ET DE QUEUES DE TETARDS DE CRAPAUD

Les expériences qui précèdent ayant toutes fourni des résultats négatifs, en ce qui concerne la régénération des membres transplantés, j'ai cherché à réaliser des opérations de contre-épreuve en greffant, dans les mêmes conditions, des parties qui soient naturellement capables d’être régénérées. Si, sur le terrain étranger constitué par le porte-greffe, ces transplants continuent à manifester leur pouvoir régénérateur, ce serait, semble-t-il, la preuve que l’absence de régénération des pattes greffées n’était pas due aux conditions particulières de l’hétérogreffe.

Dans une première série, j’ai transplanté, sur des larves de Salamandre, de toutes jeunes ébauches de pattes postérieures de Bufo, avec une partie du territoire pelvien basal. Ces transplantations sont délicates et je n’ai pu en réussir que trois. Par contre, elles ont fourni des résultats très intéressants, en ce sens que les ébauches se sont développées, ont atteint plus de 3 fois leur longueur primitive et ont présenté une différenciation presque normale de leurs tissus. Ce phénomène m'a paru si remarquable que j’ai été conduit à le suivre le plus longtemps possible et que je ne me suis décidé à amputer ces transplants, qu’à une époque trop tardive, correspondant au moment où leur pouvoir de régénération était certainement déjà perdu. Il en résulte que ces essais apportent d'intéressants renseignements sur la vitalité des tissus greffés, mais non sur leur capacité primitive de régénération.

HÉTÉROGREFFES

Dans une deuxième série j'ai transplanté sur Salamandre des queues entières de têtards de Crapaud. Ces organes qui ont eomservé une vitalité et une motilité tout à fait remarquables, ont été amputés et ont manifesté très nettement, dans les conditions de l'hétérogreffe, leur aptitude à être régénérés.

3 me Série. Transplantation (Tébauches de pattes postérieures .

Les organes ont été greffés, alors qu'ils ne formaient qu'une petite saillie, un peu aplatie; avec eux, j'ai transporté une partie du territoire pelvien basal.

Y. 14. Greffe effectuée le 2 mai. Le 4 mai, la greffe est dessinée à la chambre claire (fig. XIV, 1); dans les jours suivants le greffon subit un accroissement notable; au bout de 17 jours, le 19 mai, le

Dessins, au même grossissement et à la chambre claire, représentant les étapes de la greffe Y 14: 7. après deux jours d’implantation; 2,faprès 17 jours; 3, après 29 jours; 4, au moment de l’amputation; 5, dix jours après l’amputation.

Rev. Suisse de Zool. T. oi. 1927.

E. GUY'ÉNOT

pied commence à être indiqué (fig. XiV, 2), tandis que le bourgeon s’est fortement accru et présente un léger gonflement de sa base. Le 31 mai (29 jours), on note sur le dessin (fig. XIV,3) le début de l'individualisation des doigts, mais, à partir de ce moment, la forme extérieure devient anormale, le greffon se courbe et l’on observe, à son intérieur, deux petites taches rouges, correspondant à des ruptures vasculaires.

Le 16 juin (fig. XIV, 4), 45 jours après l’implantation, l'amputation est faite dans le zeugopode. Le moignon se cicatrise rapidement et persiste, sans aucune régénération, jusqu'au 26 juin (fig. XIV, 5), date à laquelle la pièce est fixée.

Je décrirai d’abord l’état du fragment distal enlevé par l'amputation (fig. XV). Il renferme les extrémités épiphysaires du tibia et du

(loupe à travers le fragment amputé du greffon Y 14: /, tibia; />, péroné; /•, tarse; s, métatarse; ///, muscles; e, vaisseau sanguin; /, lac sanguin (x 70 ).

péroné; les cartilages du tarse, du métatarse et des orteils se sont bien différenciés. Toutefois, la patte est partiellement ectrodactylc, la superposition des coupes ne montrant la présence que de quatre doigts; ceux-ci, d’ailleurs, ne sont pas entièrement individualisés, mais se trouvent enfouis dans la masse commune des parties molles.

HÉTÉROGREFFES

L’existence de faisceaux de myoblastes normalement disposés, celle de caryocinèses nombreuses, montrent qu’après 45 jours d’implantation, le greffon est non seulement bien vivant, mais en état de croissance et de différenciation. On rencontre aussi la section de vaisseaux sanguins et, dans une zone correspondant à l’une des taches rouges, déjà visibles par transparence sur la patte entière, un amas fibrineux, renfermant des globules sanguins désorganisés; il s’agit d’un épanchement en voie de résorption, provenant sans doute d’une rupture vasculaire.

