissement d’nne circulation vasculaire normale. Le moignon du greffon se cicatrisa un peu lentement et resta sans présenter aucune régénération jusqu’au 11 juillet (25 jours après l’amputation, 62 jours après l’implantation), date à laquelle le porte-greffe fut trouvé mort à la suite d’une amibiase cutanée. Pas d’examen histologique.

Z. 26. Greffe effectuée le 26 mai. Le greffon, après avoir présenté le gonflement basal suivi du retour aux dimensions normales, fut amputé le 13 juin (18 jours après l'implantation), juste au moment où le têtard qui avait fourni la greffe se métamorphosait avec trois pattes, le membre amputé n’ayant, comme toujours, pas été reconstitué. La plaie fut cicatrisée en 24 heures et le moignon persista sans changement et sans aucun indice de régénération jusqu’au 8 juillet (25 jours après l’amputation, 43 après l’implantation), date à laquelle la larve de Salamandre fut trouvée morte, tuée par les mêmes parasites. Pas d’examen histologique.

Z. 27. Greffe de patte postérieure de têtard ne présentant encore qu’un seid doigt individualisé, effectuée le 26 mai. Bien que cette patte soit moins différenciée, le têtard qui l’a fournie et qui a aussi livré la greffe du cas suivant (Z. 28) ne régénéra nullement ses pattes postérieures. Le 16 juin (21 jours après l’amputation), il ne présentait que deux moignons de cuisse, dont l'un était fermé par une cicatrice plane, et dont l'autre avait présenté dès le début, au centre de la cicatrice, un petit renflement qui n’a pas évolué dans la suite.

La patte greffée subit les transformations habituelles (gonflement de la base) et présenta un achèvement de sa différenciation, si bien que le dessin exécuté le 13 juin montre l’indication nette de quatre doigts. Le 16 juin (21 jours après l’implantation), le greffon est amputé au-dessus du tarse. Le lendemain, la surface est cicatrisée. 11 n'y a eu aucune régénération jusqu’au 8 juillet (24 jours après l'amputation, 45 jours après l’implantation), date à laquelle la Salamandre fut fixée.

E. Gl VÉNOT

L'examen histologique (lig. VIII) montre que le greffon offre la structure habituelle; persistance des pièces squelettiques (tibia et péroné) qui présentent un léger début d'ossification; peau de Crapaud normale, tissu conjonctif à cellules peu abondantes; éléments musculaires paraissant avoir tous dégénéré. Du côté cfu portegreffe, on peut tout au plus noter une légère incurvation de la neurépine. Il n v a pas eu de chondrification de voisinage, ce qui est peut-être en rapport avec la jeunesse du greffon.

Coupe à travers la greffe Z 27. On ne note <{ifiune légère déformation de la lieu répi ne (x 50).

Z. 28. Greffe d'une patte postérieure n'avant qu'un seul doigt individualisé et provenant du même têtard que la précédente, effectuée le 2(3 mai. La patte qui a subi l'évolution habituelle est amputée le 16 juin, au bout de 21 jours. Le moignon est cicatrisé et reste sans modifications jusqu'au 10 juillet, date du prélèvement (45 jours après l’implantation, 24 jours après l'amputation).

L’examen histologique (fig. IX) montre le bon état des deux pièces squelettiques, tibia et péroné, qui présentent un début d'ossification. D’un côté, l'épiderme de Crapaud a disparu et a été remplacé par la peau de Salamandre, ce qui était déjà visible sur le vivant, la

HÉTÉROGREFFES

peau dorée du porte-greffe envahissant le greffon par la base. Les parties molles sont très réduites. Du côté du porte-greffe, on note une déformation très nette des neurapophyses et une traînée d'éléments conjonctifs de Salamandre se continuant au voisinage des ébauches squelettiques du greffon par une bande de tissu cartilagineux. Le contraste entre les grandes cellules du cartilage de Salamandre et les petites cellules du cartilage de Bufo est particulièrement net.

Z. 30. Greffe effectuée le 18 juin. Le gonflement de la patte, très net au bout de 48 heures, régresse assez vite et l'amputation a pu être faite le 24 juin, 6 jours seulement après l'implantation. Ce cas

Fig. IX.

Coupe à travers la greffe Z 28: /*, neurépine déformée: o. cartilage secondaire de Salamandre allant jusqu’à la base du greffon (x 50).

est intéressant, en ce sens que l'amputation a été pratiquée très précocement, avant qu'aucune dégénérescence des parties molles

E. GUYEXOT

ait pu se produire. Le lendemain, la surface de section est cicatrisée. Dans la suite, le moignon subit un léger accroissement, mais sans présenter aucun indice de régénération. La base est partiellement envahie par l'épiderme de Salamandre. Le greffon est fixé avec la larve porte-greffe le 11 juillet, 17 jours après l’amputation et 23 jours après l'implantation.