Si l’on se représente ce qu’était l'organisation de la minuscule ébauche de patte au moment de sa transplantation, il est hors de doute que le greffon a présenté un grand accroissement et une différenciation considérable de toutes ses parties. Rien ne peut mieux montrer combien les conditions du milieu intérieur de la Salamandre se trouvent être adéquates à une survie prolongée des tissus du Crapaud.

L’examen de la partie du greffon, laissée en place après amputation (fig. XVI), permet d’y retrouver les portions diaphysaires, déjà en partie ossifiées, du tibia et du péroné; leurs épiphyses proximales se sont accrues, par assimilation de cellules adjacentes. On rencontre également des faisceaux de myoblastes en train de se transformer en fibres plurinucléées.

Du côté du porte-greffe, on note l’existence d’une longue traînée de cellules, partant de la région des neurapophyses et qui est venue écarter l’une de l’autre les deux ébauches du tibia et du péroné, pénétrant en coin à l’intérieur du greffon. Cette masse cellulaire a subi une chondrification secondaire; on retrouve, en effet, à sa périphérie, tous les passages entre le vrai cartilage et les couches de fibroblastes encore libres. Il n’y a aucun doute que ces derniers, ainsi que ceux qui sont déjà transformés en chond.roblastes, sont des cellules de Salamandre.

Y. 15 et Y. 16. Greffes d’ébauches de pattes postérieures le 2 mai. Les transplants présentent un léger gonflement à leur base et s’accroissent considérablement. L’un présente une fugace indication des doigts, mais tous deux évoluent en prenant finalement une forme irrégulière. Les greffons sont amputés le 16 juin, 45 jours après l’implantation. Les moignons sont cicatrisés le lendemain et persistent, sans présenter aucune régénération, jusqu’au 3 et au

E. GUYÉNOT

5 juillet (17 et 19 jours après l’amputation, 63 et 68 jours après la greffe), dates auxquelles les larves de Salamandre meurent accidentellement de dessication. Pas d’examen histologique.

Fig. XVI.

Coupe à travers la greffe Y 14; on voit la traînée cartilagineuse (partie de l’arc neural du porte-greffe et qui est venue s’enfoncer en coin entre les pièces du z.eugopode du greffon ( x 56).

\ ine Série. Greffe de queues de têtards de Crapaud.

Cette série a été entreprise, en 1926, dans le but de remédier à l'insuffisance des résultats obtenus l'année précédente, avec les greffes d’ébauches de pattes (série Y). Je désirais avoir la preuve

HÉTÉROGREFFES

que des organes, de Crapaud, aptes à la régénération, conservent cette propriété dans les conditions de l'hétérogreffe.

Les queues de têtards ont été greffées entières, avec un peu des tissus de la région pelvienne. Dans la plupart des cas, la reprise n'a pas eu lieu; dans d'autres, la soudure ne s'est faite qu’en un point et la greffe, mal nourrie, n’a pas tardé à tomber en liquéfaction. Je n’ai pu conserver que quatre greffes, mais en excellent état. Comme dans le cas des pattes, la bonne implantation se traduit par le gonflement de la base sous l'influence de la pénétration des liquides du porte-greffe. Dès le lendemain de la transplantation, la queue commence à montrer quelques mouvements propres qui, les jours suivants, s'amplifient si bien que le greffon finit par battre l’eau exactement comme le ferait une queue de têtard en place. Ces mouvements sont d'ailleurs tout à fait indépendants de ceux de la Salamandre.

S. i. Greffe effectuée le 25 janvier 1926 (PI. l,fig. 1). Du26au30 y la queue remue et la base commence à se gonfler. Le 31 janvier (6 jours après l'implantation), la queue, toujours bien mobile, est amputée. Le lendemain (fig. XVII, E), la plaie est cicatrisée ; la base est encore gonflée, les mouvements sont amples et fréquents. Dès le

Fig. XVII.

Contours, dessinés au même grossissement et à la chambre claire, de la queue greffée S 1 : E. le lendemain de l’amputation; F . quatre jours plus tard - r C, au bout de 14 jours.

4 février, on note un accroissement des nageoires qui débordent la région axiale demeurée stationnaire; cette déformation est encoreplus accentuée le lendemain (fig. XVII F); l’épithélium de la partie

E. Gl'YENOT

axiale présente des indices de croissance représentés par des saillies dentelées au niveau de la cicatrice épaissie et fortement pigmentée. Le 9 février, la région axiale s’est accrue à son tour, si bien que l’échancrure existant entre les deux nageoires est maintenant comblée (PI. 1, fig. 1). Du 11 au 15, il s’est constitué un régénérât de forme à peu près normale, dont la partie axiale s’est encore accrue et dépasse le niveau atteint précédemment par les nageoires (fig. XVII G). Pendant tout ce temps, la queue a conservé sa mobilité caractéristique, indice de sa bonne vitalité. Le 17 février, elle est amputée à un niveau plus proximal. Le moignon continue à présenter des mouvements et devient le point de départ d’une nouvelle régénération qui débute vers le 24 février (après 25 jours de greffe). Peu après, la base du greffon est progressivement enfouie sous l’épithélium de Salamandre, la croissance du régénérât se ralentit ; la pièce est prélevée et fixée le 16 mars.

S. 6. Greffe effectuée le 26 janvier (PI. 1, fig. 2). La base se gonfle et la queue, bien mobile, est amputée le 31. La cicatrisation est faite en 24 heures (fig. XVIII H). Le 4 février, on note F élongation d’une

Fig. XVIII.

Contours, dessinés au même grossissement et à la chambre claire, de la queue, greffée S 6: //. le lendemain de l’amputation: /, au bout de 10 jours; J, au bout de 1 \ jours.

seule des deux nageoires. L’axe présente un petit nodule terminal, renflé, correspondant à un début d'accroissement. La régénération de l’axe et de l'une des nageoires se poursuit, l’autre nageoire restant à peu près stationnaire et indiquant ainsi le niveau de l’amputation (PI. 1. fig. 2 et fig. XVIII, I). A partir du 13 février, cette irrégularité de croissance tend à disparaître; dans la suite, la forme

HETEROGREFFES

se régularise, l’axe faisant une saillie appréciable entre les deux nageoires (fig. XVIII J). La greffe est prélevée et fixée le 18 février (23 jours après l'amputation). Pendant toute la durée de l'observation. la greffe n’a pas cessé de présenter des mouvements actifs.

S. 10. Greffe effectuée le 31 janvier (PI. 1, fig. 3). La queue, qui n'a présenté au début que de faibles mouvements, se gonfle à la base et devient plus mobile à partir du 5 février. Le lendemain, elle est amputée, assez près de la base. Le 7 février (fig. XIX A), la plaie

Fit;. XIX.

Contours, dessinés au même grossissement et à la chambre claire, de la queue greffée S 10: A, le lendemain de l’amputation; B , 4 jours plus tard: C. après 7 jours; D, après 8 jours.

rectiligne est cicatrisée. Quatre jours plus tard (fig. XIX B), les nageoires présentent un phénomène d'accroissement et débordent à droite et à gauche la région axiale où ne se voient que quelques dentelures épidermiques. Puis la portion axiale commence à s’accroître à son tour (fig. XIX G), atteignant le niveau des nageoires le 15 février (fig. XIX D). Pendant tout ce temps, la queue est bien mobile (PL 1, fig. 3). La partie axiale continue à s’accroître, dépasse le niveau des nageoires et la forme se régularise. La queue est prélevée et fixée le 18 février, 12 jours après l’amputation.

S. 16. Queue greffée le 31 janvier. Les mouvements d’abord très faibles et rares, deviennent plus intenses vers le 4 février. L'amputation est faite le 5. On note un début de régénération, commençant, comme précédemment, par les nageoires, que la partie axiale rattrape ensuite. La base, que la peau de Salamandre

E. Gl Y EN O T

tendait à recouvrir, est bientôt complètement enfouie et le greffon présente, à partir de ce moment, une régression rapide.

Dans 8 autres cas, la greffe avait bien repris et était mobile, mais, après l’amputation, la plaie ne s’est pas cicatrisée, ce qui a été suivi d’une fonte rapide du greffon, sans que l’on ait pu noter aucun phénomène de régénération.

L'étude histologique des greffons de queue en régénération a donné des résultats si semblables dans les trois cas examinés, que je n’en donnerai qu'une description d'ensemble. La fig. 20 se rapporte à S. 10 (greffon prélevé 12 jours après l’amputation, 18 jours après l'implantation).