I/examen des coupes (fig. X) montre que l'amputation a passé par le milieu de la région tarsienne. Le greffon est bien vivant; ses pièces squelettiques sont en voie d'ossification; le tissu conjonctif de Crapaud est abondant, les myoblastes et fibres musculaires forment des faisceaux, surtout nombreux sur certaines coupes.

Fi<;. X.

Coupe à travers la grelïe Z ’M): /, fémur; /, tibia du premier groupe zeugopodique; p. péroné du deuxième groupe zeugopodique; ", cartilages du tarse; m . faisceaux musculaires; ^ vaisseau sanguin (x 5P>).

HETEROGREFFES

On rencontre la section de vaisseaux sanguins très gros et remplis de sang. Aucun indice de dégénérescence.

Le fait le plus singulier est une sorte de dédoublement des os du zeugopode. On observe, en effet, à la base du greffon la partie distale du fémur, puis le tibia et le péroné, dont les diaphyses commencent à s'ossifier. Les épiphyses distales de ces os sont noyées dans un tissu conjonctif riche en fibroblastes et sont en continuité avec les épiphyses de deux nouvelles pièces squelettiques, elles-mêmes coiffées par les cartilages tarsiens. Il est difficile d'imaginer quelles ont pu être les causes de ce dédoublement des pièces zeugopodiques. Peut-être faut-il l’attribuer à une fracture des ébauches cartilagineuses ayant entraîné un trouble de leur différenciation ultérieure?

Du côté du porte-greffe, on ne note rien de spécial. La greffe, implantée sur le flanc, était trop loin de la colonne vertébrale pour que celle-ci ait pu être modifiée dans sa croissance, par la présence* du greffon.

En résumé , huit pattes postérieures de têtards de Bufo vulgaris , prélevées au moment où leur pouvoir régénérateur cesse, ont été transplantées sur des larves de Salamandre, au niveau du dos ou des flancs. Les têtards ayant fourni ces greffes ont tous présenté une cicatrisation des moignons, sans aucune régénération des parties manquantes. Les greffons ont été amputés au bout d'un temps variant de 6 à 37 jours après l'implantation. Dans aucun cas, ces greffons n'ont présenté, ni à l'examen de la forme extérieure, ni à l'examen histologique, la plus petite trace de régénération. Cependant, les greffons présentaient au moment de l'amputation une structure parfaitement conservée, des éléments histologiques bien vivants et avant continué leur différenciation. Ultérieurement se passent des phénomènes de dégénérescence portant électivement sur le tissu musculaire et parfois une transformation du tissu conjonctif en cartilage de néoformation.

Du côté du porte-greffe, on observe, dans la plupart des cas, une migration vers le greffon de cellules conjonctives qui peuvent être à leur tour englobées dans des cartilages de Salamandre néoformés. Lorsque la larve est assez jeune, et le greffon proche de la colonne vertébrale, celle-ci présente un changement d'orientation des pièces de l'arc neural en voie de formation qui se dirigent alors dans la direction du greffon, comme si ce dernier exerçait sur elles une sorte d’attraction.

E. GUYÉNOT

2 me Série. Transplantation de pattes antérieures ou postérieures de petits Crapauds métamorphosés.

Eu même temps que j'effectuais les greffes de la série Z avec des pattes venant de perdre leur pouvoir de régénération, j'ai pratiqué un certain nombre de greffes de pattes antérieures ou postérieures de tout jeunes Crapauds venant de se métamorphoser. Le but de cette expérience était le suivant. Si le milieu intérieur de Salamandre avait pu induire les pattes de têtards à régénérer, on aurait pu objecter que ces parties étaient trop proches du moment où la capacité de régénération venait de disparaître, et que l’expérience était insuffisamment démonstrative. Si par contre, des pattes de Bufo métamorphosés avaient présenté des phénomènes régénératifs, faction favorisante du milieu intérieur n’aurait pu être mise en doute. En réalité, ces pattes, pas plus que celles de la série précédente, n ont montré aucune trace de régénération.

J'ai réussi à conserver assez longtemps sept de ces hétérogreffes. Le tableau suivant résume les époques auxquelles les greffons ont été amputés et fixés.