Sur les coupes sagittales et bien orientées, onreconnait les organes axiaux, chorde, tube neural, et, sur les côtés, le lophioderme des nageoires dorsale et ventrale. La musculature ne s’observe que sur les coupes plus latérales, où elle se présente avec l'aspect normal de muscles métamérisés et en parfait état. La brusque dépression

HÉTÉROGREFFES

des nageoires indique approximativement le niveau de section: toutefois il faut tenir compte du fait que les nageoires ont présenté dès le début un phénomène de gonflement; en réalité, le véritable point de départ de la régénération est indiqué par un étranglement de la chorde, bien visible sur la figure, du côté ventral. La prolifération de la chorde se fait, ainsi que l’a décrit A. Xaville (1924), à partir des cellules périphériques. Il se forme ainsi un massif cellulaire conique, dont les éléments les plus basaux commencent à présenter la vacuolisation caractéristique. Le tube nerveux s’est accru parallèlement à la chorde.

Il n’est pas douteux que la queue, transplantée et amputée, a été l’objet de processus régénératifs indiscutables. Sans doute, les têtards témoins montrent, au bout de 12 jours, des régénérais

Coupe sagittale à travers le régénérât, un peu anormal, de la queue d'un têtard témoin (x 126).

un peu plus grands, dont la portion axiale est recouverte par une coiffe lophiodermique plus allongée. Cependant, dans quelques cas, la régénération de la queue des têtards aboutit à des aspects absolument comparables à ceux des greffons, ainsi que le montre la fig. 21, qui a trait à un têtard amputé le 5 mars et dont la queue

E. GUYÉNOT

a été fixée au bout de 12 jours, le 17 mars. Mieux que toute description, la comparaison des figures fait ressortir l'identité des processus.

Discussion des résultats.

I. Résumé. Les résultats des séries 1 et II montrent que 15 pattes de Bufo vulgaris , prises à l’époque où elles ne régénèrent plus normalement, ont continué à ne présenter aucune régénération, bien qu’elles aient été transplantées sur des larves de Salamandra maculosa dont le milieu intérieur est indiscutablement favorable aux processus régénératifs. Les pattes greffées appartenaient, soit à de jeunes Crapauds déjà métamorphosés, soit à des têtards âgés, dont les pattes postérieures avaient atteint la période critique (individualisation des doigts) à laquelle cesse leur aptitude à la régénération. Il s’agit donc, dans tous les cas, de pattes ayant perdu, ou venant de perdre leur pouvoir régénérateur; c’est ce que vérifie le fait qu’aucun des têtards ayant fourni ces greffes n’a régénéré les membres amputés. Ces- pattes n’ont nullement été influencées par le milieu intérieur de la Salamandre, dans le sens d’un retour à la capacité régénérative.

IL Conditions réalisées par V hétéro greffe. Ces résultats étant établis, il convient de se demander si l’expérience comporte des conclusions légitimes, si, en particulier, les conditions de milieu intérieur de la Salamandre, indiscutablement favorables à la régénération des pattes de cet organisme, sont assez voisines de celles de l’Anoure pour que les tissus de celui-ci puissent vivre et éventuellement régénérer. 11 y a, à ce sujet, deux points de vue à considérer: d’une part la possibilité de la présence dans le sang de substances spécifiques, permettant la régénération; d’autre part, la question de savoir s’il n’y a pas incompatibilité entre les tissus du Crapaud et le milieu intérieur de la Salamandre.

Si l’on suppose, comme je l’ai fait précédemment, que la régénération dépend du passage dans le sang de certains produits de glandes endocrines, il semble (pie les hormones, circulant dans le sang (h* la Salamandre, doivent pouvoir aussi exercer leur action sur les tissus du Crapaud. Les recherches faites dans ce domaine,

UÉTÉROGREFFES

principalement sur l’action de la glande thyroïde, ont, en effet, montré que des glandes appartenant à des animaux très éloignés des Batraciens, tels que les Mammifères, agissent sur les têtards dans le même sens que leurs propres organes glandulaires. Il est à peu près certain que les produits déversés dans le milieu intérieur de la Salamandre doivent être très voisins de ceux que produirait un jeune têtard de Crapaud; si la régénération ne dépendait que de questions d’ordre hormonique, la transplantation pourrait alors suffire à la faire réapparaître.

Par contre, il est si bien connu que les hétérogreffes ne fournissent, dans les cas les plus favorables, qu’une survie de courte durée, que l’on peut se demander si l’expérience n’est pas viciée dans dans son principe et si les greffons ne se sont pas trouvés dans des conditions absolument incompatibles avec la manifestation d'un phénomène aussi complexe que la régénération. Cependant, il ne semble pas impossible, que, dans quelques cas exceptionnels, l’hétérogreffe puisse être suivie d’une réussite durable. Dans mon laboratoire, M me Welti a constaté non seulement la survie, mais le développement tardif, après une phase dévolution, de greffes de testicules effectuées entre Bufo vulgaris et Bufo viridis . Il semble bien que dans le cas d’organes de Bufo vulgaris , transplantés sur Salamandra maculosa , le porte-greffe manifeste vis à vis du greffon une tolérance très suffisante pour que celui-ci puisse manifester, au moins pendant un certain temps, ses aptitudes à la croissance, à la différenciation et éventuellement à la régénération. C’est ce qui me paraît résulter des faits suivants.

1°) Les tissus des pattes de Crapaud examinés au moment où le greffon est amputé (17 à 37 jours après l’implantation) se montrent, en général, en excellent état de conservation (fig. VI). Même constatation pour le moignon resté en place qui est fixé après 23 à 63 jours de vie dans les conditions de l’hétérogreffe. Sans doute, dans les greffes de pattes jeunes, on note que les éléments musculaires en voie de différenciation ont en grande partie disparu, mais, dans les greffes plus âgées (série X), les fibres musculaires déjà formées sont toujours bien conservées. Il ne semble pas d’ailleurs que la dégénérescence des éléments contractiles soit de nature à inhiber les processus de régénération, au moins à leur début. Dans le cas de la patte, en effet, le phénomène primaire

E. GÜYÉNOT

essentiel est la constitution, sous la surface de section cicatrisée, d’un blastème cellulaire, dont les cellules se divisent activement et qui se différenciera progressivement en donnant un squelette de nouvelle formation (V. Bischler, 1926). Les muscles n’interviennent que beaucoup plus tard, donnant naissance à des myoblastes qui s’orientent au fur et à mesure de la différenciation des pièces squelettiques. Même en l’absence complète de muscles, ce blastème, formé d’éléments conjonctifs, aurait pu être constitué et manifester, par sa présence, au moins une tentative de régénération. Or, jamais l’examen histologique des greffons n’a rien montré de semblable; les pièces squelettiques coupées carrément — à moins qu’elles n’aient été englobées par un cartilage de néoformation — se trouvent immédiatement sous l’épiderme,ou séparées de ce dernier par un tissu lophiodermique banal. Cependant l’état des cellules conjonctives, cartagineuses et épidermiques, la présence de caryocinèses assez nombreuses, montrent que les éléments ont conservé leur vitalité. C’est ce qui résulte aussi du fait, souvent noté, que les greffons de pattes ont pu s’accroître légèrement et accentuer quelque peu la différenciation de leur forme extérieure.

2° Ces derniers phénomènes sont encore beaucoup plus nets dans le cas des transplantations .d ébauches de pattes postérieures (série Y). En quelques jours, ces parties se sont accrues jusqu’à atteindre près de 10 fois leur volume primitif (fig. XIV) ; en même temps, elles se sont différenciées avec formation des ébauches squelettiques du zeugopode, du tarse, du métatarse et des doigts (fig. XV). Des fdes de myoblastes sont venues se disposer le long de ces pièces squelettiques et s’y transformer en fibres musculaires. La forme extérieure de la patte est anormale, les doigts restent empâtés dans la masse commune des parties molles, le développement a été un peu ralenti, li n’en reste pas moins que les tissus de Crapaud ont pu vivre, s’accroître et se différencier en empruntant leur nourriture au milieu interne de la Salamandre.

‘>° Enfin, les résultats fournis par les queues greffées et amputées montrent que rien dans le milieu intérieur du porte-greffe n’est de nature à inhiber ces phénomènes régénéra tifs, lorsque le greffon porte en lui les potentialités nécessaires.

Il semble donc bien que devant cet ensemble de constatations,

HETEROGREFFES

on ne puisse prétendre que si les pattes transplantées n'ont pas été régénérées, c’est que la greffe sur Salamandre réalisait des conditions défavorables à la régénération. Ces expériences paraissent plutôt conduire à cette notion que ce n'est pas un changement spécifique du milieu intérieur du têtard qui fait disparaître, à un moment donné, la capacité de régénération de ces pattes, fin terrain favorable à l'établissement des processus régénératiîs ne suffit pas, en effet, à faire réapparaître l'aptitude perdue.