Date de i

Amputation

Fixation

la greffe

après

amputation

après

implantation

Xi P

6 jours

45 jours

51 jours

Xs A

Xe A

Xa A

io n

X. 1. Patte postérieure amputée au niveau du genou et transplantée sur larve de Salamandre le 21 mai. Le surlendemain, la base du greffon est envahie par la lymphe. L’amputation au niveau du tarse a lieu le 27 mai (au bout de 6 jours); la section est cicatrisée le lendemain. 11 n'y a aucune régénération jusqu'au 10 juillet, date à laquelle le greffon est fixé (45 jours après l’amputation, 51 jours après l'implantation).

H ÉT ÉROGREFF ES

À l’examen histologique (fig. XI), le greffon présente la section du tibia et du péroné qui ont subi un début d’ostéogenèse. Ces deux pièces sont enchâssées dans une masse cartilagineuse, formée d’éléments de Crapaud. Nous retrouvons ici très nettement le phénomène de chondrification de voisinage, signalé plus haut. Autour de ce cartilage néoformé, on trouve une couche de fibroblastes avec tous les stades de passage entre les cellules libres et celles qui sont emprisonnées dans la substance fondamentale en

Coupe à travers la greffe XI. On voit le tibia et le péroné en partie ossifiés et enchâssés dans une masse de tissu cartilagineux néoformé (x 56).

voie de chondrification. Les parties molles sont constituées par ce qui reste du tissu conjonctif du Crapaud et de nombreux faisceaux de fibres musculaires en bon état. Les cellules conjonctives entourant le cartilage présentent des caryocinèses assez fréquentes.

Du côté du porte-greffe, on voit un processus cartilagineux de la neurépine venir se souder latéralement à la base du cartilage secondaire du greffon. On y rencontre des fibroblastes en train d’être emprisonnés dans la chondrine. Le contraste entre les cartilages néoformés de Crapaud et ceux renfermant des cellules de Salamandre est particulièrement net.

E. GUYÉNOT

X. 4. Greffe d'une patte antérieure, amputée au-dessous du coude, effectuée le 21 mai. La base gonflée persiste dans cet état jusqu’au 13 juin. A ce moment, une première amputation, faite à la base des doigts, est suivie d’une cicatrisation rapide. Le 23 juin, une nouvelle amputation est pratiquée, intéressant le carpe; la greffe est bien vascularisée et saigne à la section. Le greffon est envahi à sa base par la peau de Salamandre qui remplace peu à peu l’épiderme de Crapaud. Aucun changement jusqu’au 10 juillet, date à laquelle la pièce est fixée (23 jours après la première amputation, 17 jours après la deuxième et 48 jours après l'implantation).

L'examen des coupes montre que la greffe est enfoncée profondément, les pièces zeugopodiques étant implantées tout près de la neurépine. Les ébauches cartilagineuses du radius et du cubitus présentent une ossification périphérique de leur portion diaphysaire; les pièces du carpe restées dans le moignon sont entièrement cartilagineuses. Les épiphyses distales du radius et du cubitus paraissent en voie d’accroissement par assimilation d’éléments conjonctifs adjacents. On observe, en effet, à ce niveau, tous les passages entre le cartilage normal et les fibroblastes encore libres. Le tissu conjonctif et les faisceaux musculaires du greffon sont en bon état de conservation; l’épiderme est en partie du type Salamandre, et l’on trouve par endroits, en-dessous de la peau envahissante du portegreffe, les débris de l'ancien épiderme du greffon.

X. 5. Greffe de patte antérieure, effectuée le 27 mai. Evolution habituelle; amputation le 13 juin. Aucune régénération jusqu’au 10 juillet, date où la pièce est fixée (24 jours après l’amputation, 44 jours après l’implantation).

Les coupes (fig. XII) montrent que la greffe eot profondément implantée. Le radius et le cubitus présentent un début d’ossification. Les pièces cartilagineuses du carpe sont en bon état et noyées dans une masse de tissu conjonctif présentant par places des débuts de chondrification. Les faisceaux musculaires sont bien conservés, les sections de vaisseaux nombreuses. La peau de Crapaud a été remplacée à la base par celle de la Salamandre. Des débris épithéliaux de Crapaud, inclus dans le conjonctif, forment des amas et parfois des vésicules. Du côté du porte-greffe, on note la présence d'un pont mi-fibreux, mi-cartilagineux, formé de cellules de Sala-

HÉTÉROGREFFES

mandre et joignant la base des os du zeugopode du greffon à la neurépine du porte-greffe.

Coupe à travers la greffe X 5: o, radius; n, faisceaux musculaires; u, vaisseau sanguin; q, débris de l’épiderme de Crapaud en forme de vésicule; c, cartilages du carpe ( x 56).

X. 6 Greffe de patte antérieure effectuée le 27 mai Evolution habituelle. Amputation dans le carpe le 13 juin (après 17 jours). Cicatrisation et évolution normales. Aucune régénération jusqu’au 2 juillet (19 jours après l’amputation, 36 jours après la greffe). A cette époque, la larve porte-greffe, atteinte d’amibiase, est trouvée morte. Pas d’examen histologique.

X. 7. Greffe de patte antérieure effectuée le 27 mai. Evolution habituelle; amputation le 16 juin (20 jours). Cicatrisation avec

E. Gl YÉNOT

formation d’une saillie centrale. Aucune régénération jusqu’au 3 juillet, date de la fixation (17 jours après l’amputation, 37 jours après l'implantation).

Sur les coupes (fig. XI 11), le greffon se montre en parfait état de conservation, avec des cinèses assez nombreuses dans le cartilage et le tissu conjonctif. Les faisceaux musculaires sont tout à fait, normaux; la peau de Crapaud n’est remplacée par celle de Salamandre qu'à la base. Les ébauches en partie ossifiées du zeugopode sont noyées dans un cartilage nouveau, formé de cellules de Bujo-

Fie. Mil.

Coupe à travers la greffe X 7: /*, radius: .s, cartilages du carpe: </, faisceaux musculaires; o, cartilage secondaire à cellules de Crapaud, contre lequel vient buter, en bas. un cartilage de Salamandre partant de la neurapophyse gauche- ( X 56).

et passant insensiblement à une couche périphérique de fibroblastes encore libres. Le cas est assez comparable à celui de Z 3.

Du côté du porte-greffe, une migration de cellules a constitué un pont, partant de la neurapophyse droite et venant se souder à la base du cartilage secondaire du greffon. Ce pont, mi-fibreux, mi-cartilagineux, renferme des cellules de Salamandre.

HÉTÉROGREFFES

X. 8. Greffe d'une patte antérieure effectuée le 27 mai. Evolution normale; amputation au bout de 20 jours, le 16 juin. Cicatrisation un peu lente, bien que le greffon soit très vascularisé, et achevée seulement le 20 juin. Aucune régénération jusqu'au 10 juillet (24 jours après l’amputation et 44 jours après l'implantation).

L’examen histologique du greffon montre une excellente conservation de ses tissus ; le tissu musculaire, en particulier, a une structure parfaitement normale; les vaisseaux sont nombreux. Les pièces cartilagineuses de la base du carpe se sont accrues par assimilation de cellules conjonctives voisines. Le radius et le cubitus, dont les diaphyses s'ossifient, sont emprisonnés dans une gangue cartilagineuse de néoformation, passant insensiblement à des fibroblastes périphériques encore libres.

Pas de réaction spéciale du porte-greffe, l'insertion ayant eu lieu sur le flanc, loin de la colonne vertébrale.

X. 9. Greffe de patte postérieure, le 27 mai. Amputation le 16 juin. Aucune régénération jusqu'au 10 juillet (24 jours après l'amputation, 44 jours après l’implantation), date à laquelle la larve de Salamandre, atteinte d’amibiase, est trouvée morte. Pas d'examen histologique.

En résumé , dans cette série, comme dans la précédente, les pattes greffées ont conservé un excellent état de vitalité. Elles sont toujours richement vascularisées ; les éléments musculaires sont presque toujours parfaitement conservés et ne présentent pas la régression tardive observée dans la série Z, ce qui est sans doute en rapport avec l'âge plus avancé du greffon et la différenciation plus avancée des éléments contractiles.

Le squelette est toujours bien conservé et généralement ossifié en partie; dans la plupart des cas on note, comme dans la série Z, la transformation, en cartilage de néoformation, des couches conjonctives adjacentes aux pièces squelettiques. Ici encore, on observe tous les passages entre le cartilage déjà formé, des zones intermédiaires où les fibroblastes sont enfermés dans une substance fondamentale encore peu colorable et la couche externe de fibroblastes encore libres.

Du côté du porte-greffe, on n'observe plus de déviation sensible des cartilages des vertèbres, ce qui est dû à ce que les larves choisies

E. GUYENOT

étaient plus âgées; par contre, on voit, presque dans chaque cas, des traînées de cellules conjonctives se diriger de l’arc neural vers le greffon et se transformer en ponts cartilagineux (à cellules de Salamandre) allant buter contre les cartilages néoformés (à cellules de Crapaud) du greffon.

On observe toujours dans le greffon quelques cellules en carvocinèse, mais aucune trace, aucun début de régénération n’ont pu être relevés.