Il reste toutefois une objection sur la valeur de laquelle il est difficile de se prononcer. Les expériences de O. Schotté (1925) ont définitivement établi que la régénération des pattes ne se fait plus, chez les Tritons adultes, lorsqu'on en a supprimé l'innervation globale. Cette relation entre la régénération et l'innervation existe déjà — contrairement à ce que l'on pensait — chez les jeunes larves de Salamandre et de Triton. Nous ne savons pas s’il en est déjà ainsi chez les têtards d’Anoures, au moment où la patte en voie de différenciation a encore la capacité d'être régénérée; il est plus probable que, dans les stades très jeunes, cette relation de dépendance vis-à-vis du système nerveux n'est pas encore établie. Quoi qu'il en soit, on peut se demander si le greffon reçoit du porte-greffe une innervation adéquate. Sans doute, en même temps que les connexions vasculaires, des relations nerveuses s'établissent avec le porte-greffe et c’est ce qui fait que des tronçons de pattes de Salamandre, greffées sur le dos d'un organisme de même espèce, peuvent manifester, au bout de quelques jours, leur pouvoir régénérateur (Guyéxot et P. de Giorgi, 1923; P. de Giorgi, 1924). Mais s’il pénètre dans la patte de Crapaud greffée des nerfs de Salamandre, ceux-ci sont-ils capables d'innerver efficacement les cellules du greffon ?

Mes expériences ne permettent pas de répondre à cette question, car les seuls cas où les organes de Crapaud, transplantés sur Salamandre, ont pu régénérer concernent des greffes de queues qui ont en elles leur système nerveux propre, ainsi que le montre déjà leur motilité tout à fait caractéristique et indépendante de celle du porte-greffe. Je ne crois pas cependant que cette objection, tirée de la nécessité possible d'une innervation adéquate, soit susceptible d'annuler toutes les conclusions précédentes. Généralement, après la suppression du système nerveux, les pattes qui ne doivent pas régénérer montrent cependant, sous la peau cicatricielle, la for-

E. GUYENOT

'il)

mation d'un petit blastème transitoire, indice d’un début de régénération qui avorte. JDans le cas du têtard de Crapaud, où il n'est même pas certain que ce système nerveux soit indispensable, je n'ai jamais rien observé qui ressemblât à la formation de ce blastème rudimentaire.

IV. Changements de structure par induction. Au cours de l’évolution des greffons, j'ai constaté à plusieurs reprises deux ordres de faits intéressants. D'une part, la présence du greffon exerce sur les parties conjonctives du porte-greffe une sorte d'action attractive. 11 y a ainsi migration d’éléments, venant surtout des parties fibreuses de la colonne vertébrale, qui pénètrent dans le greffon et y subissent une évolution particulière. Cette action attractive se manifeste également sur les ébauches squelettiques en voie de différenciation du porte-greffe, telles que les neurapophvses, qui s'orientent alors dans la direction du transplant.

D'autre part, les tissus conjonctifs du greffon lui-même subissent, au contact de ses parties squelettiques, une chondrification progressive, si bien que les cartilages initiaux, tout en subissant un début d’ossification, se trouvent englobés à l’intérieur d’une masse cartilagineuse périphérique. Cette transformation n’est pas spéciale aux cellules du greffon. Lorsque les cellules migratrices du portegreffe arrivent au contact de ces cartilages de néoformation, elles se trouvent à leur tour emprisonnées dans une substance fondamentale en voie de chondrification et prennent peu à peu le caractère de cellules cartilagineuses de Salamandre. Tout se passe comme si les tissus conjonctifs subissaient une sorte de contamination, ou plutôt comme si quelque substance, diffusant à partir des pièces squelettiques primitives, entraînait la chondrification, de proche en proche, des parties adjacentes.

L'étude de ce processus montre des particularités qui me paraissent en harmonie avec les idées de J. Xageotte (1916-17) sur la formation des substances conjonctives. On trouve, en effet, tous les passages entre le cartilage vrai, des cellules ayant encore le caractère de fibroblastes, emprisonnées dans une substance incomplètement « métamorphisée » et des couches périphériques de fibroblastes encore libres. Le mode d’extension progressive de ces transformations donne bien l'impression que ce sont les substances mortes, constituant la substance fondamentale qui présentent de

HÉTÉROGREFFES

proche en proche un changement d’état, et que les cellules emprisonnées ne font que subir la différenciation structurale qui leur est ainsi imposée.

Cette sorte d’évolution des tissus conjonctifs, induite par la présence d’un cartilage préexistant, se retrouve d’ailleurs, au cours de la régénération normale, et constitue le processus essentiel qui aboutit au complètement des pièces squelettiques intéressées par la section et restées dans le moignon. Ici aussi, on voit la surface des cartilages .tapissée par des couches de fibroblastes qui peu à peu se trouvent emprisonnés dans une substance fondamentale en voie de transformation et qui n’acquièrent que secondairement la structure de véritables chondroblastes. Au cours de la différenciation des régénérats eux-mêmes, la présence des tissus de base exerce, ainsi que je l’ai montré avec de Giorgi (1923), une influence déterminante sur leur évolution. Cette action est d’autant plus remarquable que les régénérats isolés se montrent capables de croissance, mais non d'autodifférenciation (de Giorgi, 1924). On peut se demander si cette action mystérieuse des anciens tissus déjà organisés ne dépend pas, pour une part, de transformations analogues effectuées par induction, procédant de proche en proche, et portant surtout sur les parties non vivantes qui constituent la trame intime des tissus.

V. Régénération et territoires organiques. Si Ton néglige l'objection basée sur une insuffisance possible d’innervation des greffons — objection qui est cependant de nature à ne permettre de donner aux conclusions que j’ai formulées qu'un caractère provisoire — les faits observés sont en faveur de cette idée que la perte du pouvoir régénérateur ne dépend pas d’une modification globale de l’organisme, mais est une expression d’un changement local intervenu dans les parties elles-mêmes.

Cette conclusion est en accord avec les observations de Naville qui a montré que si les Grenouilles adultes ne sont plus susceptibles de régénération, cela n’est pas dû à une modification spécifique de leur milieu intérieur, puisque les organes larvaires greffés sur elles peuvent encore y manifester leur capacité régénérative. Cette façon de voir est encore confirmée par cette observation sur laquelle j’ai précédemment insisté, que, chez le têtard, les pattes ont déjà perdu leur aptitude à régénérer, alors que la queue la manifeste encore.

E. GUYENOT

Le fait que la disparition de la capacité de régénération n est pas simultanée dans tout Vorganisme, montre bien qu'il s'agit là de modifications d'ordre local.

Cette interprétation me parait surtout intéressante parce qu’elle se rattache à une série de faits que j’ai observés et qui montrent que si l’organisme présente une indiscutable unité physiologique résultant des interactions entre ses parties constitutives, il n’en est pas moins, à une autre échelle, une mosaïque de territoires ayant des capacités de réaction, de morphogenèse et de régénération propres r territoires qui sont vraisemblablement l’aboutissement chez l’adulte des localisations germinales reconnaissables dès le début du développement embryonnaire et même dans le cytoplasme de l’œuf. En ce sens, le « territoire patte » est, dans son évolution, différent du « territoire queue » et il n’est pas étonnant que la perte du pouvoir régénérateur, correspondant à une modification encore inconnue r puisse se produire dans le premier alors que le second conserve,, pendant ce temps, ses potentialités régénératives.

Cette notion de territoires, qui me paraît devoir jouer en biologie un rôle important, repose sur des constatations solides. Plusieurs expériences, effectuées dans mon laboratoire, ont permis de délimiter certains d’entre eux. O. Schotté (1926 b) a montré que si l’on extirpe entièrement le territoire de la queue chez des Tritons adultes ou des larves d’Urodèles, cet organe n’est plus régénéré; il suffît, au contraire, de laisser une petite partie de cette région pour que l’organe puisse être reconstitué. J’ai de même montré avec M. Vallette (1925-26) que la régénération du museau chez les Tritons et les larves de Salamandre ne se produit que si Ton a laissé en place une partie du territoire correspondant. A la lumière de ces faits, la régénération, chez les Batraciens, apparaît moins comme une propriété globale de Vorganisme que comme une Caractéristique de tel ou tel territoire de Vindividu.

L'existence de ces territoires ressort encore des expériences que j’ai faites avec O. Schotté (1926), relatives à l’action d'excitation à la croissance, exercée par les nerfs sur les fissus. Reprenant les expériences de Locatklli (1925), nous avons constaté que si l’on dévie le nerf brachial ou le nerf sciatique de son trajet normal, en le faisant aboutir à la peau dans la région de l’épaule ou du bassin, il provoque la croissance, en cet endroit, d’une patte hétérotopique. Mais ce résultat n'est obtenu que si le nerf ne sort pas, en ce qui

HÉTÉROGREFFES

concerne son point d’aboutissement, du territoire basal du membre, dont nous sommes en train de délimiter la configuration exacte. Si, au contraire, le nerf sort de ce territoire, de manière à aboutir sur le flanc, il ne provoque aucune croissance. Nous avons, d’autre part, réussi à faire entrer le nerf brachial dans la zone de la crête dorsale et le nerf sciatique dans le territoire de la queue. Chacun de ces territoires répond alors à l’action excitatrice du nerf suivant ses propres potentialités, en formant une portion de crête surélevée ou une petite queue supplémentaire.

Ces résultats sont encore confirmés par une autre méthode; avec K. Ponse (expériences non publiées), au lieu de faire aboutir le nerf dans un territoire étranger, nous avons extirpé la plus grande partie du territoire de la patte, à l’exception du nerf brachial et transplanté à la place une portion des tissus dorsaux de la queue, en faisant pénétrer le nerf brachial dans le territoire transplanté. Ce dernier a répondu à l’excitation à la croissance par la formation, à la place de la patte, d’un organe aplati, ayant les caractères, la structure et la pigmentation caractéristique de la ligne médiodorsale de la queue.

Dans un autre ordre d’idées, K. Ponse (1926) a récemment montré que la production des excroissances digitales chez les Crapauds mâles correspond à une réaction spécifique de certains territoires cutanés vis-à-vis des hormones testiculaires. Si l’on transplante un morceau de la peau des doigts portant des excroissances sur la patte postérieure, le transplant conserve sa structure caractéristique dans sa nouvelle localisation. Inversement, un fragment de peau du pied, transplanté à la place du précédent, garde son aspect primitif sans acquérir aucune excroissance.

Cette notion de territoires d’organisation me parait de nature à permettre de mieux comprendre la réalisation de la morphologie des organismes, en fonction des données apportées par la génétique. Un organisme tient de ses parents une somme de facteurs héréditaires, qui, en agissant sur le fonctionnement des cellules, conditionnent, d’une façon médiate, la réalisation de certains caractères, tels que la couleur ou la forme des poils, la couleur des yeux, l’aptitude du cerveau à tel ou tel travail, la fécondité, etc. Or, par le jeu des divisions cellulaires équationnelles, chaque lignée cellulaire doit recevoir (au moins en général) le même patrimoine héréditaire, si bien que les cellules qui vont former le foie, le pancréas ou les yeux,.

E. GUYENOT

renferment toutes les mêmes facteurs. Or, les facteurs en relation avec la forme ou la couleur des yeux n’interviennent d’une façon apparente que dans les cellules qui édifient cet organe, c’est-à-dire ne trouvent les conditions de réalisation des particularités qu’ils conditionnent que dans certaines lignées cellulaires, dans certains territoires. Si ces territoires correspondent, ce qui est très probable, à une ségrégation et à une différenciation progressives des territoires primitifs de l’œuf (les localisations germinales), il faut rechercher forigine de leurs différences dans la nature même du cytoplasme de leurs éléments. En ce qui concerne la compréhension de la morphogenèse, l’existence de ces territoires spécifiques représente un chaînon de plus dans la série des processus qui relient le facteur génétique à la réalisation d'un organe ou d’une particularité.

La notion de territoire se retrouve encore dans d'autres domaines. Les recherches de Maud Slye (1916) sur le cancer spontané des souris ont montré que certaines lignées présentent des cancers du foie, d’autres des néoplasmes des ovaires, ou de l’estomac. Les lignées à cancer hépatique présentent, à côté de tumeurs malignes, de simples adénomes, mais qui sont aussi localisés dans le foie. On observe, chez l'homme, des différences raciales analogues dans la localisation des tumeurs les plus fréquentes. Il semble bien que l’on ait affaire moins à une « hérédité du cancer » qu’à une susceptibilité spéciale de tel ou tel organe, de tel ou tel territoire. Entre ces territoires existent vraisemblablement des relations d'interdépendance, d’inhibition réciproque qui limitent leur capacité de croissance théoriquement illimitée (culture de tissus); de ces actions réciproques résulte une corrélation d’ordre spécial, dont l’étude n’est pas même ébauchée, mais qui constituera probablement dans l’avenir un des chapitres les plus importants de la morphologie expérimentale et de la pathologie générale.

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